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SNV Immunologie-Cellules Et Organes Du Systme Immunitaire
SNV Immunologie-Cellules Et Organes Du Systme Immunitaire
IMMUNITE :
SYSTEME IMMUNITAIRE :
Lymphocyte NK
Cellules Immunocompétentes
Lymphocytes T
Lymphocytes NK
Lymphocytes B
thymus LT CD8 c
LT CD4 h
CSL
Moelle
osseuse LB Ac
NK c
Organes Organes
Production Lymphoïdes Lymphoïdes
différenciation primaires sang
périphériques Effection
Organes et tissus lymphoïdes
- Thymus
- Moelle Osseuse
- ganglions lymphatiques
- rate
- tissu lymphoïde associé aux bronches
- amygdales végétations
- ganglions mésentériques
- plaques de peyer
- tissus lymphoïde urogénital
Organes et tissus lymphoïdes
Anneau de Waldeyer
Ganglions
Amygdales
végétations
Ganglions mésentériques
Plaques de Peyer
Cellule Cellule
Souche Souche
hématopoïétique lymphoïde
IL3, SCF Pro-B B naïf
Organes
Lymphoïdes
secondaires
IL2, IL7
Thymus
FT= thymuline, SCF, FT
thymosines a1, thymopoiétine
Pro-T T naïf
Localisation et composition du Thymus
Vue générale
Positive Négative
survie des thymocytes destruction des thymocytes qui
qui reconnaissent le CMH reconnaissent trop fortement le soi
4+8-
TCR 4-8+
vaisseaux TCR
Complexe CD3
TCR
Reconnaissance
_ _
CD3 CD3
_ _ _ _
+
- - +
+ - -
__ Transduction du signal
LYMPHOCYTES T – Structure du TCR
chaîne chaîne Région hypervariable
Alpha Beta
CHO CHO
Région Constante “C”
Pont disulfure
+ + Region transmembranaire
+
Queue Cytoplasmique
Notion de répertoire antigénique
1 cellule T 1 récepteur à l’antigène, 10 13-15 TcR différents
Réarrangement D-J
RAG, V1, V2, V3 … D2J6 C1
Recombinase
Activating
gene
enz de réparation Réarrangement V-D-J
Endonucléase V2 D2J6 C1
TdT
Terminal ADN réarrangé Ly T
Desoxynucleotidyl
β α
transferase
Thymocytes
précoces DN
Thymocytes
corticaux DP
Thymocytes
médullaires SP
Evolution du Thymus avec l’âge
Marqueurs des cellules T
TCR récepteur à l’antigène
CD28 co-activation / B7
Cellule
LFA-3 ICAM-1 Class II B7-1/B7-2
présentatrice
MHC (CD80/CD86)
SYNAPSE IMMUNOLOGIQUE (2)
1ier signal 2ieme signal
adhesion reconnaissance costimulation:
Cellule T absent
LFA-1 TCR CD-2
CD8
CD8
peptid
e
MO assure 3 fonctions:
prolifération Pro-B
BCR H + L B naïfs
IgM
Périphérie IgM
IgD B matures
LES LYMPHOCYTES B
épitope antigène
LYMPHOCYTES B – Structure du BCR
Chaîne légère
VL
CL VH
CH1
Chaîne lourde
CH2
CH3
• répartition tissulaire:
- représentent 10-15 % des lymphocytes du sang périphérique
(Grands lymphocytes granuleux avec granules lytiques: perforine,
granzymes)
- foie, rate +++
- tissus inflammés
CD2 co-activation
Anneau de Waldeyer
Ganglions
Amygdales
végétations
Ganglions mésentériques
Plaques de Peyer
Pénétration de l ’Ag
Lymphocytes naïfs
Zone corticale
Zone paracorticale
Zone médullaire
La Réponse Immune Spécifique
Schéma général / ganglion
Lymphatique afférent CD4
Ag périphérie
artère
+/- DC
IDC / FDC CD8
B Lymphatique efférent
Follicule lymphoïde
Lymphatique afférent
artère
Lymphatique efférent
Maturation finale des LB
Ac Effecteurs T Ly mémoires
CTL
Recirculation des lymphocytes
Coupe transversale
Structure de la rate : pulpe blanche
Structure de la rate
Capsule fibreuse
Zone T
artériole Zone B
Vue générale
- développement tardif
système lié à l’environnement et capable de s’adapter en permanence
Tissu lymphoïde annexé aux muqueuses :
MALT (Mucosal Associated Lymphoïd Tissue)
- nasopharynx:
NALT (Nasopharyns Associated Lymphoïd Tissue)
- Tube digestif :
GALT (Gut Associated Lymphoïd Tissue) :
contient à lui seul plus de cellules immunitaires que le
reste de l’organisme
Via HEV
Lymphe
Cellules mémoires > naïves
Flux sanguin
Roulement du
lymphocyte Activation
Adhérence primaire du lymphocyte
réversible Adhérence secondaire
irréversible transmigration
cytokines
LB
Morphologie :
- 7 – 12 micromètres
1 2 hybridomes
3 4
1 2 3 4 lymphocytes
anticorps clonage
Ac1 Ac2 Ac3 Ac4
1 2 3 4
Mélange d’anticorps :
antisérum Ac1,Ac2,Ac3,Ac4 Acm1 Acm2 Acm3 Acm4
Ac polyclonaux Ac monoclonaux
ANTICORPS MONOCLONAUX
antigènes de différentiation
ou classes de différentiation (CD)
TCR γδ TCR αβ
CD4- CD4-
CD4+ CD8+
CD8- CD8+
Cellules cytotoxiques Restriction Restriction
répertoire restreint CMH cl II CMH cl I
NUMERATION DES LT CD4+/CD8+
Immunofluorescence à l’aide d’Acm anti-CD4 ou CD8
2 phases
1) marquage
sang total
Ac anti-CD4, Anti-CD8
10-20 min
couplés à des fluorochromes
anti-CD4-FITC, anti-CD8-PE
10-20 min lyse des hématies
2) analyse
cytomètre sur 10,000 cellules
1 à 3 min/prélèvement
30 min-1 heure
40-50 prélèvements/j
Triple marquage pour cytométrie en flux
CELL CD3
λ excitation λ émission
Exemple sur sang total lysé
1000
800
Polynucléaires
Neutrophiles
Structure
600
400
Monocytes
200
Lymphocytes
0
Débris
cellulaires 0 200 400 600 800 1000
Taille
Exemple sur sang total lysé
1000
800
Polynucléaires
Neutrophiles
Structure
600
400
Monocytes
200
Lymphocytes
0
Débris
cellulaires 0 200 400 600 800 1000
Taille
Exemple sur sang total lysé
Analyse en « 3 couleurs »
10 4
10 4
10 3
10 3
CD4 FITC
CD8 PE
10 2
10 2
10 1
10 1
0
10 0
10
10 4
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
10 3
CD3 APC CD4 FITC
CD8 PE
10 2
10 1
10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
CD3 APC
Exemple sur sang total lysé
CD4+, CD3-,
(ex monocyte)
Analyse en « 3 couleurs »
10 4
10 4
CD8
10 3
10 3
CD4+, CD3+
CD4 FITC
CD8 PE
10 2
10 2
10 1
10 1
CD3+,CD4- CD4
0
(ex: CD8)
10 0
10
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
10 4
DN
(ex LB)
CD8 PE
CD8+, CD3+
10 2
CD8+, CD3-
10 1
ex NK CD3+,CD8-
(ex:CD4)
10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
CD3 APC
NUMERATION DES LT CD4+/CD8+
résultats
Expression en % des lymphocytes circulants
et en valeurs absolues
CD4
CD8
CD4/CD8
Ratio
CD4+ CD3+ / CD8+CD3+ > 0.68
VARIATION DES SOUS POPULATIONS
LYMPHOCYTAIRES AVEC L’AGE
Sang
J1-11 mois 1-6 ans 7-17 ans 18-70 ans
de cordon
Lymphocytes
% 41 47 46 40 32
.103/mm3 5.4 4 3.5 2.5 2
Cellules T CD3+
% 55 64 64 70 72
.103/mm3 3 2.5 2.5 1.8 1.4
Cellules T CD4+
% 35 41 37 37 42
.103/mm3 2 2 1.6 0.8 0.8
Cellules T CD8+
% 29 21 29 30 21
.103/mm3 1.5 0.9 0.9 0.8 0.7
CD4/CD8 1.2 1.9 1.3 1.3 1.2
(0.8-1.8) (1.5-2.9) (1-1.6) (1-1.4) (1-1.5)
LYMPHOCYTES SANGUINS PERIPHERIQUES
sous populations
Lymphocytes totaux 100%
T-NK: CD2 80-90%
T: CD3/TCR 60-80%
B: CD19 5-15%
LA LYMPHOPENIE CD4 PATIENTS VIH
Marqueur simple du déficit immunitaire T
1ère phase 2ème phase 3ème phase 4ème phase
séroconversion asymptomatique progression SIDA
virus
CD4
mois Années
RESTAURATION IMMUNITAIRE
augmentation des CD4
CD4/mm3 traitement
500
Redistribution CD4 totaux
400 1-5 CD4/mm3/j
300 CD4 mémoires
200
100 CD4 naives
Régénération
0.1 CD4/mm3/j