CULTURE HAPLOÏDE

TP BIOTECHNOLOGIE VÉGÉTALE
LCHB3 G1
GARDENING AND PLANTING
PRESENTATION DESIGN

Ben Romdhane Ameni

Ben slimane Renim
Ben salem Mouna
Hamami Maram
 SOMMAIRE
1. Introduction
2. Definition et Principe de culture haploïde
3. Traitement à la colchicine
4. Les etapes de culture haploïde
5. Technique d’obtension des haploïdes
6. Avantages et Limites

7. Les application de culture haploïde

8. Conclusion
 INTRODUCTION

La culture haploïde est une technique importante en

biotechnologie végétale qui permet de produire des plantes
haploïdes CAD des plantes ayant une seule copie de chaque
chromosome plutôt que deux.

Cela permet aux chercheurs d’étudier les effets de la perte ou du

gain du gène spécifique sur les caractéristiques de la plante, ainsi
que produire des lignées pures plus rapidement que par la
méthode traditionnelle de croisement.
 01- DÉFINITION ET
PRINCIPE DE CULTURE
HAPLOÏDES
La culture haploïde est une technique de
biotechnologie végétale qui permet de
produire des plantes haploïdes (n) à partir
des organes mâles ou femelles puis sur le
doublement du stock chromosomique.
Cette technique est utilisée pour accélérer
la sélection de lignées de plantes
améliorées pour des caractéristiques
spécifiques;
Telle que la résistance aux maladies ou la
tolérance aux conditions
environnementales
difficiles.
02-Traitement à la
Le doublement est réalisé assez facilement en utilisant une
substance comme la colchicine .
La colchicine bloque la mitose en début de métaphase
empêchant la séparation des chromosomes fils .
La cellule conserve donc son génome doublé (n plus
n =2 n).
Ainsi les cellules deviennent diploïdes. Pour l’éviter,
actuellement se développent des traitements in vitro au stade
embryonnaire an d’obtenir des individus
structure chimique de colchicine
dont toutes les cellules sont haploïdes doublées.
03 LES ETAPES DE CULTURE
HAPLOÏDE
 Elle se réalise en deux étapes principales qui sont ;

Etape 1 :
Le prélèvement des organes reproducteurs ( gamètes mâles ou femelles);
haploïdes après méiose, qui sont ensuite placés en culture in vitro afin de
permettre une réorientation des cellules vers des potentialités embryogenèse .

Etape 2 :
Le doublement du stock chromosomique en vue d’aboutir à une lignée
homozygote ( dont tous les gamètes porteront les mêmes gènes)
Les plantes haploïdes ( possédant un seul jeu de chromosomes) peuvent
être obtenu par technique ; L’androgenèse et la gynogenèse .
04 TECHNIQUE D’OBTENTION DES
HAPLOÏDES
 1- Androgenèse
L'androgenèse peut être réalisée in vitro ou in vivo.
L'androgenèse in vitro est la méthode la plus couramment utilisée, car elle est plus efficace et plus reproductible.
1.1 in vitro

cette méthode est réalisée à partir de culture des cellules

sexuelles mâles : les anthères ou les grains de pollen isolés

les microspores sont prélevées des anthères des fleurs et cultivées in

vitro dans des conditions spécifiques qui favorisent la formation
d'embryons haploïdes. Les embryons haploïdes sont ensuite
transférés dans des pots de culture où ils se développent en plantes
matures.
 Les étapes de l'androgenèse
1. Collecte des
microspores : Les
microspores sont
collectées des fleurs
fraîches
4 Développement des
embryons : ce qui lui
permet de se développent
en embryons haploïdes.
2-Isolation des
microspores : Les
3-Culture des
microspores sont
microspores:
isolées des autres
Les microspores
cellules de la fleur.
sont cultivées dans
un milieu artificiel
contenant des
hormones végétales, 5- Germination des
des nutriments et des embryons : Les embryons
oligo-éléments germent et donnent
naissance à des plantes
haploïdes
 Les avantages

• Elle permet de produire des plantes

homozygotes,transgéniques.
• Elle permet d'étudier le développement des plantes au
niveau cellulaire et moléculaire.

Les limites

• Le taux de réussite est généralement faible.

• La technique est complexe et nécessite une expertise

technique.
 1.2- in vivo

L'androgenèse in vivo peut être réalisée en soumettant les plantes à des traitements chimiques ou physiques qui perturbent le développement normal
des cellules sexuelles. Ces traitements peuvent entraîner la production de plantes haploïdes, mais ils sont moins efficaces et plus difficiles à
contrôler que l'androgenèse in vitro.

L'androgenèse a été utilisée avec succès pour produire des plantes haploïdes de nombreuses espèces végétales, notamment des céréales, des
légumes, des fruits et des plantes ornementales. Elle est une technique prometteuse pour l'amélioration des plantes, car elle permet de produire des
plantes plus productives, résistantes et faciles à manipuler génétiquement.
 02- Gynogenèse in vitro
La gynogenèse in vitro des plantes fait référence à une technique de reproduction végétale qui vise à produire des plantes
haploïdes (contenant un seul ensemble de chromosomes) à partir d'ovules sans la fécondation par des gamètes mâles (pollen).
Cette méthode implique des manipulations en laboratoire pour induire le développement des ovules sans la fusion avec du
pollen, et elle est souvent utilisée à des fins de recherche en génétique, en sélection végétale, et en amélioration des plantes
 les étapes générales du processus de gynogenèse in vitro des
plantes:

1-Collecte des ovules : 2-Traitement des ovules : 3-Culture in vitro : 4-Induction de la division 5-Développement des plantules
cellulaire : haploïdes :
Les ovules sont traités Les ovules traités
avec des agents sont placés dans un Des stimulants ou des Les embryons haploïdes
Des ovules hormones sont parfois se développent en
chimiques ou milieu de culture
immatures sont ajoutés pour induire la plantules haploïdes.
physiques pour induire spécifique
récoltés à partir des division cellulaire,
le développement sans contenant des
ovaires de la plante conduisant à la formation
fécondation. Ces nutriments et des
traitements peuvent hormones d'embryons haploïdes.

bloquer la méiose ou nécessaires à leur

induire la formation croissance et à leur
d'embryons haploïdes. développement.
 L'identification des gènes et des protéines impliqués dans le processus de gynogenèse in vitro pour les
plantes peut être spécifique à chaque espèce végétale. Cependant, voici quelques catégories générales de
gènes et de protéines qui ont été associées à la gynogenèse in vitro chez certaines plantes
• Gènes de Signalisation :
Des gènes impliqués dans les voies de signalisation qui déclenchent l'activation de l'ovule in vitro.
• Gènes de la Différenciation Cellulaire :
Des gènes qui participent à la différenciation cellulaire pendant le développement embryonnaire, déterminant les types
cellulaires spécifiques.

• Gènes du Système Immunitaire Végétal :

Des gènes qui peuvent être activés pendant la gynogenèse in vitro pour répondre aux stress et aux changements
associés
• Gènesaude
processus.
la Division Cellulaire :
Des gènes régulant la division cellulaire, y compris ceux qui contrôlent le cycle cellulaire et la formation du fuseau
mitotique.
 Avantages Inconvénients

• Conservation des • Manque de diversité

caractéristiques génétiques. génétique.
• Rapidité de reproduction. • Vulnérabilité aux maladies.
• Stabilité génétique. • Moins d'adaptabilité
environnementale
Avantages Limites
• Production de lignées • La culture haploïde peut être difficile à
homozygotes plus rapide réaliser pour certaines espèces
et plus efficace. végétales.

• Création de nouvelles • Les plantes haploïdes peuvent

variétés de plantes plus présenter une instabilité génétique et
rapidement et avec une une faible vigueur.
plus grande précision.
• Les coûts initiaux de mise en place
• Réduction des coûts de d'un programme de culture haploïde
production de semences. peuvent être élevés.
 Application de la culture haploïde
Obtention de lignées pures
La culture haploïde permet d'obtenir
des plantes haploïdes qui peuvent être
utilisées pour produire des lignées
pures plus rapidement et efficacement
que les méthodes traditionnelles de
croisement.
Amélioration de la qualité
des cultures
La culture haploïde peut être utilisée
pour améliorer la qualité des cultures en
sélectionnant des plantes haploïdes avec
des caractéristiques souhaitables telles
que la résistance aux maladies, la teneur
en nutriments ou la qualité du produit
Création de variétés
résistantes aux maladies
En utilisant la culture haploïde, il est
possible de créer des variétés de
plantes résistantes aux maladies en
introduisant des gènes de résistance
dans les cellules haploïdes avant de
les développer en plantes matures.
Production de plantes hybrides
La culture haploïde peut également
être utilisée pour produire des
plantes hybrides en combinant des
cellules haploïdes de différentes
variétés de plantes avant de les
développer en plantes matures.
 CONCLUSION

En conclusion, nous avons vu que la culture haploïde est une technique importante en biotechnologie végétale. Elle permet d'obtenir des
plantes haploïdes qui peuvent être utilisées pour la création de variétés nouvelles et améliorées. Cette technique accélère le
développement de nouvelles variétés de plantes, améliore l'efficacité en agriculture, et facilite la recherche génétique en simplifiant
l'étude des gènes.
Merci