ISOLEMENT DE BACTERIES DU FER ET DU MANGANESE A

PARTIR DES BOUES DE FILTRATION DE LA SDE

1. PRELEVEMENT DES BOUES

Les boues ont été prélevées à la station de traitement des eaux de Kolda. Ces boues nous
proviennent précisément du bassin de filtration de déferrisation.

Station de
déferrisation de
Kolda

Lit de filtration

Boue prélevée
2. ISOLATION DES BACTERIES SUR DES BOITES DE PETRIE

L’étape d’isolation a été faite sur des boites de pétrie.

3. CULTURE DES MICRO-ORGANISMES

A l’instar des milieux de culture préparés, celui avec le sulfate de fer donne sur le plan
qualitatif des résultats probants.

4. DOSAGE DU FER PAR SPECTROPHOTOMETRIE

Dosage spectrophotométrique (UV-Visible) du Fer(II) par l’ortho-phénanthroline. La

technique de spectrophotométrie ou d'absorptiométrie est basée sur la propriété de la matière,
et plus particulièrement de certaines molécules, d'absorber certaines longueurs d'ondes du
spectre UV-visible. Elle permet de réaliser des dosages grâce à la loi de Beer-Lambert qui
montre une relation de proportionnalité entre l'absorbance et la concentration, aussi bien
qu'une étude structurale des complexes par l'étude des spectres d'absorption.
Cette méthode est basée sur l'utilisation d'un spectrophotomètre qui détermine l'absorption
d'une solution pour une longueur d'onde donnée ou pour une plage de longueurs d'ondes
judicieusement choisie.

Matériel et mode opératoire

Dosage spectrophotométrique (UV-Visible) du Fer(II) par l’ortho-phénanthroline

Pour ce faire on a besoin du materiel suivant :

 Spectrometre UV-Visible

Modes opératoires

Dosage spectrophotométrique (UV-Visible) du Fer(II) par l’ortho-phénanthroline

On prépare les solutions suivantes :

 O-phénanthroline monohydrate 0,25% dans l’eau

 Acétate de sodium 2M
 Chlorure d’hydroxylammonium 10% dans l’eau

Pour la courbe d’étalonnage, préparer, à partir du sulfate de fer (FeSO4) une solution 10-3
(solution mère) dans H2SO4 1M. Dans des ballons jaugés de 100ml numérotés de 1 à 7, mettre
les volumes de réactifs indiqués dans la table suivante, et ajuster au trait de jauge.
 Solution Chlorure Acétate de o- Concentration finale(
mère (ml) d’hydroxylammoniul(10%) sodium 2M (ml) phénanthroline mol/L)

1 10 1 8 0,00001

2 10 2 8 0,00002

3 10 3 8 0,00003

4 10 4 8 0,00004

5 10 5 8 0,00005

6 10 6 8 0,00006

7 10 7 8 0,00007

8 10 8 8 0,00008

Après ajustement au trait de jauge, mélanger soigneusement et laisser reposer pendant 5 à 10

minutes. Entre-temps, préparer la référence et l’inconnu, puis mesurer la densité optique à 510
nm par rapport à la solution de référence.

Préparer dans un ballon jaugé de 100 ml la solution de concentration inconnue en mettant un

volume environ 5 ml de celle-ci et autant des autres réactifs que pour la solution de référence.

Courbe d’étalonnage :

Elle nous permet de déterminer les concentrations des solutions inconnues grâce à la
proportionnalité entre la densité optique et la concentration qui donne une droite linéaire.
Ainsi la projection de la densité optique de la solution inconnue donne directement la
concentration diluée de celle-ci qui doit être multipliée par un facteur de dilution donné
La lecture des densités optiques donne les résultats suivants :

Solutions Sol.1 Sol.2 Sol.3 Sol.4 Sol.5 Sol.6 Sol.7 Sol.8

Concentrations 1 2 3 4 5 6 7 8

(mol/L en 10-5)

Absorbances 0,2180 0,2333 0,2002 0.1528 0,8021 0,9372 1,0411 1,1523

Résultats des applications des différentes méthodes de dosage du fer (II) à quelques
échantillons d’eau potable.

Dosage spectrométrique d’eaux de robinet et d’eaux de forage

Courbe d’étalonnage DO=f (C)

1.4

1.2
f(x) = 0.145971 x + 0.0252515555555556
1 R² = 0.990881971121477
Absorbance

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

[Fer] en mol/L
ELIMINATION BIOLOGIQUE ET DOSAGE DU FER ET DU MANGANESE
DOSAGE DES ECHANTILLONS
Après avoir opérer 24 heures d’incubation, voici les résultats :
Dosage du Fer total…..
SE FIER AU FICHIER EXCEL