Scurit biologique

dans les laboratoires de

microbiologie
D.S. Blanc
Mdecine Prventive Hospitalire
CHUV

Buts
protection du personnel
protection des personnes en dehors
du laboratoire
protection de l'environnement

Cadre lgal
Ordonnances

Ordonnance sur l'utilisation dorganisme en milieu confin

Ordonance sur la protection des travailleurs contre les risques
lis aux microorganismes
Ordonnance sur la protection de la maternit

Recommandations SUVA:

Prvention des maladies professionnelles dans les laboratoires

de microbiologie diagnostique. 2003. 2869/27.f
Prvention des infections transmises par voie sanguine dans les
laboratoires mdicaux. 2003. 2869/19.f
Prvention des atteintes la sant lors des oprations de
dsinfection. 1993. 2869/23.f
Prvention des maladies infectieuses transmises par voie
sanguine dans le secteur sanitaire. 2003. 2869/30.f
Tuberculose dans le cadre professionnel: Risques et prvention
Vaccination du personnel de sant
Allergie au latex

4 Niveaux de Scurit Biologique (BSL):

fonction (entre autres!) de la pathognicit
des microorganismes utiliss
1: non pathognes (ex. Bacillus subtilis)
2: modrment pathognes
3: causant des maladies svres ou potentiellement
ltales (HIV, B.anthracis)
4: risque lev de transmission par arosol et
causant des infections lthales (FVH)
Laboratoires de diagnostic microbiologique: BSL-2

Mesures de scurits biologiques:

1.
2.
3.
4.
5.

Infrastructures
Pratiques microbiologiques
Elimination des dchets
Hygine du lieu de travail
Hygine et prvention personnelle

1. Infrastructures
Un panneau de risque
biologique doit tre
suspendu sur chaque porte
d'accs des laboratoires
L'accs au laboratoire est limit
Portes et fentres des lieux de travail
doivent tre fermes pendant le travail

2. Pratiques microbiologiques standards

Pas de pipetage la bouche
Utilisation de matriel jetable de
prfrence

Matriel rutilisable doit tre pr-dsinfect

chimiquement ou thermiquement avant le nettoyage
manuel (ex. pipettes en verres)

Aiguilles hypodermiques et seringues:

ne doivent tre utilises que si cela est absolument

ncessaire et doivent tre limines de manire sre;
le recapuchonage des aiguilles est proscrit

Pratiques microbiologiques standards

Minimiser la production darosols!

Lorsqu'il y a possibilit de production d'arosols entranant

un risque d'infection arogne, la manipulation d'chantillons
doit s'effectuer sous un flux de scurit de classe II

Port de gants obligatoire:

risque de contact cutan avec du matriel infectieux,
une surface ou un quipement contamins
travaille avec un rcipient ouvert contenant du sang ou
un autre liquide biologique

Pratiques microbiologiques standards

Dsinfection des rcipients d'chantillons
dont l'extrieur est souill avant toute
manipulation

Contrle de l'identit des microorganismes de rfrence utiliss

Pratiques microbiologiques spciales

Manipulation sous un flux laminaire de classe 2
Prlvements respiratoires ou de tissus:
Production d'arosol potentiellement infectieux

Hottes de scurit biologique

Classe 2
Classe 1

Classe 3

3. Classification et limination des

dchets du secteur de la sant
A. Dchets mdicaux ne posant pas de problme,
composition similaire celle des dchets urbains
B. Dchets spciaux
1. Danger de contamination (contenant du sang,
des excrtions et des scessions)
2. Danger de blessures
3. Mdicaments prims
4. Cytostatiques
C. Infectieux

OUC: inactivation des

dchets contamins
avant de les sortir des
laboratoires

D. Autres dchets spciaux (chimiques, radioactifs)

IMU-DAM: limination des dchets

Dchets infectieux solides
Cultures de microorganismes ou de cellules

Fermeture du sac avec

une attache zip

chantillons de patients,
reste d'analyse
Objets ayant touchs des
chantillons (tips de
pipetage de srum, )
Dpt dans les chariots
prvus cet effet

Autoclavage
(IMU ou BH-03)

IMU-DAM: limination des dchets

Dchets infectieux liquides
B2. Objets
tranchants

Tubes de cultures

Flacons de cultures

Inactivation chimique
(eau de Javel)
Evier

IMU-DAM: limination des dchets

Dchets prsentant un danger de blessure

Aiguilles, lames,
pipette Pasteur

B2. Objets
tranchants

IMU-DAM: limination des dchets

Dchets toxiques
Bromure d'thidium
Radiactivit
Etc

Emballage
adhoc
D.
Pharmacie

IMU-DAM: limination des dchets

Dchets urbains
Emballages chantillons
Emballages de kits
Rcipients de ractifs vides
Essuie-mains

Sac gris

sagex.
Etc
Liquide corporels et excrtions de personnes
infectes: peuvent en principe tre dverses dans les
canalisations
Dchets ne prsentant pas de risque (urbains): peu
souills de sang et peu contamin (sparadraps,
pansements, couches)

A. Dchets
urbains

CHUV: Recyclage des dchets

Papier

Plastique

Aluminium

Attention: tous les documents contenant une identification de patient

doivent tre dtruit de faon "scurise" (par exemple avec une
dchiqueteuse).

4. Hygine du lieu de travail

Les lieux de travail doivent tre parfaitement propres
et en ordre; seuls les matriaux et appareils
absolument ncessaires doivent sy trouver; les
rserves doivent tre ranges dans les locaux et
armoires prvus cet effet
Place de travail:
responsable: personnel technique
- maintient de l'ordre
- nettoyage et dsinfection aprs chaque travail ou la
fin de chaque journe, et aprs chaque souillure par du
matriel viable

Hygine du lieu de travail

Equipements:
responsable: personnel technique
- Dsinfection selon fiche technique
Un quipement devra tre dsinfect avant de le
sortir du laboratoire (changement de laboratoire,
rparation, mise la casse)
Surfaces (sols et murs): responsable: service de maison
- Selon le plan d'hygine
En cas de prsence d'insectes ou de rongeurs, faire
appel au Service de maison pour leur limination
Les animaux de compagnie sont interdits d'accs

5. Hygine personnelle
Port de la blouse ferme (ou autres vtements de
protection):
obligatoire dans les lieux de travail!
La blouse reste dans le laboratoire!!!

Hygine personnelle
Il est interdit de manger, de boire, de fumer, de
priser, de manipuler des verres de contact, dutiliser
des produits cosmtiques ou dentreposer de la
nourriture dans les lieux de travail

Hygine personnelle
Lavage/dsinfection des mains
Il convient de se dsinfecter (solution alcoolique) ou de se
laver (savon dsinfectant) soigneusement les mains:

la fin de chaque opration de travail

aprs le port de gant

avant de quitter le laboratoire

Prvention personnelle
Vaccination contre les hpatites A et B:
hautement recommande pour tout le personnel
Vaccination contre le mningocoque: recommand pour le
personnel des laboratoires de diagnostique
Vaccin contre la grippe: recommand
Test la tuberculine (Mantoux): l'engagement, puis
rythme annuel s'il est ngatif
(chaque anne pour le personnel du labo TB)
Mise jours des vaccins gnraux (diTE, ROR, etc.): contrle
par la Mdecine du Personnel lors de l'engagement

Prvention personnelle
Grossesse suspecte ou confirme:
Informer le mdecin du personnel ou/et le suprieur
responsable, afin que soient apprcis et discuts les
risques ventuels du poste de travail actuel.

Vdoc: 6.4.2A Directives gnrales

DIR CHUV: Protection des collaboratrices enceintes ou qui allaitent

Ne sont pas autorises pour les femmes enceintes

(*: + 3 premiers mois dallaitement)
les manipulations du virus HIV, herps simplex ou varicelle
*les manipulations de sang ou autres liquides biologiques HIV ou
HBV ou HCV positifs ou suspects de ltre
les manipulations de prlvements dclars infectieux (point jaune)
les manipulations dagents bactriens* (tuberculose, listeria,
gonocoque), viraux (en labsence dimmunit dmontre : CMV, virus
varicelle-zona, herps, rougeole, rubole, parvovirus B19) ou
parasitaire (toxoplasmose): valuation rigoureuse
*Les activits avec des agents infectieux dans le cadre des
laboratoires de recherches doivent dans tous les cas tre valus
avec la Mdecine du personnel.
Pour le gnral, voire le document Application de lordonnance sur
la protection de la maternit dans les Institutions HospicesCHUV .

Mesures de scurit supplmentaires

pour le laboratoire des mycobactries
Port des gants obligatoire pour toutes les
manipulations de cultures
Port d'une blouse usage unique obligatoire

Cette blouse ne doit pas quitter le laboratoire de tuberculose.

Les blouses usage unique doivent tre jetes dans les
poubelles biologiques rserves cet effet (sacs rays rouge
et blanc)

Entre du laboratoire restreinte au

personnel autoris

Mesures en cas de contamination

Contamination par du liquide
(tube de bouillon de culture ou
rcipient contenant un liquide
biologique cass, etc.)

Contamination par contact

(plaques de milieux de cultures qui
tombent par terre, chantillon clinique
qui tombe sur la surface de travail,
etc...)

Mesures en cas de contamination

Porter des gants
Recouvrir de papier absorbant
imbib de dsinfectant. Eviter de
sprayer ou de verser le dsinfectant
de haut, ce qui peut engendrer des
arosols
Laisser agir
ponger et jeter le matriel souill
dans conteneur adquat (Ne jamais

manipuler du verre cass directement avec

les mains, mme gantes, mais utiliser une
brosse et ramassoire, un pincette )

Mesures en cas d'accident

Mesures d'urgences
Piqre et blessures: laver immdiatement la partie lse l'eau
et au savon, la rincer abondamment et la dsinfecter (alcool ou
Betadine)
Projections sur les muqueuses (bouche, yeux): rincer
abondamment avec du srum physiologique ou dfaut de l'eau
du robinet

Conseil mdical rapide

Semaine, nuit, week-end et fris:

tl.

40 275

Dclarer l'accident
Dclaration avec le responsable du service adresse la
Mdecine du personnel (obligation lgale)

Les dsinfectants utiliss au CHUV

Strilium

(alcool, ammonium quaternaire):

dsinfection des mains

SeptoCHUV2000

(alcool, ammonium quaternaire):

dsinfection des surfaces

Lysetol AF (amines)

dsinfection des instruments (trempage)

Les dsinfectants utiliss au CHUV

Strilium

Septochuv

Lysetol

Bactries vgtatives

+++

+++

+++

Micobactries

++

+++

+++

Virus

+++

+++

+++

Champignons

+++

+++

+++

Spores

Documents
M:/IMU/COMMUN/
ACCREDITATION/
Bioscurit/Documents/
ScuriteLabo4_DBlanc.pdf