NOUVELLE METHODE DE PRODUCTION DE Spirulina platensis EN

UTILISANT UN MILIEU NATUREL A BASE DE L’EAU DE MER,

CENDRES DE BOIS ET LA SAUMURE DE FROMAGE.
BENAHMED DJILALI, A1⃰ ; SLIMANI, DJ1 ; BENSARA, A2; NABIEV, M3; BOUKSAIM, M 4 et
BENAMARA S.5
1
Faculté de Sciences Biologiques et Agronomiques. Université Mouloud Mammeri Tizi-Ouzou (15000)
Algérie.
2
Ecole Nationale Supérieure d’Agronomique ENSA d’Alger (16000) Algérie.
3
Laboratoire de Génie des Procédés Chimiques et Pharmaceutiques Université de Boumerdès (35000)
Algérie.
4
Institut de la Recherche Agronomique INRA Rabat Maroc.
5
Faculté des Sciences de l’Ingénieur. Université de Boumerdès (35000) Algérie.
* Auteur correspondent email: adiba.benahmed@yahoo.fr Phone: 00213793032409

Résumé
L’étude que nous avons menée a porté sur la valorisation des déchets agricoles et des sous-
produits de l’industrie fromagère. Il s’agit des cendres de bois (figuier et olivier) et la saumure
de fromage après utilisation. Le succès de la culture de Spirulina platensis est étroitement lié
à la qualité du milieu utilisé.
Dans ce contexte, le processus d’adaptation d’une spiruline Marocaine à un milieu optimisé à
base de ces déchets a été étudié.
L’optimisation des conditions de culture a permis de montrer la capacité de développement de
cette souche avec un rendement de 1,027±0,067g/MS/100ml du milieu de culture. La souche
neuve se caractérise par une teneur importante en cendres (10,027±0,106%) et en
phycocyanine (9,03%). L’extrait de cette dernière présente une activité antibactérienne avec
de larges zones d’inhibition (21, 12) contre (P.aeruginosa et S.aureus) respectivement.
Cette forme de recyclage permettra de réduire le taux de déchets dans la nature et de
minimiser les coûts de production de spiruline en utilisant des milieux artificiels.
Mots clés : Spirulina, culture, cendres de bois, saumure de fromage, phycocyanine.
1-Introduction

Spirulina platensis (ou Arthrospira platensis), une cyanobactérie filamenteuse plus

connue sous le nom de Spiruline. Cette dernière a été utilisée traditionnellement depuis
plusieurs de centaines d’années par certaines populations primitives d’Afrique et du Mexique
(FARRAR, 1966) et connue depuis les années soixante pour ses propriétés alimentaires (sa
richesse en protéines, béta-carotène (précurseur de la vitamine A), en fer, en vitamine B12, et
en acides gras) (SALL et al, 1999 ; Al-HOMAIDAN et al, 2013).
Outre que ces propriétés nutritionnelles, la spiruline connait aujourd'hui un regain
d'intérêt de la part de la communauté scientifique internationale du fait qu’elle est considérée
comme substance à vertus thérapeutiques.
La production de Spirulina platensis dans un milieu synthétique tel que le milieu
ZARROUK considéré comme étant un milieu de référence pour la culture de spiruline, est
très coûteuse vu les exigences trop élevées en éléments minéraux de cette algue, l’épuisement
rapide des minéraux et la difficulté de maintenir des conditions de culture favorables à
Spirulina platensis sont les inconvénients de ces milieux.
Ainsi, il est nécessaire de rechercher d’autres substrats de culture permettant de
produire massivement cette cyanobactérie et à bas prix, mais aussi des éléments minéraux
qu’elle épuisera dans ce milieu de culture avec une bonne maîtrise des techniques et
conditions de culture. De nombreuses recherches se sont focalisées ces dernières années sur
des ressources naturelles qui peuvent constituées des milieux de culture pour Spirulina
platensis.
Ces milieux naturels peuvent constitués une solution aux problèmes rencontrés lors de
la culture de spiruline dans les milieux synthétiques. (JARISOA, 2004), a mis en œuvre un
milieu de culture naturel pour spirulina à base de l’eau de mer traitée, ce milieu peut résoudre
de nombreux problèmes de culture dans les pays en voie de développement.
OUELDBELHACEN et al, (2013), ont conçu un autre milieu à base d’eau usée
domestique traitée par barbotage d’air pour diminuer la charge organique et supplémenter en
six éléments minéraux. Ce milieu permet l’obtention d’une production plus importante
comparé à celle obtenue dans un milieu synthétique de référence (milieu ZARROUK).
SelonHACENE et al (2004), l’isolement de la spiruline au lac d’El Goléa et de Ain
Salah situées au sud, a poussé l’Algérie à l’instar des nombreux pays algoculteurs a développé
une culture artificiel de Spirulina platensis au niveau de Tamanrasset mais la quantité
produite reste insuffisante pour couvrir les besoins du marché local.
Les rejets de l’industrie fromagère (saumure) peuvent constituer un bon substrat qui
permettra d’éviter l’apport couteux en éléments minéraux et peuvent aussi être une solution
adéquate aux problèmes de culture vu la richesse de ces rejets en éléments minéraux.
Dans le présent travail, nous avons jugé utile de développer des milieux en valorisant
des déchets agricoles et les sous-produits de l’industrie alimentaire.
Cette approche permet un bon recyclage des nutriments en vue d’une meilleure
optimisation de la culture avec une meilleure productivité en comparaison avec la culture
artificielle.

II-Matériels et Méthodes
L’objectif principal de cette étude est la possibilité de développer la spiruline dans des
milieux naturels en valorisant des déchets agricoles et les sous-produits de l’industrie
alimentaire (saumures), en vue de l’obtention d’une spiruline bio, tout en minimisant les coûts
de production. Les sources naturelles utilisées dans notre étude sont :
 -Mélange d’eau de mer et d’eau de robinet. Ce mélange a été utilisé comme source de
salinité et de minéraux.
- Les cendres de bois (olivier et figuier) utilisés comme source d’alcalinité et source
minérale (BENAHMED-DJILLALI, 2012).
-Saumures de fromage et d’olive suit à son usage, ont été utilisées comme sources de
salinité et d’azote.
La souche de spiruline utilisée est d’origine Marocaine (figure4), nous a été fournie
par le laboratoire de recherche INRAA Maroc. Elle est issue de la culture artificielle en
utilisant le milieu ZARROUK.
Afin de choisir les meilleurs milieux, dix milieux ont été préparés à partir les
différentes sources naturelles. En se basant sur le critère d’alcalinité, deux milieux ont été
retenus M5 et M6 (pH >9) sachant que le pH optimal préconisé pour la culture de spiruline
varie de 9 à 11 (JOURDAN, 1999).

Estimation des paramètres de culture

Le suivi des filaments algaux des frottis a été réalisé chaque deux jours
Rendement en spiruline: séparation de la biomasse puis séchage à 65°C Pdt 10mn
(Humidité de 4-7%).
Estimation de la biomasse (Dosage de la Phycocyanine): extraction mécanique dans
la solution tampon phosphate pH 6,8 et mesure de la DO à 618nm).
Activité microbienne de la phycocyanine extraite de la spiruline issue du milieu M5
aux souches pathogènes (A.niger; P.aeuginosa et S.aureus)

Etude morphologique de la spiruline

Etude microscopique (Motic BA 300/Associé à une caméra)
Etude macroscopique (MEB de type (XL 20).

III-Résultats et discussion
3-1- Evaluation de la culture dans les différents milieux naturels
Le tableau 1 donne la composition minérale des milieux naturels utilisés (M1, M2, M3, M4).
 Tableau 1 : Composition minérale des différents milieux naturels (mg/ 100ml)
Milieux Fe Cu Zn Na K Mn Cd Ni Cr
M1 0,039 0,161 0,1867 / 294,4083 0,006 0,055 0,004 0,085
M2 0,157 0,228 0,0285 42,1273 / 0,031 0,029 0,007 0,034
M3 0,542 0,336 0,3128 / 1101,301 0,060 0,113 0,156 0 ,305
M4 1,798 0,276 0,7534 / 564,5251 0,381 0,067 0,026 0,057
M1 : (9/1 (V/V)) eau de mer /eau potable ; M2 : (1/1 (V/V) S1/S2 ; S1 : poudre de cendres de
figuier (10%), S2 : poudre de cendres d’olivier (10%) ;M3 : saumure d’olives suite à son
usage ;M4 : saumure de fromage suite à son usage.

Les résultats obtenus montrent que les saumures peuvent constituer un milieu favorable
pour la croissance de la spiruline, mais leur pH acide (M3 :4,5±6,36 et M4 :4±6,27)
représente un facteur limitant pour le développement de cette micro algue. Tandis que, la
solution des cendres de bois peut remédier à ce problème avec son pH alcalin (10±14,4).
Après 20 jours de culture, une inhibition de la photosynthèse (dépigmentation) a été
constatée dans les milieux M1, M2 et M3. Tandis que, pour le milieu M4 la dépigmentation a
été observée au bout de 18 jours de culture. Cette inhibition induit à l’arrêt de croissance de
spiruline dans ces milieux. Ceci est dû à la diminution du pH en fonction du temps de
culture).Généralement, l’abaissement du pH s’explique par l’absence des nitrates ou des
phosphates dans les milieux. Le manque de ces éléments induit à la formation des grumeaux
jaunes qui explique l’inhibition de la photosynthèse des substances vertes (chlorophylle et
phycocyanine). Il est à signaler, que la possibilité de culture de Spirulinaplatensis dans l’eau
de mer a été vérifiée en 2004 par JARISOA. Cet auteur a démontré la faisabilité de culture de
la spiruline Malgache dans l’eau de mer traité par précipitation afin d’éliminer le Ca et le Mg.
Ces deux derniers, selon le même auteur peuvent gêner la croissance de la Spiruline. En 2013,
BENAHMED-DJILLALI, a confirmé la possibilité de culture de la spiruline Burkinabé dans
une solution à base de l’eau de mer et les cendres de bois (olivier, figuiers et palmiers)
(BENAHMED DJILALI et BENAMARA 2013).

3-2-Evaluation de la culture dans les milieux optimisés M5 et M6

3-2-1-L’étude morphologique
Cette étude a été réalisée à l’aide d’un microscope optique qui nous a permis de suivre
l’évolution de la morphologie des filaments au cours de la culture. Nous avons constaté un
changement de la forme et le nombre des spires de la spiruline dans les différents milieux
surtout dans le milieu M5. Le nombre de spires varie de 5 à 7 spires.
Une comparaison a été faite entre la structure de la spiruline obtenue au laboratoire
dans les milieux conçus (M5 et M6) et celle de référence (souche Marocaine) (figures1 et 2
respectivement).

Figure1: structure microscopique de la spiruline produite dans

les milieux M5 et M6.
 Figure 2 : structure microscopique de la spiruline de référence.

La souche neuve issue de développement de la spiruline Marocaine dans les deux

milieux M5 et M6 change complètement sa structure de la forme spiralée vers la forme
stratifiée du trichome. Nos résultats sont en accord avec ceux publiés par JEEJI BAI(1985),
BENDHIAB et al. (2007) et BENAHMED-DJILALI (2012), qui ont démontré que la
concentration en NaCl modifie considérablement la morphologie de la spiruline. Ces auteurs
ont conclu qu’une concentration élevée en NaCl inhibe le développement de la structure
hélicoïdale et favorise la structure stratifiée.

3-2-2-Evaluation de la biomasse dans les deux milieux optimisésM5 et M6

Nous avons obtenu un rendement de 3,05±0,305 g MF / 100 ml pour le milieu M5 et
1,2±0,447 g MF/ 100 ml pour le milieu M6 (tableau 2). Le milieu M5 donne un taux
nettement supérieur à celui rapporté par MARKOU et al. (2012) ont obtenu un rendement de
0,166±0,0024g MF/ 100ml dans un milieu conçu des eaux usées récupérées des moulins
d’huiles d’olives et reste légèrement inférieur à celui trouvé par BENAHMED-DJILALI
(2012) qui a obtenu un rendement de l’ordre de 3,390±0,0051gMF/100ml.

Tableau 2 : Rendement en spiruline cultivée dans M5 et M6 (n=3).

Durée de Densité de Masse fraiche Masse sèche
Milieux
culture l’inoculum (g/100ml) (g/100ml)
M5 21jours 0,143 3,05±0,305 1,027±0,067
M6 21 jours 0,143 1,2±0,447 0,51±0,0431

La souche neuve est essentiellement composée de macroéléments comme le sodium

(21358,66mg/kg), le potassium (1960,631mg/kg) et le magnésium (40077,59mg/kg). Les
oligo-éléments sont constitués en majeure partie du fer (1953,425 mg/kg). Cette souche
contient donc presque la totalité des sels minéraux et des oligo-éléments qui sont
indispensables à la croissance et à la vie de tous les organismes, particulièrement le fer qui
anti-infectieux et antioxydant et il participe à la respiration. La teneur en fer est inférieure à
celle de la souche de référence. Néanmoins, les teneurs en minéraux obtenues sont élevées
par apport aux celles citées dans la littérature et celles de la souche de référence.
La souche obtenue contient des quantités en métaux lourds (Co, Cd, Pb, Cr, Ni) conformes
aux normes établies par le FAO et OMS. Cette richesse en minéraux est certainement due à la
composition du milieu et selon de nombreux auteurs influence remarquablement la
composition de la spiruline.

2-2-3- Résultats de l’activité antimicrobienne

L'activité antibactérienne a été projetée contre des souches bactériennes qui causent de
graves problèmes pour la santé humaine, Cette étude a démontré que l’extrait de
phycocyanine de la souche issue du milieu de culture préparé à base de rejets de saumure
fromagère présente les plus grands diamètres d'inhibition 1,6±0,492 et 1,43±0,479 vis-à-vis
respectivement de P.aeruginosa et S. aureus en comparaison à celles de la souche de
référence et celles de quelques espèces de cyanobactéries tels que
Anabaenaaphanizomenoides,Nostoc muscorumetOscillatoriachlorinaobtenues par OUFDOU
et OUDRA (2009).

IV-Conclusion
Notre étude a permis de mettre en œuvre un milieu de culture naturel pour Spirulina
platensis. Plusieurs milieux ont été élaborés à base de saumures fromagère et l’eau de mer
comme des sources de salinité et les cendres de bois (figuier et olivier) comme source
d’alcalinité. Les deux milieux M5 et M6 ont été optimisés en appliquant le plan des mélanges
mixtes. Tels que : M5 :(0,5M1+0,25M2+0,25M3) ; M1 :(9/1 (V/V)) eau de mer /eau potable ;
M2 : (1/1 (V/V) S1/S2 ; S1 : poudre de cendres de figuier (10%), S2 : poudre de cendres
d’olivier (10%) et M6 : saumure de fromage suite à son usage.
Les deux milieux M5 et M6 représentent un pH optimal pour la croissance de spiruline
(pH=9,45±0,351 n=3) et (pH=9,05±0,045 n=3) respectivement. Le milieu M5 donne un
meilleur rendement en spiruline (1,027±0,067g MS/100mln=) en comparaison avec celui
obtenu dans le milieu M6 (0,51±0,0431g MS/100ml).
La caractérisation biochimique de la souche issue du nouveau milieu de culture (M5)
révèle que la souche neuve est très riche en minéraux avec un taux de cendres de
10,64±0,106% n=3, elle renferme aussi une quantité importante de substance bioactive :
phycocyanine 9,03%.
D’après les résultats, nous pouvons conclure que notre cyanobactérie présente une
importante capacité antimicrobienne, ce qui la rend très intéressante pour le dépistage des
produits naturels. Nos résultats suggèrent la possibilité d'utiliser l’extrait de cette algue verte
en thérapie comme des alternatives naturelles aux antibiotiques actuellement sur le marché.
L’étude qu’on a menée montre que la croissance de la spiruline est liée à de nombreux
paramètres (pH, salinité, lumière, agitation...), ces paramètres peuvent devenir des facteurs
limitant le développement de Spirulina platensis s’ils ne sont pas bien maitrisés et suivi au
cours de la culture.
En perspectives, ce travail gagnerait à être approfondi par :
• Caractérisation de la composition chimique et génétique de la souche neuve.
• Culture de la spiruline dans des grands bassins.
• Utilisation des substances bioactives dans les produits alimentaires et
pharmaceutiques.
• Valorisation d’autres produits de rejets alimentaire pour la culture de la spiruline

• REFERENCES

Al-HOMAIDAN A-A., Al-HOURI H-J., Al-HAZZANI A-A., ELGAALY G.,

MOUBAYED N. (2013). Biosorption of copper ions from aqueous solutions by Spirulina
platensis biomass. Arabian Journal of Chemistry.
AMERICAN OIL CHEMISTS’ SOCIETY ( AOCS ). (1990). Official methods and
recommanded practics. 4th ed.
BABADZHANOV A-S., ABDUSAMATOVA N., YUSUPOVA F-M., FAIZULLAEVA
N., MEZHLUMYAN L-G. et MALIKOVA M-KH. (2004). Chemical composition of
Spirulina platensis cultivated in Uzbekistan. Chemistry of Natural Compounds, 40 (3),276-
279.
BANJI D., BANJI J-F., PRATUSHA G., ANNAMALAI A-R. (2013) Investigation on the
role of Spirulina platensis in ameliorating behavioural changes, thyroid dysfunction and
oxidative stress in offspring of pregnant rats exposed to fluoride. Food Chemistry, 140 , 321-
331.
BATISTA A-P., GOUVEIA L., BANDARRA N-M., FRANCO J-M. et RAYMONDO A.
(2013). Comparison of microalgal biomass profiles as novel functional ingredient for food
products. Algal Research (2), 164–173.
BELAY A., OTA Y., MIYAKAWA K. et SHIMAMATSU H. (1993). Current knowledge
on potential health benefits of Spirulina. Journal of applied phycology (5), 235-241.
BENAHMED-DJILALI A. (2012). Analyse des aptitudes technologiques de poudres de
dattes (Phoenix dactylifera. L) améliorées par la spiruline. Etudes des propriétés rhéologiques,
nutritionnelles et antibactériennes. Docteur d’état en Génie des procédés, Université
M’HAMED BOUGARA, Boumerdes, Algérie.
BEN DHIAB R., BEN OUADA H., BOUSSETTA H., FRANK F., El ABED A.,
BROUERS M. (2007). Growth, Fluorescence, Photosynthetic O2 production and pigment
content of salt adapted cultures of Arthrospira platensis. J Appl Phycol. 19: 293-30.
BENDHIAB R., GHENIM N., TRABELSI L., YAHIA A., CHELLOUF R., GHOZZI K.,
AMMAR J., OMRANE H. et BEN OUADA H. (2011). Modeling growth and
photosynthetic response in Arthrospira platensis as function of light intensity and glucose
concentration using factorial design. Journal of applied phycology (22), 745-752.
BERGUEY S. (1994). Manual of determinative bacteriology. Ed ninth, 1711-1807.
CHEN H., PAN S. (2005). Bioremediation potential of spirulina: toxicity and biosorption
studies of lead. Journal Zhejiang Univ. SCI. Vol 3, pp 171-174.
COLLA L-M., REINEHR C-O., REICHERT C.et VIEIRACOSTA J-A. (2007).
Production of biomass and nutraceutical compounds by Spirulina platensis under different
temperature and nitrogen regimes. Bioresource Technology, 98, 1489–1493.
DEY S., RATHOD V-K. (2013). Ultrasound assisted extraction of β-carotene from
Spirulina platensis. Ultrasonics Sonochemistry, 20(1), 271-276.
DOKE J-H. (2005). An improved and efficient method for the extraction of phycocyanin
from Spirulina sp. Food eng. Vol 1, pp 2.
DANSOU D-K. (2002). Developpement de la culture de la spiruline (Spirulina platensis) et
valorisation de celle-ci au BURKINA FASO. Diplôme d’études supérieures spécialisées en
Industries Agro-alimentaires, Université de OUAGADOUGOU, BURKINA FASO.
EL HASSOUNI H., ABDELLAOU D., GNAOUAT H., DAHMANI F-H.,
BENGUEDDOUR R. (2013). Évaluation de l’activité antimicrobienne des extraits de deux
algues rouges, Osmundea pinnatifida et Gigartina acicularis. ScienceLib. Volume 5, N °
130612.
ESTRADA J-E., BESCOS P., VILLAR DEL FRESNO A-M. (2001). Antioxidant activity
of different fractions of Spirulina platensis protean extract. IL Farmaco, 56, 497–500.
FARRAR W-V. (1966). Techuitlatl, A Glimpse of Aztec Food Technology. Nature, 211, 341-
342.
FALQUET J et HURNI J-P (2006). Spiruline aspects nutritionnel. Antenna technologies :
41 p. (http://www.antenna.ch/malnutrition/aspects-nutritionnels.html)
FERREIRA L-S., RODRIGUES M-S., CONVERTI A., SATO S., CARVALHO J-C-M.
Arthrospira (Spirulina) platensis cultivation in tubular photobioreactor: use of no-cost CO2
from ethanol fermentation. Applied Energy (2012); 92:379–85.
FOX R-D. (1986). Algoculture : la spiruline, un espoir pour le monde de la faim. Edisud,
Aix-en-Provence, 319 p.
FOX R-D. (1999). Spiruline, Technique pratique et promesse. Aix en Provence, Edisud,
N°246.
GEFFROY B et SIMON O. (2013). Effects of a Spirulina platensis-based diet on zebra fish
female reproductive performance and larval survival rate. Cybium, 37 (1-2), 31-38.
GILLES P., CHARITO F. (2009). La spiruline pour tous –culture familiale. PILGRIM
PUBLISHING, 179p.
GIRARDIN-ANDREANI C. (2005). Spiruline : système sanguin, système immunitaire et
cancer. Phytothérapie (4), 158-161.
HACENE H., RAFA F., CHEBHOUNI N., BOUTAIBA S., BHATNAGAR T.,
BARATTI J-C E et OLLIVIER B. (2004). Biodiversity of prokaryotic micro flora in El
Golea salt lake. Algerian Sahara. Journal of Arid Environnements, 58, 273-284.
JAGIELLO M., MINTA E., CHOJNAKA K et KAFARSKI P. (2006). Mode of
biosorption of chromium (III) by Spirulina species cells from aqueous solutions . Water
Environnement Research. Vol 78, N°7, pp 740-743.
JARISOA T. (2006). Adaptation de la spiruline du sud de MADAGASCAR à la culture en
eau de mer. Mise au point de structure de production à l’échelle villageoise. Thèse de
Doctorat Es Sciences en Océanologie Appliquée. Université de TOLIARA, MADAGASCAR.
JEEJI BI N. (1985). Comparative exclusion of morphological transformation. A case stady
with Spirulina fusiformis. Arch Hydrobiol suppl. Algal stud. Vol 71, N°191, pp 38-39.
JOURDAN J-P. (2002). Compte rendu du Mini-Colloque du Mailet sur la production de la
spiruline artisanale. pp1-7.
JOURDAN J-P. (2006). Cultivez votre spiruline. Manuel de culture artisanal pour la
production de spiruline. Antenna technologie, Paris.
KORNPROBST J-M. (2005). Substances naturelles d’origine marine ; Chimiodeversité-
Pharmacodeversité-Biotecnologies. Tech & Doc, Lavoisier, Paris.
KEPEKCI R., POLAT S., ÇELIK A., BAYAT N., SAYGIDEGER S-D. (2013).
Protective effect of Spirulina platensis enriched in phenolic compounds against hepatotoxicity
induced by CCl4. Food Chemistry, 141(3), 1972-1979.
LANGLAND M-J., ALLIOD R et CHARPEY J. (2008). Utilisations de la Spiruline
autrement que pour traiter la malnutrition. URCYROCO, IRD, COM, Paris.
LEE Y-K., BUNNAG B., TANTICHAROEN M. et CHANAWONGSE L. (1994).Y. K.
LEONARD J et COMPERE P. (1967). Spirulina platensis (Gom.) Geitler, algue bleue de
grande valeur alimentaire par sa richesse en proteines. 37 (1), Suppl. 23 p.
LIN C-C., WEI C-H., CHEN C-I., SHIEH C-J. et LIU Y-C. (2013). Characteristics of the
photosynthesis microbial fuel cell with a Spirulina platensis biofilm. Bioresource
Technology, 135, 640–643.
LU H-K., HSIEH C-C., HSU J-J., YANG Y-K. ET CHOU H-N. (2006). Preventive effects
of Spirulina platensis on skeletal muscle damage under exercice-induced oxidative stress. Eur
J. Appl physiol, 98, 220-226.
MADKOUR F-F., KAMIL A. et NASR H. Production and nutritive value of Spirulina
platensis in reduced cost media. Egyptian Journal of Aquatic Research. (2012). 38, 51–57.
MARKOU G. (2012). Alteration of the biomass composition of Arthrospira (Spirulina)
platensis under various amounts of limited phosphorus. Bioresource Technology, 116, 533–
535.
MARKOU G., CHATZIPAVLIDIS I. et GEORGAKAKIS D. (2012). Cultivation of
Arthrospira (Spirulina) platensis in olive-oil mill wastewater treated with sodium
hypochlorite. Bioresource Technology, 112,234–241.

MATSUDO M-C., BENZERRA R-P., SATO S., PEREGO P., CONVERTI A.,
CARVALHO J-M.(2013). Repeated fed-batch cultivation of Arthrospira (Spirulina)
platensis using urea as nitrogen source. Biochemical Engineering, 43, 52–57.
M’BAYE B-K., BAIDY L et BASSENE E. (2011). Contrôle de l’évolution des paramètres
de culture de spiruline. ScienceLib 110902(3), 2111-4706.
MOORHEAD K., CAPELLI B et CYSEWSKI G-R. (2006). SPIRULINA NATURE’S
SUPERFOOD. 2eme edition. Cyanotech Corporation, Hawaii.
OUFDOU K., OUDRA B. (2009). Substances bioactives élaborées par des cyanobactéries
isolées de certains écosystèmes aquatiques marocains. Afrique SCIENCE 05(2), 260 – 279.

OYA IRMAK S., ARZU AkPINAR B., BELKIS C. (2013). Determination of fatty acids
from Spirulina platensis under different extraction methods. Current Opinion in
Biotechnology, 24(1), 91-92.
PANIAGUA-MICHEL J., DUJARDIN E. et SIRONVA C. (1993). Le Tecuitlal, concentré
de spirulines source de protéines comestibles chez les Aztèques. Cahiers de l'Agriculture, 2,
283-287.
PELMONT J. (1995). Bactéries et environnement, adaptations physiologiques. Presses
Universitaires de Grenoble. Volume 2, Grenoble.
PEIRETTI G-P., MEINERI G. (2011). Effects of diets with increasing levels of Spirulina
platensis on the carcass characteristics, meat quality and fatty acid composition of growing
rabbits. Livestock Science, 140, 218-224.
PERRY J-J., STALEY J-T. et LORY S. (2004). MICROBIOLOGIE, cours et questions de
révision. DUNOD, Paris.
PIERLOVISI C. (2007). L'Homme et la Spiruline: Un avenir commun? Composition
chimique, intérêts alimentaires et activités biologiques. Paris V- René Descartes, Faculté des
Sciences Pharmaceutiques et Biologiques, Paris (162).
PONS T. (2010). Une algue verte envahit la Côte d’Azur. TRAVAUX & INNOVATIONS
NUMÉRO 171.
PLANES P., ROUANET J-M., LAURENT C., BACCOU J-C., BESANCON P. et
CAPORICCIO B. (2002). Magnesium bioavailability from magnesium-fortified spirulina in
cultured human intestinal Caco-2 cells. Food Chemistry, 77(2), 213-218.
PULZ O., GROSS W. (2004).Valuable products from biotechnology of microalgae. Applied
Microbiology and Biotechnology, 65, 635-648.
RAMADE F. (2005). Eléments d’écologie. 6° édition. Paris. Dunod, 840 p
ROMAY CH., GONZALEZ R., LEDON N., REMIREZ D. et RIMBAU V. (2003). La
SPIRULINE : UNE SOURCE ALIMENTAIRE A PROMOUVOIR. Médecine d’afrique
noire, 46(3) ,140-141.
SALL M-G., DANKOKO G., BADIANE M., EHUA E. et KUAKUWI N. (1999).
Résultats d’un essai de réhabilitation nutritionnelle avec la spiruline à DAKAR (à propos de
59 cas). Médecine d’Afrique noire, 46(3), 143-146.
SAUTIER C., TREMOLIERES J. (1976). Food value of spirulina in humans. Annales de
la Nutrition et de l'Alimentation, 30, 517-534.
SGUERA S. (2008). Spirulina platensis et ses constituants intérêts nutritionnels et activités
thérapeutiques. Diplôme d'Etat de Docteur en Pharmacie, Université HENRI POINCARE,
Nancy, France.
SMAOUI S. (2010). Purification et Caractérisation de Biomolécules à partir de
microorganismes nouvellement isolés et identifiés. Diplôme d’Etat de Docteur en Science
Biologique, La Faculté des Sciences de Sfax, Sfax, Tunisie.

SPOLAORE P., JOANNIS-CASSAN C., DURAN E. et ISAMBERT A. (2006).

Commercial Applications of Microalgae. Journal of Bioscience and Bioengineering, 101, 87-
96.
VONSHAK A., ABELIOVICH A., BOUSSIBA S. et RIICHMOND A. (1982). Production
of Spirulina biomass: effects of Environmental Factors and Population Density. Biomass, 2,
175-185.
YANYUAN C., ZUCHANG W., LEI B, DAOLUN F., DENNIS Y-C. (2013). Cultivation
of Spirulina platensis for biomass production and nutrient removal from synthetic human
urine. Applied Energy, 102, 427-431.
ZENG M-T., VONSHAK A. (1998). Production of Spirulina drink, (in chinese). Food sci .
Vol 16, N° 7, pp 39-418.