Groupe C2-3 Jeudi 02 Février 2023

MASTER II ENSEIGNEMEENT
SVT
PEDAGOGIE PRATIQUE DE
BIOLOGIE ANIMALE

THEME 3 : IDENTIFICATION DE L’AGENT PATHOGENE DU

PALUDISME SUR LAME MINCE ET GOUTTE EPAISSE
LEҪON 9 : LE PALUDISME

NIVEAU : 6ième
DUREE DE LA PRESENTATION : 1 heure
ANNEE ACADEMIQUE : 2022/2023

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 PLAN

Introduction
I- Préparation de la lame mince
II- Préparation de la goutte épaisse
III- Coloration de la lame mince et goutte épaisse
Conclusion

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Compétence : S’informer : Saisir des informations à partir de
l’observation de matériel biologique ou d’une photo
Activité : Identification de l’agent pathogène du paludisme sur lame
mince et goutte épaisse
Introduction
Le paludisme est une maladie transmise par un moustique femelle du nom
d’Anophèle qui est le porteur de l’agent pathogène responsable du paludisme
appelé Plasmodium falciparum. Pour identifier cet agent pathogène, nous
allons passer à la préparation et à la coloration de la lame mince et de la goutte
épaisse.
I- Préparation de la lame mince
Pour réaliser cette préparation, je dois suivre les étapes suivantes :

Etape 1 : Je dépose une goutte de sang sur la

lame de verre ;

Etape 2 : J’applique ensuite une autre lame

(étaleur), inclinée à 45°, en avant de la goutte de
sang sans la toucher ;
Etape 3 : J’approche la lame (étaleur) au contact
de la goutte de sang de façon que le sang s’étale
sous la lame (étaleur) en gardant le même angle
de 45° ;
Etape 4 : Je pousse, sans soulever et sans trop
appuyer, rapidement la lame (étaleur) en avant
tout en gardant le même angle de 45° ;
Etape 5 : Je soulève la lame (étaleur) et je sèche
la lame mince (frottis) à l’air libre.

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II- Préparation de la goutte épaisse
Pour mettre en pratique cette préparation, je dois suivre les étapes suivantes :
Etape 1 : Je dépose une goutte de sang (2 fois le
volume utilisé pour un frottis) sur la lame ;

Etape 2 : J’étale la goutte de sang sur la surface

de la lame en effectuant des tours de rotation
de 6 à 9 mouvements avec le coin d’une autre
lame ;

Etape 3 : Je cesse l’opération de la rotation et je

laisse sécher la goutte épaisse à l’air libre.

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III- Coloration de la lame mince (frottis) et de la goutte épaisse
Pour colorer la lame mince (frottis) et la goutte épaisse, j’applique les étapes
suivantes :
Etape 1 : Je plonge la lame mince dans l’alcool pendant 5 secondes ;
Etape 2 : Je plonge dans l’eau la goutte épaisse pendant 2 secondes ;
Etape 3 : Je sèche la lame mince et la goutte épaisse à l’air libre ;
Etape 4 : Je plonge la lame mince et la goutte épaisse, après séchage, dans la
solution de Giemsa pendant 15 à 20 minutes ;
Etape 5 : Je retire les lames de la préparation dans la solution de Giemsa en
utilisant une pince ;
Etape 6 : Je replonge les lames de la préparation dans l’eau pour le rinçage ;
Etape 7 : Je rince les lames pendant 30 secondes puis je les sèche à l’air libre.

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 1 1

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Grossissement : 10×100 Grossissement : 10×100

Document : lecture microscopique d’une lame mince et goutte épaisse
Légendes
Lame mince : Goutte épaisse :
1- Plasma 1- Plasma
2- Hématie parasitée 2- Globules blancs
3- Plasmodiums 3- Plasmodiums
4- Hématie saine
Conclusion :
En définitive, l’identification de l’agent pathogène du paludisme se fait dans un
laboratoire avec la méthode de référence qui reste encore l’examen
microscopique d’une lame mince et goutte épaisse coloré avec le Giemsa.
Consignes :
1- Passe à l’observation microscopique des deux préparations.
2- A partir de l’observation microscopique ou du document, compare les deux
préparations.
3- Déduis l’objectif principal des deux préparations.
4- Dis le rôle du colorant de Giemsa.
5- Fais un résumé à partir des réponses données.
Modalité de travail : binôme
Durée de travail : 10 mn
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Résumé :
L’observation microscopique de la lame mince et de la goutte épaisse montrent
deux lectures différentes. En effet, la lame mince permet d’identifier les
plasmodiums à l’intérieur des hématies et la goutte épaisse permet de mettre
en évidence les Plasmodiums, hors des hématies, circulants et concentrés dans
le sang.
L’objectif de la préparation de la lame mince et de la goutte épaisse est
d’identifier l’agent pathogène du paludisme qui est le Plasmodium falciparum.
La coloration de Giemsa a pour rôle de différencier les composantes du sang et
en particulier les Plasmodiums.