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Ministère de la recherche et de l’enseignement supérieur.

Université Abderrahmane Mira de Bejaia.
Faculté des sciences de la nature et de la vie.
Département de microbiologie.
Master II biotechnologie microbienne .

Mémoire de Fin de Cycle

En vue de l'obtention du diplôme
Master

Etude de quelques activités biologiques de

souches d’actinobactéries
Présenté par: Encadrée par:
Bouzid Kahina Souagui. S

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 Introduction

Matériel et méthodes

Résultats et discussion

Conclusion et perspectives
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Introduction
 Synthétique

Industrie semi-synthétique

Naturelle
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 Généralités sur les actinobatéries

 Bacteries a Gram positif avec un GC% élevé.

 Peuvent présenter diverses morphologies

(filamenteuse, bacilles, cocci,,,)

 Souvent telluriques.

 Synthétisent les métabolites bioactifs.

Le genre Streptomyces est une composante prédominante de la population

microbienne dans les sols et est connu pour être commercialement et
thérapeutiquement, une source majeure de métabolites secondaires importants
appliqués dans différents domaines.
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Applications biotechnologique des actinobatéries

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OBJECTIFS DU TRAVAIL

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Materiéls et Méthodes

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 Matériels

Souches Millieux de cultures

d’actinobactéries

Tween 80.
NA44. Gélose au lait ecrémé .
SC20. Gélose à la gélatine .
ND101. Gélose au jaune d’œuf.
Gélose à la tyrosine.
CMC.
Gélose de Gausse.
Urée indole.
Isolées à partir de sol de la Bouillon nitraté.
région de Béjaia

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 Méthodologies

Sur milieu solide

Étude des l’activités

enzymatiques
sur milieu liquide

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milieu solide
Tween 80

CMC

Gélose à la gélatine

Ensemencement
Gélose au lait crémé

Gélose au jeune d’œuf

Souches d’actinobactéries
Gélose de Gausse

Gélose à la Tyrosine
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 Tube 1 Tube 2 Tube 3
Milieu liquide

Bouillon Nitraté
Ensemencemen
t Tube 1 Tube 2 Tube 3

Souches d’actinobactéries

Urée Indole 13
RÉSULTATS ET
DISCUSSIONs

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Résultats de l’étude des l’activités enzymatiques Résultats

1. Sur milieu liquide

Tableau I: Activités enzymatiques des trois souches d’actinobactéries sur milieu
liquide

Substrat Les souches d’actinobactéries

dégradé
NA44 ND101 SC20

Urée + + +

Nitrate + + +

+: Présence de l’enzyme 15
Résultats de l’étude des l’activités enzymatiques

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 Résultats de l’étude des l’activités enzymatiques
Résultats
2. Sur milieu solide
Tableau II :Activités enzymatiques des trois souches d’actinobactéries sur milieu solide
Les souches d’actinobactéries
Substrat dégradé

NA44 ND101 SC20

Amidon Halo clair Halo clair Halo clair

Caséine
Halo clair Halo clair Halo clair
Cellulose Halo jaunâtre
Halo jaunâtre Halo jaunâtre
Gélatine
halo clair Pas d’halo Halo clair
Tween 80
Halo opaque Halo opaque
Halo opaque
Lécithine Halo opaque Halo opaque Halo opaque

Noircissement de milieu Noircissement de milieu

L-Tyrosine Noircissement de milieu 17
Résultats de l’étude des l’activités enzymatiques

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 Discussions
 Après 7jours d’incubation à 30C°,les tubes de milieu Urée-Indol déjà ensemencés avec chacune
des trois souches d’actinobactéries (ND101, NA44, SC20) ont viré au rouge violet; ceci confirme
l’alcalinité du milieu suite à la production d’ammoniac après catalyse de l’urée par l’uréase produite
par nos souches.
 Après l’addition des deux réactif NR1 et NR2 pour les tubes de milieu bouillon nitraté déjà
ensemencés par les souches d’actinobactéries (ND101, NA44,SC20);seul le tube correspond à la
souches ND101 qui a viré vers le rouge; ceux qui indique que cette souche a produit la nitrate
réductase.
 Pour les deux autre souches NA44 et SC20 aucun virage n’a été observé mais l’addition de
quelque Mg de poudre de zinc nous a aidé à confirmer le résultat positif de la présence d’une activité
nitrate réductase.

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 Discussions
 la présence d’un halo clair autour des colonies dans les deux milieu « Gausse » et « Gélose au lait
écrémé » signifié que les deux substrat « Amidon » et « Casiéne » ont été dégradé par les deux enzymes
« Amylase » et « Caséinase » respectivement produites par nos trois souches d’actinobactéries
(NA44,ND101,SC20),
 L’halo opaque qui a été manifesté autour des colonies dans les deux milieu « T ween80 » et « Gélose
au jaune d’œuf » indique la présence de l’activité estérasique et  lécithinasique respectivement chez les
trois souches d’actinobactéries testées.
 L’apparition d’halo jaunâtre dans le milieu CMC montre que nos souches d’actinobactéries ont une
activité cellulolytique.
 Noircissement du milieu « Gélose à la tyrosine » s’explique par l’hydrolyse de L-tyrosine et la
production de la milanine.
 L’halo clair présenté chez les deux souches NA44 et SC20 sur le milieu « Gélose à la gélatine »
désigne une activé gélatinase positive ,le résultat négatif de cette activité chez la souche ND101 se
traduit par l’absence d’une zone autour des colonies.
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 CONCLUSION

 Les trois souches d’actinobactéries (NA44, ND101 et SC20) présentent plusieurs

activités enzymatiques (Amylolytique,cellulolytique,caséinase,estérasique,

lécitinasique, tyrosinase, uréasique, nitrate réductase).

 L’activité Amylolytique de deux souches d’actinobactéries (NA44

SC20) est relativement plus élevée par rapport à la souche ND101 .

 L’activité gélatinase est présenté chez les deux souches d’actinobactéries (NA44,

SC20) cependant la souche d’actinobactérie ND101 n’a pas pu hydrolysée la gélatine.

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 PERSPECTIVES

L’identification des souches testées.

Caractérisations des enzymes produites.

Compléter l’étude avec les testes d’autres activités biologiques pour évaluer leurs éventuelles intérêt

dans d’autres applications.

22
Merci pour votre
attention

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