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Procédure de la collecte et du transport des

prélèvements de selles
Laboratoire National de Référence de la
Poliomyélite

 Nomination du laboratoire de virologie en 1994


Laboratoire National de la Poliomyélite (LNP);

 Accréditation du laboratoire par l’OMS depuis 2001


Laboratoire National de Référence OMS de la
Poliomyélite (LNRP);
Rôle du laboratoire dans l’éradication de la
Poliomyélite

 L’isolement et l’identification du sérotype


des poliovirus;

 Recherche des entérovirus non-polio:


Echovirus, Coxachivirus, …

 A partir des échantillons de selles


 Procédures et réactifs standardisés
Rôle du laboratoire dans l’éradication des
poliovirus sauvages

 Coordination et mise en œuvre des activités

de confinement.

- Collaboration avec l’OMS;

- Coordination avec la DELM et le PNI;


Méthodes de Diagnostic

 Prélèvement: selles;

 Isolement sur lignées continue RD et L20B ;

PCR en temps réel : différenciation intra


typique (Sauvage ou vaccinale);

 Séquençage: (Origine de la souche sauvage


par analyse phylogénétique).
Algorithme d’analyse
OMS - 2009
Prélèvement de selles

Isolement sur lignées cellulaire

Résultat Polio Négatif Résultat Polio Positif

(Real-time PCR)

Résultat 10 jours (au lieu de 14 jrs) Le jour même


Procédure de la Collecte et du
transport des prélèvements
de selles
Prélèvement et envoi des échantillons de selles
Prélèvement et envoi des échantillons de selles

 Les prélèvements sont placés dans la glacière jaune


en mettant des accumulateurs de froid autour des
échantillons pour assurer une chaîne de froid
rétrograde jusqu’au laboratoire (4 - 8°c).
Prélèvement et envoi des échantillons de selles

 Placer la fiche du laboratoire (Fiche de prélèvement


de selles) dans une enveloppe puis dans un sachet en
plastique. Coller l’enveloppe à l’extérieur de la caisse
isotherme pour éviter la contamination de la fiche de
prélèvement de selles

 Ne pas mélanger différents échantillons dans la même


caisse isotherme (crachats, selles, sang….) et éviter
d’utiliser une caisse d’un autre programme….
Prélèvement et envoi des échantillons de selles

 Acheminer les échantillons par le moyen de transport


le plus rapide et le plus direct au laboratoire de
Poliomyélite à l’INH

 Les échantillons doivent parvenir au laboratoire dans


les 72 heures suivant leur prélèvement (une mauvaise
conservation au delà de 3 jours, peut détruire les
éventuels virus).

 Informer le laboratoire de l’envoi des prélèvements.


Prélèvement et envoi des échantillons de selles

Il faut remplir deux fiches:

 Fiche d’investigation d’un cas ou contact de cas de


PFA, il faut l’envoyer au service central (DELM).

 Fiche de laboratoire qui doit accompagner les


prélèvements, à envoyer au laboratoire de virologie
de l’INH.
Prélèvement et envoi des échantillons de selles
Critères de prélèvement en bon état

 Les accumulateurs de froid doivent être congelés


24 heures auparavant de l’envoi des prélèvements.

 A l’arrivée des prélèvements le dispositif de contrôle


de la T° doit afficher une température < 8°C.

 Le volume de l’échantillon est adéquat (>8 gr).

 Le bouchon est bien vissé pour éviter une déperdition ou


une dessication.

 Les informations appropriées sont incluses.


Cas fortement suspect de poliomyélite et prélèvement
chez les contacts
Définition de cas de PFA 

"Tout enfant de moins de 15 ans présentant une


paralysie flasque aiguë " D’après l’OMS

même si l’origine non poliomyélitique est certaine

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Définition de cas fortement suspect de poliomyélite

" Si les données démographiques, cliniques et


épidémiologiques du patient cumulent un score
de suspicion de cas fortement suspect de
poliomyélite supérieur ou égal à 6 sans
dépasser un score de 20 " D’après l’OMS
Barème de calcul du score pour chaque cas de PFA

Critères Classes Score


Âge du cas < 5 ans 2
Fièvre au début de la paralysie 1

Signes cliniques Paralysie asymétrique 2


Progression rapide de la paralysie  < 3 jours 2

Voyage en zone endémique 3


Risque d’exposition Autre PFA dans l’entourage 2
au virus sauvage
Province frontalière avec un pays voisin 2
Doses de VPO reçues par le cas = 0 3
Doses de VPO reçues par le cas = 1 à 3 2
Vaccination par le
**Couverture Vaccinale de la C/S*
C/S < 70% 3
VPO
**Couverture Vaccinale de la C/S *de 70% à
2
80%
Score maximum 20
* C/S = Circonscription Sanitaire ** information disponible chez les responsables locaux du ministère de la santé.
Prélèvement de « Hot case »

il faut collecter et acheminer au laboratoire le plus rapide


possible :

 Deux prélèvements de selles pour le cas;

 Un prélèvement de selles pour chaque


entourage (5 enfants de moins de 5 ans les plus
proche du patient );

il faut informer le laboratoire.


Définition de Contact d’un cas de PFA 

" Tout enfant de moins de 5 ans, ayant été en


contact direct et étroit avec un cas de PFA
durant la période s’étalant entre la semaine qui
précède le début de la paralysie de cas et les 2
semaines qui suivent " D’après l’OMS

• Un contact direct et étroit :


– frère, sœur
– tout autre enfant vivant sous le même toit
– ami de jeux ou de classe, un voisin
20
20
Prélèvement chez les contacts

Situations où il faut faire un prélèvement de selles dans


l’entourage proche du patient:
 Si le cas de PFA décède avant d’être prélevé,

 Si le délai entre le prélèvement et le début de la


paralysie dépasse 14 jours,
 Si le malade est un cas fortement suspect de
poliomyélite.

Il faut prélever 5 enfants de moins de 5 ans dans


l’entourage proche du patient
Prélèvement chez les contacts
Prélèvement chez les contacts

 Pour les prélèvements de selles chez les entourages,

la procédure de collecte, de conditionnement et du


transport de ces prélèvements est la même que celle des
prélèvements de cas de PFA.
Non conformités souvent relevées

• Délai entre le début des symptômes et


acheminement vers le laboratoire.

• Quantité de prélèvement.

• Qualité du conditionnement de transport.

• Fiche non renseigné.


Merci pour votre attention

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