Institut national de formation supérieure paramédical

Skikda

Le thème:
Séro_diagnostic CMV
Présenté par: Encadré par:
• Arbi Nawal MR Laib
• Boucetta Nada
• Bourouis Haroun
• Derbal Haroun
 Plan Du travail :
01 02
Définition Sérologie CMV

03
Technique d’analyse 04
Interprétation
des résultats
 Définition :
C'est un virus de la famille des Herpesviridae.il est
pandémique qui peut infecter les humains. Il est
considéré comme l’un des virus les plus répandus au
monde. Le virus peut provoquer une infection virale
transitoire chez les individus en bonne santé qui ne
développent aucun symptôme
Le CMV se propage principalement par contact
direct avec des fluides corporels infectés, tels
que la salive, l'urine et le lait maternel. Chez la
femme enceinte, le virus peut être transmis au
fœtus pendant la grossesse.
Sérologie de CMV:
La sérologie du cytomégalovirus
(CMV) est un examen de
laboratoire qui permet de détecter
la présence d'anticorps anti-CMV
dans le sang. Les anticorps sont des
protéines produites par le système
immunitaire en réponse à une
infection.
Il existe deux types d'anticorps anti-CMV : les anticorps
IgM et les anticorps IgG. Les anticorps IgM sont les
premiers à apparaître après une infection, tandis que
les anticorps IgG apparaissent plus tard et persistent
pendant toute la vie.”
La sérologie du CMV est prescrite pour les raisons
suivantes :

* Pour diagnostiquer une infection à CMV active ou passée

* Pour évaluer le risque de transmission de l’infection à
CMV d’une femme enceinte à son fœtus
* Pour surveiller l’infection à CMV chez les personnes
immunodéprimées
Techniques d’analyses:
Il existe plusieurs techniques
d'analyse sérologique du CMV. Les
techniques les plus courantes sont :
 01
La technique d'immunofluorescence indirecte
(IFI) :
La technique
d'immunofluorescence
indirecte (IFI) est une
méthode sérologique
utilisée pour détecter la
présence d'un antigène
dans un échantillon
biologique. Elle est basée
sur la réaction antigène-
anticorps, révélée grâce à
un second anticorps
spécifique du premier et
couplé à un fluorochrome.
La technique se déroule en deux étapes :

Incubation de l'échantillon avec

l'anticorps primaire : l'anticorps
primaire est un anticorps spécifique de
l'antigène que l'on souhaite détecter. Il se
lie à l'antigène présent dans l'échantillon.
Incubation de l'échantillon avec
l'anticorps secondaire : l'anticorps
secondaire est un anticorps dirigé contre
les immunoglobulines de l'espèce où a été
produit l'anticorps primaire. Il
 est couplé à un fluorochrome, une molécule qui émet de la
lumière lorsqu'elle est excitée par une lumière de longueur
d'onde spécifique.
L'anticorps secondaire se lie à l'anticorps primaire, qui est
lui-même lié à l'antigène présent dans l'échantillon.
L'échantillon est ensuite lavé pour éliminer les anticorps
non liés.

Pour observer l'échantillon, on utilise un microscope à

fluorescence. La lumière émise par le fluorochrome
permet de visualiser les zones de l'échantillon où
l'antigène est présent
 02
La technique ELISA
 La technique ELISA, ou enzyme-linked immunosorbent assay, est une
méthode immunochimique quantitative qui permet de détecter et de
quantifier la présence d’antigènes ou d’anticorps dans un échantillon. Elle
est basée sur la réaction entre un anticorps et un antigène, et sur l’utilisation
d’une enzyme couplée à l’anticorps.
La technique ELISA se déroule en plusieurs étapes :

L’échantillon est déposé sur une plaque à puits.

Les puits sont recouverts d’un anticorps spécifique de l’antigène ou de
l’anticorps que l’on souhaite détecter.
L’échantillon est incubé avec la plaque.
Les puits sont lavés pour éliminer l’excès d’anticorps non liés.
Un anticorps secondaire couplé à une enzyme est ajouté aux puits.
L’échantillon est incubé avec la plaque.
 Les puits sont lavés pour éliminer l’excès d’anticorps secondaire non
liés.
Un substrat de l’enzyme est ajouté aux puits.
La réaction enzyme-substrat produit un signal colorimétrique ou
fluorescent.
L’intensité du signal est proportionnelle à la quantité d’antigène ou
d’anticorps présent dans l’échantillon.
Technique d’ ELISA la plus utilisée
ELISA sandwich : deux anticorps spécifiques de
l'antigène sont utilisés. L'anticorps primaire se
lie à l'antigène, et l'anticorps secondaire se lie à
l'antigène déjà lié à l'anticorps primaire
 03
La technique d'immunoprécipitation
 La technique d’immunoprécipitation est une méthode
utilisée pour isoler et purifier une protéine spécifique à
partir d’un mélange de protéines. Elle est basée sur la
réaction entre un anticorps spécifique de la protéine que
l’on souhaite isoler et la protéine elle-même.

La technique d’immunoprécipitation se déroule en

plusieurs étapes :

Le mélange de protéines est incubé avec un anticorps

spécifique de la protéine que l’on souhaite isoler.
Les protéines non liées sont éliminées par centrifugation
ou filtration.
Le précipité formé est dissout dans un solvant approprié.
La protéine d’intérêt est purifiée par une technique
appropriée, telle que l’électrophorèse ou la
chromatographie.
 Interprétation des résultats :
Les résultats de la sérologie du CMV sont
interprétés en fonction de la présence ou de
l'absence d'anticorps IgM et IgG.

* Anticorps IgM négatifs et anticorps IgG

négatifs : cela signifie que la personne n'a
jamais été infectée par le CMV.
* Anticorps IgM positifs et anticorps IgG
négatifs : cela signifie que la personne est en
phase aiguë d'infection à CMV.
* Anticorps IgM négatifs et anticorps IgG
positifs : cela signifie que la personne a été
infectée par le CMV dans le passé.
Merci