Cours développement embryonnaire L3 physiologie

La fécondation

I. Définition
La fécondation est l’union d’un gamète mâle (spermatozoïde, haploïde) et gamète femelle (ovocyte II
bloqué en Métaphase II, haploïde). Le résultat de cette union est un œuf ou zygote (diploïde). La
formation du zygote marque le début du développement embryonnaire d’un nouvel individu. La
maturation des gamètes est un préalable indispensable à la fécondation. La maturation des ovocytes
se fait au cours de l'ovogenèse alors que la maturation des spermatozoïdes commence au niveau de
l'épididyme et se termine dans les voies génitales femelles. La fécondation se déroule dans les voies
génitales féminines, dans la portion ampullaire de la trompe utérine.

II. Principaux évènements précédant la fécondation

II.1. Insémination et transit des spermatozoïdes dans les voies génitales femelles
L’insémination est le dépôt des spermatozoïdes et du liquide séminal dans le vagin lors d’un rapport
sexuel. Le sperme d’un homme fertile a un volume moyen de 3,5 ml et contient au moins 20 millions
de spermatozoïdes / ml. Sur les dizaines de millions de spermatozoïdes déposés dans le vagin, seuls
quelques centaines de milliers s’engagent dans le canal cervical (Figure 1). Les autres meurent
rapidement à cause du pH acide du vagin défavorable pour leur survie.

Dans le canal cervical les spermatozoïdes doivent traverser la première barrière physiologique située
au niveau du col utérin appelée la glaire cervicale. A ce niveau le liquide séminal ne franchit pas cette
barrière et sera éliminé à l'extérieure. La glaire cervicale est un hydrogel produit par les glandes
endocervicales , dont les caractéristiques physico-chimiques et morphologiques ( pH, consistance en
eau et structure) sont contrôlées par les hormones ovariennes et donc en concordance avec la période
du cycle ovarien. Au moment de l'ovulation, la glaire cervicale présente un pH alcalin et devient plus
fluide et lâche. La plupart des spermatozoïdes restent emprisonnés dans la glaire car seuls quelques
milliers de spermatozoïdes bien mobiles, de structure normale traversent cette barrière et arrivent dans
la cavité utérine au bout de quelques dizaines de minutes.

A partir de l’utérus, les spermatozoïdes remontent rapidement jusqu’au tiers externe de la trompe de
Fallope, où se déroule la fécondation (Figure1). Ce transit rapide est assuré grâce à la mobilité des
spermatozoïdes, aux contractions musculaires de l’utérus et aux battements ciliaires de l'épithélium de
la trompe . Seuls 300 à 500 spermatozoïdes atteignent le site de la fécondation ; les autres meurent.

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Figure 1: A-Insémination et migration des spermatozoïdes dans les voies génitales femelles.
B-Migration des spermatozoïdes à travers la glaire cervicale.

II.2. Modification cellulaires et moléculaires du spermatozoïdes: Capacitation

La capacitation correspond aux modifications cellulaires et moléculaires subies par les spermatozoïdes
dans les voies genitales femelles (Figure 2). Elle débute en premier temps au niveau de la glaire
cervicale et se poursuit dans les voies génitales femelles. Elle permet aux spermatozoïdes d’acquérir
le pouvoir fécondant.
La capacitation est caractérisée par :
-L'enlèvement des protéines de revêtement qui sont de protéines extrinsèques, non lié à la
membrane plasmique par des liaison covalente provenant de l'épididyme. Parmi les protéines
provenant des voies génitales femelles intervenant dans la capacitation, les Glycosamino-glycanes
(GAG) qui sont des polysaccharides type héparine et l'Albumine.
-La Redistribution de certaines protéines membranaires intrinsèques.
-L'enlèvement d'une partie cholestérol de la membrane plasmique par des éléments provenant des
voies génitales femelles, tel que l'Albumine et des Lipoproteine type HDL et LDL.
Ces changements membranaires déstabilisent la membrane plasmique du spermatozoïde et rendent
apparents les récepteurs spermatiques (démasquage des récepteurs) nécessaires à la fécondation.
Ces changements membranaires augmentent la fluidité membranaire conduisant à l'ouverture des
canaux ioniques membranaire tel que les canaux calciques. Ainsi l'entrée du calcium dans le
cytoplasme du spermatozoïde entraine à un changement de sa mobilité. En effet, au cours de la
capacitation, le déplacement des spermatozoïdes se transforme en un mouvement non linéaire,

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caractérisé par un battement flagellaire de forme asymétrique et de forte amplitude. Cette mobilité
hyperactivée , contribue à la traversée des couches périovocytaires.

Figure 2 : Changements membranaires au cours de capacitation. A. enlèvement des protéines de

surfaces. B. enlèvement du cholestérol intercalé entre les phospholipides.

III. PHENOMENES CYTOLOGIQUES DE LA FECONDATION

III.1. Traversée de la corona radiata et fixation sur la zone pellucide

Les quelques centaines de spermatozoïdes capacités qui arrivent au niveau du tiers externe de la
trompe de Fallope (Ampoule: lieu de fécondation), entrent en contact avec l'ovocyte II (bloqué au
stade métaphase, n chromosome) issu de l’ovulation est entouré par la zone pellucide et les cellules
folliculeuses de la corona radiata. Les espaces intercellulaires de la de la corona radiata contiennent
une matrice extracellulaire riche en acide hyaluronique.
Les spermatozoïdes capacités entreront tout d'abord en contact 1- les cellules de la corona radiata qui
sont détachées grâce à une enzyme, l’hyaluronidase associée à la membrane externe des
spermatozoïdes (hydrolysé la matrice extracellulaire). 2- puis avec les glycoprotéines de la zone
pellucide.
La zone pellucide est composé de 3 glycoprotéines ZP1, ZP2 et ZP3. La ZP2 et la ZP3 s’associent
pour former des filaments réunis par des ponts de ZP1 (Figure 3).

Figure 3: Structure de la zone pellucide

III.2. Réaction acrosomique et traversée de la zone pellucide

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Les interactions spermatozoïdes zone pellucide sont de type ligand-récepteur. Les glycoprotéines de
la zone pellucide (ZP1, ZP2, ZP3) interagissent spécifiquement avec les récepteurs des spermatozoïdes
de type protéique. Un certain nombre de récepteurs a été mis en évidence sur la membrane du
spermatozoïde; la β-galactosyltransférase (GalT) (chez la souris) et l’α-D-mannosidase (chez la souris
et l'homme).

La ZP3 assure la fixation primaire du spermatozoïde dont l’acrosome est encore intact : La fixation
primaire de la ZP3 avec les récepteurs (de nature protéiques) de la membrane spermatique,
déclenche la libération des enzymes contenues dans l'acrosome. C'est la réaction acrosomique (RA)
(Figure 4.A). La conséquence immédiate de la RA est la libération du contenu de l'acrosome constitué
essentiellement par des enzymes protéolytiques et hydrolityques qui vont faciliter la pénétration des
spermatozoïdes à travers la ZP, tel que:
- L'acrosine détruirait la ZP1 et libère les filaments ZP2-ZP3, diminuant ainsi la résistance de la zone
pellucide.
-La β-N-acétylglucosaminidase permet la rupture des liaisons entre ZP3 et le spermatozoïde pour
franchir la zone pellucide .
- La hyaluronidase détruit l'acide hyaluronique compris entre les mailles de la zone pellucide.
La RA conduit également à l'extériorisation de la membrane interne de l'acrosome (membrane
acromiale interne) qui sera désormais apparente présentant des récepteurs spécifiques. Ainsi, la ZP2
assurera une liaison secondaire et spécifique d'espèce qui s'effectue entre la ZP2 et les récepteurs
(de nature protéiques) de la membrane interne de l'acrosome (Figure 4.B). La traversée de la zone
pellucide se fait grâce aux mouvements actifs de propulsion (mouvement hyperactivé). Chez la souris
quelques protéines de surface jouant un rôle important dans la fixation secondaire ont été identifiés tel
que la PH-20 ou (SPAM-1), elle fait partie des molécules d'adhésion.

Figure 4: Réaction acrosomique. A. fixation primaire. B. fixation secondaire.

III.3. Activation de l’ovocyte

Parmi les spermatozoïdes fixés, un seul traverse la ZP (de façon oblique) et parvient à l'espace
périvitellin (sépare la zone pellucide de la membrane de l'ovocyte II) et entre en contact avec la

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membrane plasmique de l’ovocyte. Les deux membranes fusionnent (fusion latérale du

spermatozoïde) progressivement jusqu’à incorporation totale du spermatozoïdes dans l’ovocyte II.
Cette fusion membranaires met en jeu des protéines fusiogène appartenant à la famille ADAM (A
Disintegrin And Metalloprotease) situés sur la partie postérieur du spermatozoïde c'est la cas de la
protéine PH-30 ou Fertiline identifié chez le cobaye, qui est un hétérodimère (sous unité ᾳ-ß), elle
intervient dans la fixation du spermatozoïde avec la membrane ovocytaire via l'intégrine, également un
hétérodimère (ᾳ-ß), situé sur la surface de l'ovocyte II, chez la souris existe la Cyritestine (famille
ADAM) rôle identique à la Fertiline (Figure 5).

Le début de la fusion provoque une décharge de Ca++ à partir du réticulum endoplasmique lisse
(REL) de l’ovocyte et induit son activation qui se manifeste par deux événements :

* la réaction corticale, c’est à dire la libération par exocytose du contenu des granules corticaux
présents sous la membrane plasmique de l'ovocyte II . Les enzymes hydrolytiques libérées provoquent
l’hydrolyse partielle de ZP2 et le durcissement de la ZP la rendant infranchissable par d’autres
spermatozoïdes, empêchant ainsi la polyspermie (Les enzymes contenues dans les granules corticaux,
libérées rendent impénétrable) (Figure 5). Cette zonne pellucide est désormée nommée membrane de
fécondation.

* la reprise de la méiose qui s’achève par la production du deuxième globule polaire dans l’espace
périvitellin et d’un pronucléus ou pronoyau femelle haploïde et à chromatine condensée.

Figure 5: Fusion membranaire et reaction corticale

III.4. Incorporation et transformation du spermatozoïde

Parallèlement à la reprise de la méiose, le flagelle du spermatozoïde se détache de la tête puis dégénère

et le noyau subit un certain nombre de modifications. Il perd immédiatement son enveloppe nucléaire,
la chromatine se décondense progressivement. Il se forme alors un pronucléus mâle qui s’entoure
d’une nouvelle membrane nucléaire. Les deux pronucléus se distinguent par un état de condensation

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plus poussé de la chromatine femelle. Au fur et à mesure de leur formation, les deux pronucléus,
initialement périphériques, se rapprochent l’un de l’autre et de la région centrale du zygote.

III.5. Amphimixie et première division de segmentation

Immédiatement après l’entrée du spermatozoïde et la formation des deux pronucléï, le zygote entre en
prophase, au cours de laquelle s’individualisent les chromosomes. Un fuseau mitotique se met en
place. Les enveloppes nucléaires disparaissent et les chromosomes viennent se placer autour de la
plaque équatoriale métaphasique. La première division de segmentation marque le début du
développement embryonnaire.