République Algérienne Démocratique et

Populaire
Ministère d’Enseignement Supérieur et de la
Recherche Scientifique
Université Mohamed El Bachir El Ibrahim de
Bordj Bou Arréridj

TP:
1-Les différents procédés de réalisation
2-Examen microscopique ‘ état frais ’
3-Coloration de gram

Préparée par :
 Saoula Amira
 Hansali Dounia
 Aissat roukaya

2022/2023
TP n01 : Les différents procédés de réalisation
Définition de Micro-organismes : est la science qui étude des
Micro-organismes ‘ organisme invisible à l’œil nu et qui doivent
être examiné au microscope ’
Le but : Etude les méthodes de stérilisation
Les méthodes de stérilisation physique

Radiation Lafiltration Chaleur

Non contrôle contrôle

Flambage a- Humide
‘Bac Bunsen’ -Ebullition
- Autoclave
-Tyndallisation
-Pas tentation
b-Sèche
-Four pasteur
 Les méthodes chimiques

Les Antiseptiques Lesdésinfecteurs

-Ils–tuent Micro-organisme -Ils empêchent les
contaminations
Produits libérant (O2) Humains et Animales
ou du chlore (cl)

TP n02 : Examen Microscopique ‘état frais’

But : Il permet l’étude microscopique des Bactéries vivantes, en
l’absence de toute fixation on coloration.
Dans cette méthode observée :
-La morphologie des Bactéries
-Le mode de Groupement
-La mobilité
-La densité proportion de chaque micro-organisme
Technique : une suspension bactérienne entre lame et lamelle
est observée à l’objectif*40, à sec, avec contraste de phase
1- Allumer le microscope et fermer un peu de diagramme
2- Avec lavis micrométrique éloigner la platine
3- Placer l’état frais sur la platine et la fixer avec les valets
4- Tourner le revoler pour enclencher l’objectif*40
5- Avec lavis macroscopétrique amener l’objectif tiré près de
la lamelle
6- Regarder à travers les oculaires et avec la vie
micrométrique et éloignes très doucement la platine
7- Parfaire la mise au point avec lavis micrométrique et
observer plusieurs champs en déplaçant la platine
Observation :
Les caractéristiques des grams+ et grams-
Gram positive +
-Membrane plastique interne
-Paroi cellulaire épaisse
-Capsule externe
-Traitement anti biologique plus
facile
-Coloration de gram = violet
Gram négative -
- Membrane plastique interne
- Paroi cellulaire fine
- Membrane externe
- Capsule externe
- Coloration de gram = rose

TP n03 : Coloration de Gram

fraction Gram positive Gram négative
constituant
*Paroi homogène *Paroi retro gène
-Une couche épaisse -Couche de
de peptidoglycane peptidoglycane 2-7
de 20-80 nm nm
-Membrane externe
de 7-80 nm
Os amine + + + +
Acides Amines 25 à 35% 50%
Acide Téichoïque + + + -
Oses 20 à 60% 20 à 60%
Lipides 1 à 2.5% 10 à 22%