TP : Vérification de la pureté d’un complément protéique

TP : Vérification de la pureté d’un complément protéique

Pré-requis : AVANT le TP, maitriser parfaitement les fiches de techniques de chimie expérimentale Conductimé-
trie et Titrage colorimétrique.

I NTRODUCTION
Le site internet https ://fr.myprotein.com vent un produit appelé « Glycine 100 % ». Le site
précise que : « la glycine est un acide aminé non essentiel naturellement présent dans les
protéines qui contribuent à la construction et à la réparation des nouveaux muscles. Elle
est donc extrêmement importante, que votre objectif soit de vous muscler ou de vous re-
mettre en forme et de vous tonifier. Notre poudre d’acide aminé « Glycine 100 % » est un
moyen facile de vous assurer que vous recevez un apport suffisant. »
L’objectif de ce TP est de vérifier la pureté du produit vendu sous le nom de « Glycine 100 % ».

D ONNÉES NUMÉRIQUES
Structure de la glycine Constantes d’acidié à 25◦ C
• pK a (AH+ ±
2 /AH ) = 2, 3
O ± −
• pK a (AH /A ) = 9, 6
H2 N
OH
Conductivités ioniques molaires à dilution infinie
Masses molaires atomiques (valeurs à 298 K)

Élément M (g.mol−1 ) Ion λ◦ (S.cm2 .mol−1 )

H 1, 0 H+(aq) 350
–
C 12, 0 OH(aq) 192
–
N 14, 0 Cl(aq) 75, 5

O 16, 0 Na+(aq) 50, 9

Na 23, 0 AH+2(aq) 88, 0

–
Cl 35, 5 A(aq) 15, 0

Indicateurs colorés acido-basiques en solution aqueuse

Couleurs des solutions

Indicateur pK a milieu milieu zone de virage
à 25 ◦ C acide basique
Hélianthine 3,7 rouge jaune 3,1 – 4,4
Bleu de bromothymol 7,0 jaune bleu 6,0 – 7,6
Phénolphtaléine 9,6 incolore rose 8,0 – 9,9

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D ÉMARCHE EXPÉRIMENTALE PERSONNELLE

Révisions de sup

Question 1 Préciser les couples acides bases associés aux deux pK a de la glycine. Explicite les formules molécu-
laires associées aux notations AH+2 , AH± et A – . Établir le diagramme de prédominance de la glycine. Comment
qualifie-t-on la forme AH± qui porte à la fois une charge positive et une charge négative ?

Question 2 Démontrer que le pH d’une solution de glycine 5.10−2 mol · L−1 est donné par la relation :

pK a1 + pK a2
pH =
2
Que vaut sa valeur ici ?

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Titrage direct de la glycine par la soude

On donne ci-dessous la simulation de la courbe de titrage d’une solution de 20 mL de glycine à 5.10−2 mol · L−1
par de la soude à 0, 1 mol · L−1 .

14

12

10

8
pH

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
V /mL

Question 3 Commenter puis expliquer l’allure de la courbe. On se concentrera sur les zones remarquables et on
écrira les réactions nécessaires pour illustrer le propos. Pourquoi cette méthode de titrage de la glycine est peu
adaptée ?

Titrage direct de la glycine par l’acide chlorhydrique

On considère le titrage d’une solution de 20 mL de glycine à 5.10−2 mol · L−1 par de l’acide chlorhydrique à 0, 1 mol · L−1 .

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Question 4 Donner la relation de titrage et calculer sa constante. Estimer les valeurs du pH à la demi-
équivalence, à l’équivalence puis quand le volume de réactif titrant tend vers l’infini. En déduire la pertinence de
cette méthode de titrage.

Titrage indirect de la glycine par la soude

La méthode retenue consiste à ajouter à un échantillon de glycine à doser un excès d’acide chlorhydrique puis à
doser la solution obtenue par de la soude.

Question 5 Écrire la/les réaction(s) de titrage et déterminer en combien de phases le titrage peut a priori être
séparé.

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N OTES PERSONNELLES

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M ODE OPÉRATOIRE
Rédiger les réponses aux questions sur une copie par binôme.

Étalonnage d’une solution d’hydroxyde de sodium

En vue de titrer la glycine, déterminer précisément la concentration (c ≈ 0, 1 mol · L−1 ) de la soude qui servira au
titrage. On dispose d’une solution d’acide chlorhydrique à c 0 = 0, 100 ± 0, 001 mol · L−1 .

Question 6 Expliquer la méthode choisie et préciser les éventuels calculs permettant de déterminer c. On préciser
l’incertitude-type à l’aide du logiciel GUM.

Titrage conductimétrique et pHmétrique de la glycine dans la poudre « Glycine 100 % »

Fabriquer une solution de 375 mg de poudre « Glycine 100 % » dans 100 mL d’acide chlorhydrique à c a = 0, 1 mol · L−1 .
Titrer 20 mL de cette solution par de la soude à la concentration c en suivant le titrage par pHmétrie et conducti-
métrie. Agrapher les graphes (tracés sur Régressi) au compte rendu.

Question 7 Interpréter qualitativement l’allure des courbes.

Question 8 Déterminer le(s) volume(s) équivalent(s) en précisant clairement la méthode utilisée.

Question 9 En déduire le taux de glycine contenue dans votre échantillon de « Glycine 100 % » en précisant
l’incertitude-type, toujours avec GUM_MC. Comparer avec l’étiquette.

Question 10 Peut-on retrouver graphiquement les deux pK a de la glycine ?

VAISSELLE ET ÉLIMINATION DES DÉCHETS

• Toutes les solutions sont jetées à l’évier.

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B ILAN DE COMPÉTENCE
À réaliser éventuellement en auto-évaluation.

S’approprier +++ ++ + -
Rechercher, extraire et organiser l’information en lien avec une situation expérimentale
Analyser +++ ++ + -
Choisir, concevoir ou justifier un protocole ou un dispositif expérimental
Réaliser +++ ++ + -
Mettre en œuvre un protocole
Mettre en œuvre des règles de sécurité adéquates
Utiliser (avec la notice) le matériel de manière adaptée
Effectuer des représentations graphiques à partir de données expérimentales)
Valider +++ ++ + -
Analyser les résultats de manière critique
Exploiter des mesures en estimant les incertitudes
Proposer des améliorations de la démarche
Communiquer +++ ++ + -
Utiliser un vocabulaire scientifique adapté
S’appuyer sur des schémas, des graphes adaptés
Présenter les étapes de son travail de manière synthétique, organisée, cohérente et compréhen-
sible
Être autonome, faire preuve d’initiative +++ ++ + -
Solliciter une aide de manière pertinente
Travailler seul ou en équipe
S’impliquer, prendre des décisions, anticiper

F ICHES DE SÉCURITÉ

Bleu de bromothymol
Pictogramme :

Mention d’avertissement :

Mention de danger :
Aucune

Conseils de prudence :
P280
P303 + P361 + P353
P305 + P351 + P338 + P310
Porter des gants de protection/ des vêtements de protection/un équipement de protec-
tion des yeux/du visage.
EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU (ou les cheveux) : Enlever immédiatement tous
les vêtements contaminés. Rincer la peau à l’eau/Se doucher.
EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX : rincer avec précaution à l’eau pendant plu-
sieurs minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent
être facilement enlevées. Continuer à rincer. Appeler immédiatement un CENTRE AN-
TIPOISON/un médecin.

Information supplémentaire sur les dangers (UE) :

Aucune

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