UniversitBadjiMokhtar -Annaba Facult de Mdecine Dpartement de Pharmacie Laboratoire de Toxicologie

TP N 02 :
Recherche des mdicaments caractre acide Recherche et dosage des salicyls

Ralis par :

BAALA Med Amine

Groupe : 01

Anne Universitaire 2011/2012

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Recherche des mdicaments caractre acide

1) Extraction acide (ther acide)
Dans une ampoule dcantation de 250 ml, mettre : 20ml dchantillon +1ml dHCl 6N +20ml dther di thylique. N.B : Il faut avant tous vrifier le PH acide du mlange. Puis on procde : Une agitation nergiquement (2min). Une dcantation et limination de la phase aqueuse. Une dshydratation de la phase organique (par sulfate de na anhydre). Une agitation (10 secondes) et une filtration dans 2 capsules. Une vaporation sec sur plaque chauffante.

2) Sparation par la chromatographie sur couche mince

Prparation de la plaque (1cm de la gouttire et de 10cm de front). lution de la capsule avec lthanol puis on spote les talons : Gardnal barbiturique. Procalmadiol carbamate. Migration aprs avoir plac la plaque dans une cuve contenant une phase mobile (chloroforme 90 / actone 10). Aprs la migration on retire la plaque et on la laisse scher.

3) Rvlation
Aprs lobservation de la plaque sous la lampe de Wood, la rvlation de la plaque se fait par : Ractif LEMAIRE barbiturique. Schage carbamate.

4) Raction spcifique didentification : (sur les rsidus dvaporation)

A) Raction de PARRI barbiturique (coloration violette aprs une rotation douce) : Dans 3capsules (blanc, talon, chantillon), on rajoute : 1ml dthanol absolu (bien gratter le fond de la capsule). 1ml de nitrate de cobalt prpar dans lthanol 1%. 1ml de dithylamine thanolique 33%. N.B : cette raction est inhibe par les salicyls. B) Raction au furfurol carbamates (coloration violette aprs une rotation douce) Dans 3capsules (blanc, talon =procalmadiol, chantillon), on rajoute : 1,5ml dactone. 0,1 dacide sulfurique pur. 0,1ml dune solution de furfurol au 1/10 dans lactone (prparation extemporane).

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Recherche et dosage des salicyls

1) Principe de la raction
En milieu chlorhydrique et en prsence de chlorure mercurique, lacide salicylique va ragir par son hydroxyle phnolique sur les ions ferriques en dveloppant une coloration violette, proportionnelle la quantit dacide salicylique prsente avec le ractif de TRINDER.

2) Mode opratoire

a) Ractifs Ractif de TRINDER (40g chlorure mercurique +850ml Eau distille) que lon chauffe et aprs refroidissement on ajoute un mlange : 40g Fe(NO3).9H2O + 120 ml dHCl. Solution de NaOH 40%. Solution talon dacide salicylique 250 mg/l (250 mg dacide +1000 ml deau distill). La conservation se fait +4C. Solution dacide chlorhydrique au 1/10. Rq : des ractions faussement positive peut se manifester lorsquil sagit dune forte concentration de drivs phnothiaziniques qui -dans les urines- donnent une lgre coloration. b) Recherche des salicyls dans le liquide gastrique : Se fait par la mme raction mais il faut transformer les sels et esters salicyls en ion salicylique (par lhydrolyse alcaline) qui donne avec le ractif de TRINDER une coloration violette. Hydrolyse (10ml de liquide gastrique +10ml eau distill +1ml de solution de soude 40%. Dilution 1/5 me d1ml de la solution hydrolys puis on ajoute Hcl (pour amener le PH 5). Raction : Solution neutralise + ractif de TRINDER coloration violette. 1ml 5ml c) Recherche et dosage des salicyles dans le sang Recherche dans le sang : La connaissance de la salicylmie est essentielle pour la dtermination de lintensit de lintoxication elle est indispensable et doit tre renouvele toute les heures 3 fois de suite. Raction : Sang total + ractif de TRINDER (agitation 1min) coloration violette. 1ml 5ml On aura mme rsultats avec : srum ou plasma. Dosage des salicyls : TUBE 1 TUBE 2 TUBE 3 Eau distille Plasma Solution aqueuse dacide salicylique (250mg/l) Ractif de TRINDER 2ml 5ml 1ml 1ml 5ml 1ml 1ml 5ml

La lecture seffectue 535 nm. Calcul : Concentration dacide salicylique (mg/l) =250DO2/DO3DO2.

3) Rsultats

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4) Interprtation des dosages

a) Normes 500 mg/l 500-800 mg/l 800-1500 mg/l 1500 mg/l b) Interprtation SALICYLMIE CLINIQUE Rien. Lgre intoxication. Apparition des troubles neurologiques. Mort.

5) Rsultats pratiques

a) Extraction acide (ther acide) 20ml dchantillon +1ml dHCl 6N +20ml dther di thylique.

b) Sparation par la chromatographie sur couche mince

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c) Rvlation Observation de la plaque sous la lampe de Wood :

Ractif LEMAIRE :

d) Raction spcifique didentification : (sur les rsidus dvaporation)

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