Le principe de l'haplodiplodisation

Principe de l'haplodiplodisation
Obtenir des plantes haplodes partir de cellules reproductrices

Principe de l'haplodiplodisation
Le processus d'haplodiplodisation comprend l'obtention de plantes haplodes partir des organes porteurs des cellules
reproductrices, appels gamtophyte mle ou femelle, et le retour vers la phase diplode.

Production de plantes mres

Le slectionneur effectue un croisement entre deux lignes parentales prsentant des caractristiques intressantes et
complmentaires. Ce croisement produira la gnration F1. Ce sont les plantes mres pour l'obtention de la phase haplode.
A ce stade, toutes les plantes sont identiques. En revanche, sur ces plantes, la miose l'origine de la formation des
gamtes permet la sgrgation des caractres, selon
les lois de Mendel et les recombinaisons entre les chromosomes parentaux. Les individus F2 seront alors tous diffrents les
uns des autres, c'est la disjonction des caractres. Pour faciliter le travail de slection, l'haplodiplodisation va permettre
d'obtenir des plantes homozygotes.

Obtention de la phase haplode

Il s'agit de rcuprer les cellules ayant subi la miose avant la fcondation. C'est l que commence le travail de laboratoire.
L'obtention des plantes haplodes peut se faire par culture in vitro de cellules destines fournir les cellules reproductrices

ou gamtes.
S'il s'agit de gamtes mles, on parle d'androgense. S'il s'agit de gamtes femelles, c'est la gynogense.
Une autre mthode d'obtention d'haplodes est l'induction d'haplodes in situ. On peut obtenir des haplodes aprs
croisements entre espces ou entre genres. Il y a fcondation, mais les chromosomes incompatibles du parent pollinisateur
sont rejets naturellement.
On peut galement provoquer une fcondation anormale l'aide de pollen dnatur. Dans ces trois cas, on observe le
dveloppement d'un embryon haplode. Une phase de sauvetage d'embryons in vitro est ensuite gnralement ncessaire.
Mis en culture sur des milieux particuliers, l'embryon haplode va se dvelopper, les tissus vont se diffrencier pour donner
des plantes haplodes.

Retour l'tat fertile diplode

Pour utiliser en slection une plante rgnre par l'une de ces voies,
il faut disposer de plantes fertiles et donc diplodes.
L'tat haplode tant instable, l'individu rgnr est parfois diplode, on parle de doublement spontan du stock
chromosomique. Pour le bl, on peut compter 20 25 % d'haplodes doubls spontanment,
60 65 % chez l'orge. Sinon, on provoque artificiellement un doublement des chromosomes, le plus couramment par
l'action d'un agent chimique, la colchicine.
Les plantes obtenues sont des diplodes homozygotes : elles possdent deux copies identiques de chacun de leurs
chromosomes
et donc portent des paires de gnes ou allles identiques, d'o leur grand intrt.

Slection des lignes

Le matriel ainsi fix est livr au slectionneur. Le slectionneur va alors trier les plantes en fonction des critres
agronomiques et technologiques recherchs.
La multiplication de ces plantes se fera par autofcondation : tous les descendants seront des copies identiques de leurs
parents.

Traitement la colchicine
La colchicine bloque la mitose aprs la duplication des chromosomes et les cellules deviennent diplodes.
Le traitement la colchicine peut se raliser au stade plantule par trempage des racines ou injection dans les mristmes.
Les taux de doublement sont alors trs variables.
Actuellement, se dveloppent des traitements in vitro au stade embryonnaire.

Dterminisme du niveau de plodie

Une vrification de la plodie des plantes rgnres peut tre effectue prcocement par cytomtrie de flux.
Une substance fluorescente se liant l'ADN permet la coloration des cellules.
La mesure de la densit de cette coloration permet de dterminer le niveau de plodie. Sinon, la constatation de la fertilit
de la plante garantit qu'elle est effectivement diplode.