HÔPITAL STE JOSEPHINE

BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Code : PDG-HSJB-01
Mission Tové PROCEDURE DE DOSAGE DE LA Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 Nombre de pages :
GLYCEMIE Date d’application :

Création du document : 02 Mars 2022

Nom Fonction Date et Signature

Auteur(s) Surveillant du
FOLLY Yao Anani
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Table des matières

1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3
2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3
3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3
4- Principe......................................................................................................................................3
5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3
6- Échantillon :...............................................................................................................................4
7- Équipements et fournitures.........................................................................................................4
8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4
9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4
10- Mode opératoire......................................................................................................................5
11- Valeurs de référence :.............................................................................................................6
12- Interférences...........................................................................................................................6
13- Valeurs critiques.....................................................................................................................6
14- Formulaires connexes.............................................................................................................6
15- Références..............................................................................................................................6
16- Pièces jointes..........................................................................................................................6
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1- Objectifs et portée
Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage du glucose dans le sérum, le
plasma, le liquide céphalorachidien (LCR), et les urines. Elle permet de diagnostiquer un
éventuel diabète

2- Abréviations et définitions
CIQ : Contrôle Interne de Qualité
GOD : Glucose Oxydase
LCR : Liquide Céphalorachidien
PAP : Amino Antipyrine
SL : Surveillant du laboratoire
RQ : Responsable Qualité

3- Tâches, autorisations et responsabilités

Tâche Autorisé Responsable

Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, SL SL
Mesure à blanc RQ, SL SL
Préparation des réactifs RQ, SL SL
Préparation des sérums de contrôle RQ, SL SL
Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, SL SL
Passage des échantillons RQ, SL SL
Validation analytique RQ, SL SL

4- Principe
Il s’agit d’une méthode enzymatique (GOD- PAP) avec une lecture à point final. Le glucose
est oxydé par le Glucose oxydase en acide gluconique avec production de l’eau oxygénée qui
réagit en présence du Peroxydase (POD) avec le Chloro 4 phénol et l’Amino Anti Antipirine
(PAP) pour former la quinonéimine (Composé rouge) suivant la réaction ci-dessous :
ß- D - Glucose + O2 + H2O Acide gluconique + H2O2
2H2O2 + Phénol + 4-aminophénazone Quinoneimine + 4H2O
La densité optique de la quinoneimine à 500 nm est proportionnelle à la quantité de glucose.
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5- Sécurité et environnement
- Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes)
- Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux.
- Respect la procédure de tri et de gestion des déchets
Par mesure de sécurité, tous échantillon doivent être traités comme potentiellement
infectieux.

6- Échantillon :

Matériel Quantité minimale Stabilité

Sérum 50 µl 8 h à 25 °C, 72h entre 2 et 8° C
Plasma (héparine) 50 µl 8 h à 25 °C, 72h entre 2 et 8° C
Plasma (tube fluoré) 50 µl 24h à 25 °C
LCR 50 µl -20 °C
Urine 50 µl 24 h avec 5 ml d’acide acétique glacial

7- Équipements et fournitures
Consommable
Embouts de pipette, 10-100 µl
Embouts de pipette, 100-1000 µl
Tube à hémolyse
Matériel et équipement :
Spectrophotomètre
Micropipette 10-100 µl
Micropipette 100-1000 µl
8- Réactifs et produits chimiques
Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage
Flacon R1 Tampon enzyme 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R2 Chromogène 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R3 (Etalon primaire) Glucose 1 g/l 2à8°C Réfrigérateur
Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur
Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur

- Préparation de la solution de travail : Mélanger le volume d’eau distillée indiqué

sur le flacon R1 avec le contenu du flacon R2. Après dissolution (environ 2 minutes),
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ajouter le contenu du flacon R2 et mélanger doucement. Conserver le réactif à l’abri

de la lumière.
- Stabilité : La solution de travail est stable 2 ans jusqu’à la date de péremption
indiquée sur le flacon.
9- Contrôle de la qualité
Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control
pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle
qualité
10- Mode opératoire
o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié
leurs conformités.
o Centrifugation et décantation : Centrifuger à 4000 tours pendant 10 minutes puis
décanter le sérum.
o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail
o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si
nécessaire
o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve
avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc.
Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée.
o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le tableau
ci-dessous
Blanc Etalon Dosage
Réactif 1ml 1ml 1ml
Eau déminéralisée 10 µl
Etalon 10 µl
Spécimen 10 µl
Bien mélanger et incuber pendant 10 minutes à 37°C ou 20 minutes à la température ambiante puis lire à 500 nm (
560). La coloration est stable de 15- 20 minutes et décroit lentement.
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Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique
avant d’analyser chaque série d’échantillon.
o Calcul
|( Dosage )|×Concentration étalon
Résultat :
|( Etalon)|
o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes
phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ.
o Intervalle de mesure : 0,10 – 5 g/l, diluer au 1/2 avec du sérum physiologique si la
valeur est supérieur à 5g/l (28 mmol/l).
o Facteur de conversion 
g/l x 5,56 = mmol/l
11- Valeurs de référence :
Glycémie à jeun : 0,70-1,10 g/l
Glycémie post-prandiale (2 heures après) : < 1,40 g/l
12- Interférences
Acide ascorbique : Pas d’interférence jusqu’à 100 mg/l
Bilirubine totale : Interférence négative à partir de 200 mg/l
Bilirubine directe : Pas d’interférence
Hémolyse : Pas d’interférence
Lactescence : Interférence positive à partir de 6,26 g/l de triglycérides
13- Valeurs critiques 
Valeurs critiques : Glycémie < 0,45 g/l ou Glycémie > 4,5 g/l
14- Formulaires connexes
- Fiche de paillasse :
- Fiches de gestion des CIQ :
15- Références
- Normes ISO 15189
- Fiche technique du réactif du dosage du glucose (GOD-PAP) BIOLABO Ref : 87109.
16- Pièces jointes
Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation