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CHAPITRE II

APPLICATION DE LA SPECTROSCOPIE
UV-VISIBLE
A -ANALYSE QUALITATIVE
Le spectre UV ou visible ne permet pas lidentification dun produit mais celle du
groupement chromophore quil contient.
I HYDROCARBURES
I.1 Alcanes linaires
Les alcanes nabsorbent que dans lUV-lointain (transitions *). Exemple : =
135 nm pour lthane gazeux. Les ramifications dplacent lgrement cette absorption vers les
grandes longueurs donde. Exemple : = 154 nm pour le trimthyl-2,2,4-pentane.
Les n-alcanes liquides sont utilisables comme solvants en spectroscopie UV-visible
jusqu 170 nm.
I.2 Cycloalcanes
Pour les cycloalcanes non tendus, labsorption se situe dans les mmes zones que pour
les n-alcanes. Ainsi, le cyclohexane est utilisable jusqu 175 nm comme solvant en
spectroscopie UV-visible.
Le cyclopropane possde un certain caractre insatur. En solution, il donne de faibles
bandes dabsorption entre 190 et 195 nm.
I.3 Alcnes
Un chromophore thylnique absorbe en dessous de 200 nm. Lthylne, en solution
dans lheptane, possde une bande dont le maximum se situe 173 nm (max = 5000).
Effet de la substitution
Les substitutions successives se traduisent par des effets bathochromes (max = 180195 nm) plus marqus dans les thylniques tri et ttraalkyls.
Effet de la conjugaison
Cest la conjugaison de deux ou plusieurs liaisons qui entrane les effets les plus
importants. augmente au fur et mesure que le nombre de doubles liaisons augmente.
Quand ce nombre devient plus grand que 5, laccroissement de max devient moins rapide. Les
rgles de calculs ne sappliquent plus pour des valeurs de n > 5.
Lallne, qui a des liaisons non conjugues, possde une bande 241 nm ( 2000).
Dans les autres cumulnes, il apparat plusieurs bandes dont la longueur donde et lintensit
croissent avec le nombre de doubles liaisons.
Dans le cas o les doubles liaisons sont spares par deux atomes de carbone sp3, leur
interaction est plus faible mais conduit des effets non ngligeables. Au-del, elles se
comportent comme si elles appartenaient des molcules diffrentes.

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Effet de la conformation
La transition * du chromophore dinique a une nergie diffrente selon que la
conformation est s-cis ou s-trans. Le prfixe s indique que la conformation est repre par
rapport la liaison simple intermdiaire.
Les dines acycliques sont sous la forme s-trans qui est la plus stable :

s-trans, max = 214 nm

s-cis, max = 253 nm

Dans le tableau 2.1 sont donnes les absorptions UV pour quelques dines conjugus
acycliques et cycliques.
Tableau 2.1 Absorption UV de quelques dines conjugus
Dine conjugu
1) Acyclique (Ethanol)

max (nm)

Log

233

243

4,4

2) Cyclique (isooctane)
Cyclopentadine-1,3

239

3,5

Cyclohexadine-1,3
Cyclooctadine-1,3

257
227

3,2
3,8

Les deux premiers exemples illustrent leffet des substituants alkyles. Dans le
cyclohexadine-1,3, la conformation est s-cis cause de la cyclisation. Le cyclooctadine-1,3
parat se rapprocher de la conformation s-trans.
Le coefficient dextinction molaire est gnralement plus lev pour un driv s-trans
(15000-25000) que pour un driv s-cis (5000-12000). Cependant, lencombrement strique
peut modifier ces valeurs (8500 pour le s-trans-dimthyl-2,4 pentadine-1,3).
H
H3C

C
C

CH3
CH2

I.4 Alcynes
Loctyne-1 et loctyne-2 ont une bande faible vers 225 nm ( 100). Des bandes plus
intenses apparaissent vers 180 185 nm.
La comparaison des spectres des polyynes conjugues dans le tableau 2.2 montre que
lnergie de la transition principale est plus leve que pour les polynes analogues et
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lintensit des bandes est beaucoup plus forte ( 5 fois). Enfin, il apparat une deuxime srie
de bandes dintensit faible et peu prs constante, du ct des grandes longueurs donde
(transitions * peu permises).
Tableau 2.2 Bandes dabsorption des polyynes
(CH3)3C-(C=C)n-C(CH3)3
n
3
4
5
6
8
10

Premire transition
max
max
213
140000
240
348000
265
442000
289
500000
330
705000
363
850000

Seconde transition
max
max
283
330
373
364
270
395
192
437
270
471
220

I.5 Hydrocarbures aromatiques


Les hydrocarbures aromatiques ont des spectres trs caractristiques dont la richesse
doit tre attribue la grande symtrie de ces molcules.
Trois types de bandes sont observes :
- Type 1 : Des bandes de faible intensit ( 102- 103) prsentant souvent une structure
vibrationnelle complexe et apparaissant aux grandes . Elles sont notes 1Lb ou
- Type 2 : Des bandes intermdiaires dintensit moyenne ( 104) prsentant souvent elles
aussi une structure vibrationnelle. Elles sont notes 1La ou .
- Type 3 : Des bandes trs intenses ( 105) situes aux courtes longueurs donde et pouvant
tre ddoubles. On leur donne le symbole 1B (ventuellement 1Ba et 1Bb).
Cas du benzne
Le spectre du benzne donn sur la fig. 2.1 prsente 260 nm une bande peu intense (
200) dote dune structure vibrationnelle trs nette (1Lb). Une bande dintensit moyenne (
7000) apparat vers 200 nm (1La) sous forme dpaulement dune bande trs intense (
50000) situe 185 nm (1B).

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Fig. 2.1 Spectre UV du benzne
La transition correspondant la bande 1Lb est interdite pour des raisons de symtrie ce
qui explique la faible intensit de la bande correspondante. La bande attribue 1Lb est
dplace vers le visible et est, en gnral, intensifie par alkylation. Leffet bathochrome
atteint, cependant, un maximum avec quatre groupements alkyle.
max 274 nm
( 460)
Exemple : p-xylne
1,2,4,5-ttramthylbenzne
max 279 nm
( 820)
Hexamthybenzne
max 279 nm
( 300)
dans lhexane
La bande 1La (204 nm) possde un caractre de transfert de charge dans les drivs du
benzne. Un effet bathochrome accentu est observ dans les solvants polaires car cette bande
de transfert de charge a un fort moment dipolaire de transition. Cet effet provient de la
stabilisation de ltat excit qui est trs polaire.
Cas des composs aromatiques suprieurs
Les trois types de bandes cits plus haut sobservent galement dans les spectres des
composs aromatiques suprieurs.
Dans certains cas tel que pour lanthracne, la premire bande peut tre absente. Pour
les hydrocarbures aromatiques polycycliques de fusion cyclique linaire, les spectres
ressemblent celui du benzne mais il y a un dplacement bathochrome progressif quand le
nombre de noyaux intervenants augmente.

Fig. 2.2 Spectres UV dhydrocarbures aromatiques polycycliques


de fusion linaire

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Les fusions angulaires de noyaux benzniques, comme pour le phnanthrne

et le chrystne
, entranent que les spectres sont plus complexes et
ne montrent pas les dplacements bathochromes rguliers observs dans la srie linaire.
Cas du biphnyle
Dans le biphnyle, la conjugaison est grande quand les deux noyaux benzniques sont
coplanaires. A ltat gazeux et en solution, langle entre les deux cycles est denviron 45.
Lintroduction dun groupe encombrant, particulirement en position ortho de la molcule
biphnyle, sert augmenter langle entre les phnyles et par consquent, la conjugaison
effective est diminue. Son effet se manifeste par une diminution des valeurs de et de
comme on peut le noter partir des exemples suivants :
CH3

= 249 (TC)
= 14500

236,5
10500

C2H5

233
9000

II COMPOSES A FONCTION OXYGENEE


II.1- Alcools et phnols
Cas des alcools
Le mthanol et les alcools aliphatiques absorbent faiblement vers 180-185 nm. Il sagit
dune transition n*. Par exemple, pour CH3OH gazeux, max = 183,5 nm et = 150.
Au dessus de 210 nm, les alcools sont transparents et utiliss comme solvants
spectroscopiques polaires et donneurs de protons.
Cas des phnols
Dans le cas des phnols, la paire libre peut tre conjugue avec le systme du noyau
et cela cause de nouvelles absorptions ( = 5000- 20000) dans la rgion 210-300 nm dues un
transfert de charge intramolculaire.
Le phnol (dans leau) montre une bande 270 nm ( = 1450) dont la correspondante
est la bande 254 nm dans le benzne ; elle est plus intense que pour le benzne. Une autre
bande est observe vers 210 nm ( = 6200) reprsentant labsorption de transfert de charge
intramolculaire. En solution basique, les phnols se transforment en ions phnates et il en
rsulte un fort effet bathohyperchrome utilisable au point de vue analytique.
Tableau 2.3 Absorption UV du phnol et de lion phnate
________________________________________________________________
max (nm)

max (nm)

_________________________________________________________________
Phnol
210
6200
270
1450
Ion phnate
235
9400
287
2600
_________________________________________________________________

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II.2 Ethers et composs apparents
Les thers aliphatiques sont transparents dans le proche-UV. Ils absorbent entre 184 et
190 nm (oxyde de mthyle gazeux, max = 184 nm, = 2500).
Les thers aromatiques se comportent comme les phnols mais leur spectre nest pas
modifi en milieu basique. Les effets striques des substituants ortho diminuent lintensit de
la bande vers 270 nm.
II.3 Composs carbonyls
Cas des ctones aliphatiques
La transition n*(transition interdite pour des raisons de symtrie) est celle qui
prsente le plus dintrt du point de vue analytique (caractristique du groupement carbonyle
en UV). En effet, elle se situe dans un domaine de longueur donde trs accessible. De plus, la
position et lintensit de la bande correspondante sont sensibles aux effets des substituants et
des solvants.
En solution dans lhexane, la transition n* de lactone se situe 279nm ( = 14,5).
Lallongement des chanes carbones et les ramifications ont un effet bathochrome. Le
tableau 2.4 donne les valeurs des incrments dus aux substitutions alkyles successives.
Lactone en solution dans lthanol est prise comme rfrence (max = 272 nm). Seules les
substitutions en ou ont une influence notable.
Tableau 2.4 Influence des substituants alkyles sur la longueur donde de la
transition n* des ctones (dplacement en nm)
Substitution

Premire
1,5
2

Deuxime
5,5
2,5

Troisime
3,5
5

Lexemple suivant illustre la mthode de calcul


O

H3 C
CH
H3C

CH2

CH3
C

CH3

CH3

Isobutyl-tertio-butyl-ctone
Exprimentalement, max = 287,5 nm (ETOH)
Calcul : = (1,5 + 2 + 2,5) + (1,5 + 5,5 + 3,5) = 16,5 nm

Do la valeur calcule max = 272 + 16,5 = 288,5 nm. Les rsultats sont gnralement
obtenus 1nm prs. La valeur de max augmente lgrement avec les substitutions mais reste
comprise entre 15 et 30.
La position de la bande n* est trs sensible aux effets de solvant comme le montre
lexemple de lactone.

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Tableau 2. 5 Effet de solvant sur la transition n* de lactone
___________________________________________________________________________
max(nm)
Solvant
max(nm)
Solvant
CCl4
280
DMSO
274
Hexane
279
Ethanol
272
Dioxane
277
Mthanol
270
CHCl3
276
Acide actique
267
DMF
275
Eau
265
Cas des ctones , -insatures :
On a 2 types de transitions : * et n*
*Le coefficient dextinction molaire de la bande * est de lordre de 10000
15000. Il est diminu par les effets striques.
O
C

cal = 237 nm
obs = 232 nm
max = 12500

cal = 249 nm
obs = 245 nm
max = 6500

cal = 249 nm
obs = 243 nm
max = 1400

La conjugaison croise donne un effet bathochrome moins fort que la conjugaison


linaire comme le montre les exemples suivants :
H3C

H
C

H
C

H
C

CH

CH3

H3C

H
C

H
C

CH3

H3C

(CH CH)2

max = 245 et 251 nm


(croise)

CH3

max = 224 nm

max = 257 nm
(linaire)

La transition n* des -nones en solution dans lhexane se situe entre 325 et 345
nm ( 15 60). Dans les drivs cycliques, la longueur donde de son maximum
dabsorption est sensible la position axiale ou quatoriale du substituant, en du systme
conjugu.
Tableau 2.6 : Dplacement (nm) de la transition n* de la cyclohexanone et de la
4-cholestone-3 par substitution axiale et quatoriale

O
X

_________________________________________________________________
Substitution X
Equatoriale
Axiale
Equatoriale
Axiale
_________________________________________________________________
Cl
3
14
-5
15
Br
5
20
-5
28
OH
2
7
-12
17
2
10
-5
10
OCOCH3
__________________________________________________________________
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Cas des ctones ,-insatures
Les ctones ,-insatures ne constituent pas de systmes conjugus. Elles ont
pourtant un spectre notablement diffrent de celui des chromophores C=C et C=O isols.
La proximit des deux chromophores donne lieu lapparition dune bande de transfert de
charge dlocalis de lorbitale de C=C lorbitale * de C=O (max 210 nm). Cette
bande est distincte de la transition * de C=C (vers 185 nm). En ce qui concerne la
transition n*, une exaltation de lintensit de la bande correspondante ainsi quun lger
dplacement bathochrome sont observs.
Cas des dictones
* -dictones : Dans le diactyle (CH3CO)2 on observe deux transitions n* ; lune
vers 275 nm et lautre vers 420 nm. Cette dernire est dplace vers 466 nm lorsque les
groupements carbonyle sont coplanaires et dcrot jusqu 330 nm lorsquils sont dans des
plans perpendiculaires (pas de conjugaison). Elle augmente nouveau lorsque langle dpasse
90.
* -dictones : Les -dictones RCOCH2COR donnent lquilibre cto-nolique :
R

O
C
R

O
C
C
H2

H
O

R'
R'

Les deux formes absorbent vers 270-280 nm mais les coefficients dextinction molaire
des deux bandes sont trs diffrents. Dans la forme ctonique, il sagit de transition n* (
30). Dans la forme nolique, il sagit dune transition * dune ctone-,-insature
(none) ( 13000) et dune transition n*.
Lintensit de labsorption due n* permet dobtenir le pourcentage de la forme
nolique (96% dans lhexane ; 15% dans leau). La forme ctonique est donc favorise dans
les solvants polaires car elle est stabilise par liaison hydrogne.
En milieu basique, il y a formation de lion nolate (max = 292 nm, max = 24000).
Les -dictones aromatiques sont essentiellement sous forme nolique (max 340-360
nm, max 20000-40000) (ex : Ph-CO-CH2-CO-PH).
Cas des nediones
Dans les terpnes et les strodes, on trouve trs souvent le chromophore nedione
-C-C=C-C- . Les nediones cycliques sont classes en quatre groupes structuraux. La position
de la bande permet de dterminer quel groupe elles appartiennent.
Homocisodes

Htrocisodes

Hmicisodes

transodes
O

O
O

max = 224 nm

255-263 nm

252 nm

275 nm

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III COMPOSES A FONCTION AZOTEE
Cas des amines
Les spectres lectroniques des amines sont voisins de ceux de lammoniaque mais les
substituants alkyles exercent un fort effet bathochrome. La bande situe du ct des grandes
longueurs donde disparat par protonation ; elle est attribue une transition n*.
Tableau 2.7 Absorption UV de lammoniaque, des amines aliphatiques et dune
hydrazine ltat gazeux
_____________________________________________________________________
max (nm)
max
max (nm)
max
_____________________________________________________________________
NH3
151
194,2
5600
CH3NH2
174
2200
215
600
(CH3)2NH
190
3300
220
100
(CH3)3N
199
3950
227
900
(CH3NH)2
167
1500
245
1000
______________________________________________________________________
Dans les amines aromatiques, lazote interagit fortement avec le cycle benznique et la
corrlation avec le spectre du benzne est assez lointaine. Nanmoins, les trois bandes de
laniline, en solution dans lheptane, sont notes comme celles du benzne. La bande 1La a un
caractre de transfert de charge accentu, ce transfert seffectue dune orbitale 2p de lazote
vers une orbitale * du cycle.
Tableau 2.8 Absorptions UV de laniline dans lheptane
_____________________________________________________________
1
1
1
Notation
B
La (ou )
Lb (ou )
_____________________________________________________________
max (nm)
196
235
287
_____________________________________________________________
Logmax
4,3
3,9
3,2
______________________________________________________________
Cas des composs liaisons multiples carbone-azote ou azote-azote
Les chromophores C=N et -N=N- prsentent des analogies avec le chromophore
C=O. Les premires transitions sont n* et *. Pour le chromophore C=N isol, elles
se situent respectivement dans la zone 340- 360 nm ( 100) et vers 190 nm.
Le chromophore C=N na pas dabsorption dans le proche-UV (bande 167 nm pour
CH3CN). Les nitriles sont donc utilisables en spectroscopie UV comme solvants polaires et
aprotiques.

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B-ANALYSE QUANTITATIVE
Lanalyse quantitative par la spectromtrie UV-visible est trs employe grce
lutilisation de la loi de Beer-Lambert.
La concentration dun systme peut tre dtermine par la mesure de labsorption de la
radiation par lespce.
La loi de Beer-Lambert est exprime sous la forme log10IO/I= .l.C (2.1), o IO et I
sont les intensits de la radiation incidente et transmise respectivement, C est la concentration
molaire et le coefficient dextinction. Le terme log10IO/I est appel absorbance et est
reprsent par le symbole A. Les units utilises pour C, l et sont mol.l-1, cm et l.mol-1.cm-1
respectivement.
Le coefficient dextinction est une constante une donne pour une espce donne
et il est indpendant de la concentration des espces absorbantes. Par convention, est
exprim sans units.
Des dviations la loi de Beer-Lambert peuvent avoir lieu quand il y a participation de
facteurs physiques tels que la fluorescence du solut ou la perte dnergie partir de la source
ou de facteurs chimiques tels que lassociation molculaire du solut ou son ionisation. Il est
possible de savoir si la dviation la loi de Beer-Lambert est cause par des effets physiques
ou chimiques. On trace A en fonction de lpaisseur du milieu absorbant, une concentration
constante du solut. Le trac devrait donner une ligne droite si les effets causant la dviation
sont de nature chimique puisque dans ce cas, le facteur causant la dviation reste constant. Si
la cause est physique, le trac ne donnera pas une droite.
Exprimentalement, on commence gnralement par construire une courbe
dtalonnage A = f(C) partir de solutions de concentrations connues du compos doser.
Cette courbe est le plus souvent assimilable une droite pour les solutions dilues. Elle
permet de dduire la concentration CX de la solution inconnue.

I ANALYSE MULTICOMPOSANTS (MCA)


La loi de Beer-Lambert est additive. Ceci veut dire que labsorbance A, mesure dans
une cuve dpaisseur l dun mlange de deux composs 1 et 2 en solution dans un mme
solvant, sera identique labsorbance mesure aprs passage travers deux cuves de mme
paisseur l, places lune aprs lautre, contenant lune le compos 1 et lautre le compos 2
(pris aux mmes concentrations que dans le mlange initial). En donnant les indices 1 au
compos 1 et 2 au compos 2, on aura par consquent :

A = A1 + A2 = l(1C1 + 2C2)

(2.2)

Points isobestiques : Considrons un compos A qui se transforme par une raction du


premier ordre en un compos B. Supposons que les spectres dabsorption, raliss dans les
mmes conditions de concentration, se coupent en un point I lorsquon les superpose. Pour la
longueur donde du point I, les absorbances des deux solutions sont les mmes, et par
consquent les coefficients A et B sont identiques. Or dans ce type dexprience on a au
dpart A pur, la fin B pur, et pour tout instant intermdiaire, des mlanges de A et de B pour
lesquels la concentration globale ne varie pas (CA + CB = constante) :
AI = AlCA + BlCB = l(CA + CB) = cste

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Tous les spectres des mlanges A+B forms au cours du temps passeront donc par le point I,
appel point isobestique, o labsorbance A conservera la mme valeur.
De tels rseaux de courbes concourantes se rencontrent au cours du virage dun indicateur
color en fonction du pH, ou de ltude dune cintique de raction. Les points isobestiques
prsentent lintrt dindiquer que lquilibre tudi est simple (ex : quilibre acide-base).
Dans le cas dun quilibre HA/A- ou B/BH+, le point isobestique est un point commun
lensemble des courbes UV qui sont enregistres divers pH.

Fig. 2.3 - Point isobestique pour des spectres de solutions acide, basique
et intermdiaire de vert de bromocrsol.
La longueur donde laquelle apparat ce point est caractristique du systme tudi.
Lorsquon est en prsence dun mlange de composs dont les spectres dabsorption
individuels sont connus, on peut en dterminer la composition. Selon la loi dadditivit
(relation 2.2), le spectre du mlange correspond la somme pondre des spectres de chacun
des constituants. A une longueur donde donne, labsorbance A dun mlange de n espces
absorbantes est la somme des absorbances individuelles :

A = A1 + A2 +..+An= l(1C1 + 2C2 +..+ nCn)


Mthode algbrique de base
Soi un mlange de trois composs a, b, c, en solution (con. Ca, Cb, Cc). On mesure les
absorbances de cette solution trois longueurs donde 1, 2 et 3, soit A1, A2 et A3.
Connaissant les valeurs des absorbances spcifiques de chacun des trois composs pris
isolment pour ces trois longueurs donde (9 valeurs au total, de 1a 3c ) on crira, par
application de la loi dadditivit des absorbances, le systme suivant de trois quations (on
suppose que le trajet optique est de 1 cm) :
1

1a C a + 1b C b + 1c C c = A 1

a2 C a + 2b C b + c2 C c = A 2

3a C a + 3b C b + 3c C c = A 3

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La rsolution de ce systme, qui correspond une matrice [3x3], permet de trouver les trois
concentrations cherches Ca, Cb et Cc. Dune manire gnrale, on devra faire autant de
mesures quil y a de constituants.

Cette approche est efficace lorsque les composants ont des spectres significativement
diffrents, sinon elle devient trs sensible aux erreurs de mesures sur le mlange.
Exemple : Si la solution contient deux composs M et N, labsorbance totale est la somme
des absorbances des composs individuels

Dterminer CM et CN

M et N dtermins avec des solutions pures.


Rgression linaire multilongueurs donde (mthode MLRA)
Lanalyse des mlanges a donn lieu diverses mthodes, rendues possibles avec les
spectromtres qui enregistrent les donnes. Lordinateur, associ au banc optique de
lappareil, comporte un logiciel qui utilise un grand nombre de points extraits des spectres de
lchantillon doser et des diffrentes solutions dtalonnage.
A titre dexemple, est dcrite ci-aprs, une mthode qui montre comment, par un
calcul de rgression linaire, on peut amliorer le rsultat dune analyse de deux composs
connus, prsents dans un chantillon (fig. 2.4).

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Fig. 2.4.- Analyse multicomposants. Spectre dune solution de 10-4 M en permanganate,


dune solution 10-4 M de bichromate et dune solution contenant 0,8.10-4 M de
permanganate et 1,8.10-4 M de bichromate.
Lappareil utilise trois enregistrements en mmoire : un spectre de lchantillon (qui
contient les deux composs dont on veut trouver les concentrations) et un spectre dans le
mme domaine spectral de chaque compos pris isolment (solutions de rfrence de
concentration connue).
Pour chaque longueur donde, la loi dadditivit des absorbances nous permet dcrire
que labsorbance du mlange considr des deux espces a et b (qui ninteragissent pas lune
sur lautre) est donne par lexpression :
A = alCa + blCb

(2.3)

Pour chacun des deux spectres de rfrence, on a, si l = 1 cm :


pour le compos a
Arf.a = aCrf.a
pour le compos b
Arf.b = bCrf.b
Ces deux expressions nous permettent de connatre les coefficients dabsorption de chaque
constituant pur, pour chaque longueur donde considre. On peut donc crire nouveau
lexpression (2.3) sous la forme :
A=

Arf . a
Arf . b
Ca +
Cb
Crf . a
Crf . b

En divisant le premier membre par Arf.a, on aura pour chaque longueur donde :
(

A
Arf .a

)=

Ca
Cb
Arf .b
+
..(
)
Crf . a Crf . b Arf .a

Le premier membre de cette dernire expression est donc une fonction affine du rapport des
absorbances figurant au second membre. Les valeurs calcules sont sur une droite dont la
pente et lordonne lorigine permettent de calculer Ca et Cb.
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II DETERMINATION DE LA MASSE MOLAIRE
La masse molaire dun compos peut tre dtermine par des mesures
spectrophotomtriques si un driv convenable du compos peut tre prpar. Ainsi, le
spectre dabsorption dun compos dpend du groupe chromophore prsent. Si un driv est
form via un groupement fonctionnel du compos, loign du systme chromophorique, alors
labsorption provenant du chromophore restera inaltre pourvu que le nouveau groupement
nabsorbe pas dans la mme rgion. Aussi, dans la rgion dabsorption du chromophore
restera constant. Cependant, labsorbance va changer puisquelle dpend de la masse molaire
de lespce absorbante : A = lC = lC/M (3.2) ; o M est la masse molaire des espces
absorbantes, Cest la concentration massique des espces absorbantes en g.l-1 et l lpaisseur
du milieu absorbant en cm. La masse molaire des espces absorbantes peut tre dtermine
par mesure de A dune solution contenant une masse connue de cette espce dans un volume
connu.
Cette mthode peut tre utilise pour dterminer la masse molaire des composs qui
forment des picrates ; ex. les amines.
Soit la raction
OH
O2N

NO2

O2N

NO2

- +

NH3R
NO2

RNH2

NO2

Le spectre de lacide picrique montre une absorption vers 360 nm due aux groupes
chromophores NO2. Cette bande peut tre utilise pour dterminer la masse molaire du
picrate condition que le groupe R nabsorbe pas la longueur donde laquelle les mesures
sont faites. Il est ensuite possible de calculer la masse de lamine.
III MESURES CINETIQUES
La cintique dune raction peut tre dtermine par la mesure de la variation de la
concentration la fois dun ractif ou dun produit en fonction du temps.
Comme labsorbance est directement proportionnelle la concentration, la
spectromtrie dabsorption constitue une mthode de choix pour suivre le droulement dune
raction. On suit alors labsorbance dun des ractifs ou des produits qui prsente une
absorption convenable en UV ou visible et qui ne se recouvre pas avec labsorption due
dautres espces prsentes.
Soit la raction
A+BC+D
d [ A]
v== k[ A] m [ B ] n = k[C ]m ' [ D]n '
dt
on a A = lC
C = A/l
En suivant lvolution de A = f(t), on dtermine C = f(t)
Donc, ceci permet de tracer C = f(t) et de dduire lordre de la raction partir de lallure de
la courbe.
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IV DETERMINATIONS DES CONSTANTES DE DISSOCIATION DES ACIDES ET


DES BASES
La spectroscopie UV est une trs bonne mthode pour ltude des quilibres en
solution trs dilue.
La dissociation dun acide HA dans leau peut scrire :
HA + H2O
H3O+ + Ao A- est la base conjugue de HA.
Pour des solutions dilues, on a : pKa = pH + log[HA]/[A-]
La valeur du pKa de lacide peut tre calcule partir de la mesure du pH et du rapport
[HA]/[A-] ce
pH. Ce rapport
peut tre immdiatement dtermin
spectrophotomtriquement. Le spectre UV dpend de lionisation (donc du pH) des
molcules. Le chromophore de la molcule doit tre en interaction avec le site dionisation.

Figure 2.5 : Spectes dabsorption du systme HA H+ + A- enregistrs diffrents


pH croissant dans lordre 14
Pour la dissociation HA H+ + A-, la position dquilibre dpend du pH du milieu.
En milieu trs basique, lquilibre est dplac vers la droite et le spectre dabsorption du
systme est celui de lanion A- (spectre de la base). Dans le cas du milieu trs acide,
lquilibre est dplac vers la gauche et le spectre dabsorption sera celui de lacide HA
(spectre de lacide). Les spectres dabsorption correspondant A- et HA sont reprsents sur
la figure 2.5 (courbes 1 et 1 respectivement). Les deux spectres A- et HA sont trs diffrents.
Par modification du pH, on peut modifier graduellement lallure du spectre comme
indiqu par les courbes successives 2, 3, 4. Si le pH du systme dcroit, alors la concentration
de lacide HA et par consquent, labsorbance due HA augmente alors que la concentration
de la base et son absorbance diminuent. Les coefficients dextinction de HA et A- passent par
une valeur maximale la longueur donde correspondant au maximum dabsorption.

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Les courbes spectrales passent toutes par un point i fixe point isobestique. La
longueur donde laquelle apparat ce point est caractristique du systme tudi. Lexistence
de ce point est d au fait que mme si le rapport [AH] /[A-] varie, la somme des
concentrations reste constante [AH] + [A-] = C0, C0 tant la concentration initiale. En ce point,
les formes A- et AH ont mme coefficient dextinction et labsorbance en ce point sera :
AI = AHlCAH + A-lCA- = l(CAH + CA-) = lC0 = cste
Lexistence de ce point dans un ensemble de courbes indique la prsence de deux
chromophores et de deux seulement intervenant en quantits complmentaires.
V SPECTROMETRIE DERIVEE
La spectromtrie drive permet damliorer la prcision des dosages lorsquon est en
prsence de mlanges de composs dont les spectres sont peu diffrents. Les courbes drives,
au sens mathmatique du terme, amplifient les faibles variations de pente du spectre initial
(spectre dordre zro). Les tracs sont beaucoup plus accidents quen units dabsorbance
(figure 2.6).
Le principe de la drivation peut tre tendu aux drives successives (nime drive)
partir de la courbe drive premire, dA/d = f(), accessible sur la plupart des
spectrophotomtres.

Figure 2.6 : Courbes drives. Spectre UV et courbe de sa drive seconde


de la phnylalanine
La courbe correspondant la drive seconde, fait correspondre aux points dinflexion
du spectre dordre zro, des points dannulation de pente, c'est--dire des maxima ou des
minima (figure 2.6). Elle montre un pic ngatif important dont le minimum se trouve la
mme longueur donde que celle du maximum dabsorption du spectre dordre zro. La
quatrime drive met encore mieux en vidence les faibles variations dabsorbance du
spectre initial.
Lamplitude entre le maximum et le minimum de la courbe drive nime, est
proportionnelle la valeur de labsorbance de la solution. La courbe dtalonnage est tablie
partir de plusieurs solutions talons de concentrations diffrentes auxquelles le mme
traitement mathmatique est appliqu, ainsi qu la solution chantillon.
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Lintrt du procd est vident dans des situations o labsorbance est fausse :
si le spectre de la solution chantillon prsente un dcalage vers le haut par suite dun
fond dabsorption uniforme, la courbe drive, qui nest sensible quaux variations de
pente de la courbe dordre zro, nen sera nullement affecte.
si on est en prsence dun phnomne de diffusion de la lumire au sein de la solution
chantillon, qui se traduit par un fond dabsorption qui crot modrment vers les
petites longueurs donde, l encore, les courbes drives seront peu affectes (figure
2.7).

Figure 2.7 : Effet dun phnomne de diffusion sur un spectre enregistr en absorbance et sur
sa courbe drive. Comparaison des courbes drives correspondant pour A au spectre dun
compos en solution sans phnomne de diffusion et pour B au mme spectre en prsence de
diffusion. On observe que la diffusion perturbe ici de 15% labsorbance mais de 2%
seulement la valeur de lamplitude de la courbe drive.
La drive dordre un prsente un maximum et un minimum correspondant deux
inflexions de la courbe dans la partie montante et dans la partie descendante ; elle coupe laxe
des abscisses une longueur donde correspondant au maximum dabsorption et se confond
avec cet axe lorsque labsorbance est nulle.
La courbe est caractristique et le maximum dabsorption correspond lintersection
de la courbe drive avec laxe des abscisses.
Drives dordre suprieur : Les spectres tant dautant plus complexes que lordre de
drivation augmente, les drives dordre suprieur 4 sont rarement utilises dans la
pratique.
En effet, si le spectre dordre 0 prsente un maximum on saperoit que :
-

le spectre driv dordre 1 prsente deux maximums (ou minimums) (un positif et un
ngatif)
le spectre driv dordre 2 prsente trois maximums (ou minimums) (un ngatif et
deux positifs)

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-

le spectre dordre 3 prsente quatre maximums (ou minimums) (deux ngatifs et deux
positifs)
- le spectre dordre 4 prsente cinq maximums (ou minimums) (deux ngatifs et trois
positifs).
La complexit des courbes augmente avec lordre de la drive, puisque chacune delles
prend en compte les minimums, les maximums et les inflexions de la drive dordre
immdiatement infrieur. Dans la pratique, la drive 4 est utilise car comme pour la
drive seconde, le pic le plus important a son maximum situ la longueur donde du
maximum de la bande du spectre dordre zro.
Conclusion : Lutilisation dun spectre driv prsente deux avantages :
- la rsolution obtenue et meilleure quavec le spectre original et cette rsolution
augmente avec lordre de la drive
- pour une amplitude donne du pic original, lamplitude des pics drivs augmente
avec lordre de drivation.

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