Tp : mutations provoquées chez

la levure.
 Objectif : on cherche à montrer que des facteurs environnementaux, comme
les UV, peuvent favoriser l’apparition de mutations.

Des levures Saccharomyces cerevisiae de souche ade2 formant des colonies rouges
sont cultivées sur un milieu nutritif gélosé dans des boîtes de Pétri. Une colonie
regroupe plusieurs centaines de cellules qui sont invisibles individuellement. Lors de la
mise en culture, on veille à ce que les cellules soient isolées les unes des autres pour
que chaque colonie formée ne soit issue que du développement d’une seule cellule.
Les levures sont exposées pendant des durées différentes à un rayonnement ultra-
violet (O, 15, 30 ou 60 secondes). Chaque boîte de Pétri est ensuite placée dans un
incubateur pendant 5 jours afin que les cellules se multiplient et que les colonies soient
visibles. Vous disposez des photographies de boîtes de Pétri ayant subi les différentes
conditions d’exposition aux UV.
Activié 1 Vérification du phénotype cellulaire des levure Ade2 souche R -

levure : aspect microscopique

et ultracelullaire

Saccharomyces cerevisiae
Microscope optique, état frais,
x 1000 (souche sauvage)
Activité 1 observer les levures
souche ade2 et préciser les
caractéristiques de leur phénotype Schéma d’une cellule de Levure
cellulaire.
La Levure, Saccharomyces cerevisiae, est un eucaryote unicellulaire.
Schéma protocole expérimental Mutation provoquée - levure Ade2 souche R

2 gouttes 2 gouttes
ensemencement
de boîtes de pétri
(milieux gélosés)
+ étalement
1 2
UV
Dt
suspension de =15s
levures Ade2
souche R
(rouge)
étuve
t°=25°C
T : 7 jours
1 2

colonies rouges (R)

résultats au
Réaliser le protocole expérimental
colonies beiges (B) bout de 7
jours 2
1
Résultats expérimentaux

Activité 1 Parmi ces résultats, certaines boites de pétri ne sont pas exploitables,
Indiquer la ou les boites correspondantes et proposer une explication
 Activité 2 exploitation des résultats

L’expérience dont les résultats vous sont présentés ici a pour but de vérifier l’effet
d’agent de l’environnement (UV) sur l’information génétique des levures Ade2 .

1 - Réaliser un schéma de la boite T60s

2 - Réaliser un graphique à partir du dénombrement effectuer grâce au logiciel

mesurim (version en ligne)
Consigner vos résultats dans un tableau (sont attendus le nombre total de colonie,
le nombre de colonies rouges, le nombre de colonie blanche, le pourcentage de
colonie blanche

3 - Exploiter un graphique
- rechercher les points caractéristiques du graphique et les entourer sur celui-ci
Rédiger votre réponse :
- présenter le document
- décrire et traiter les données
- interpréter les résultats
- conclure
Boite de pétri gélose

Colonie de levure blanches

Colonie de levure rouges

Document ressource : le phénotype des colonies de levures

M2 adénine
M1 M3

Enzyme 1 Enzyme 2 Enzyme 3

Chaîne de biosynthèse de l’adénine au sein deslevures

sauvages

M M2
1
Enzyme 1 Enzyme 2 inactive

Chaîne de biosynthèse de l’adénine au sein des levures

ade2
10
Activité 3 comparaison des séquences des allèles chez la souche ade 2 et souche sauvage

Ouvrir génie gène (version en ligne) ou anagène

Utiliser le fichier ade2.edi

Comparer les allèles et consigner vos résultats dans un tableau (à concevoir)

Remarque 1:
- l’allèle 1 est l’allèle sauvage
- l’allèle 2 est l’allèle présent chez la souche ade2

Remarque 2 :
- les levures sont de eucaryotes diploïdes de formule chromosomique : 2n = 32

Activité 4 Rédiger un bilan

Vous pouvez notamment utiliser le vocabulaire suivant dans votre bilan

- allèle, agent mutagène, enzyme génotype, gène, mutation, phénotype, protéine,
séquence de nucléotide...