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Université de Hassiba Benbouali de Chlef ; Faculté SNV, Département de Biologie

M1 : Biochimie Appliquée (2019/2020), Dr. BEKARA A


Module : Biochimie Physiologique et Nutritionnelle Humaine
Chapitre 2 : Régulation Métabolique

TD 05 : Métabolisme et Analyse des protéines.

Exercice 01 : Protéolyse
1. Citez les enzymes responsable de l’hydrolyse d’une liaison peptidique, préciser leur localisation dans
l’organisme.

2. Indiquer si la protéolyse est active en période post prandiale ou en période de jeûne. Précisez les protéines
principalement concernées par cette dégradation.

3. En cas de stress important (Brûlures étendues, infections….) ; la protéolyse est augmentée mais la
synthèse de certaines protéines est au contraire stimulée. Précisez quelles sont les protéines concernées et
citre les hormones mises en jeu.
Exercice 02 : Dosage des protéines urinaires par la méthode de Folin –Lowry
Une urine donne un résultat positif avec une bandelette réactive. La concentration de protéines est
approximativement de 3g/l.
1. Donner le principe de dosage
2. Compléter le tableau de gamme sachant que la solution mère d’albumine a une concentration de 500 mg/l
Tube 0 1 2 3 4 5 Essai
Urine dilué (1/50) 1
ml
Solution étalon (ml)

Eau physiologique
q.s.p (1m)
CuSO4 (ml) 5

Réactif de Folin 0,5


(ml)
Albumine (µg/tube) 0 50 100 150 200 250

Absorbance 0 0,123 0,223 0,313 0,401 0,491 0,144

 Tracer la courbe d’étalonnage


 Déterminer la concentration des protéines urinaires.
Exercice 03 : Electrophorèse des protéines sérique
Un homme de 57 ans est hospitalisé pour asthénie, douleurs fébriles, douleurs siégeant en particulier au niveau
des os et des lombaires. Parmi les examens effectués chez ce patient, on réalise l’étude des protéines sériques par
la méthode de biuret qui donne une concentration de 90 g/l.
1. Interpréter ce résultat (par rapport aux normes).

1
L’électrophorèse des protéines sur acétate de cellulose est pratiquée sur le sérum du patient
2. Donner le principe général de l’électrophorèse
Les résultats obtenus avec le sérum du malade est comme suit :
Protéines Pourcentage (%)
Albumine 43,9
ᵞ-globulines 35,5
ɑ1 globuline 3,1
ɑ 2 globuline 8,7
Β globuline 9

3. Placer ces protéines sur le protéinogramme suivant :

4. Calculer les concentrations sériques de chaque fraction et conclure(en comparaison avec les valeurs
normales)
Exercice 04 : Clairance de la créatinine
Pour dépister une insuffisance rénale, on évalue la clairance à la créatinine à partir de la créatininémie, qui est
calculée comme suit :
C créatinines (ml/min) = (140- âge en année) Х poids (kg)/ créatininémie (µmol/l) ХK

K = 1,23 (Homme) ou 1,04 (Femme)


a) Que représente la créatinine
b) Pour chacun des patients suivants ; déterminer la clairance à la créatinine et conclure :
 Patient A : Homme de 62 ans ; 85 Kg ; Créatininémie 155 µmol/l
 Patient B : femme de 53 ans, 55 kg ; Créatininémie 65 µmol/l
 Patient C : femme de 45 ans, 47 kg ; créatininémie 168 µmol /l
Données :
 60 à 90 ml/min : insuffisance rénale débutante
 30 à 60 ml/min : insuffisance rénale modérée
 10 à 30 ml/min : insuffisance rénale sévère
 < 10 ml /min : épuration extrarénale indispensable.

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