ELECTROPHORESE

Définition

L’électrophorèse est une méthode d’analyse qui permet de séparer les composants
ionisés d’un mélange ionisé en les plaçant dans un champ électrique. En d’autres
termes, c’est une technique analytique caractérisée par le déplacement des
particules chargées en solution ou en suspension sous l’influence d’un champ
électrique. Le principe de fonctionnement est basé sur :
- le caractère amphotère des particules : capacité d’ionisation des protéines
en fonction du pH.
- la mobilité électro phorétique : vitesse de migration et champs migratoire.

I- DIFFERENTS TYPES D’ELECTROPHORESE

1-Electrophorèse libre ou de frontière

Dans ce type d’électrophorèse, la migration s’effectue au sein d’un liquide de
composition déterminée dans un tube en U. Les particules ne se séparent pas
complètement mais il se forme des frontières mises en évidence par des méthodes
optiques telles que l’absorption ultra violette pour les protéines.

2-Electrophorèse de zone
Il s’agit également d’une migration réalisée dans une phase liquide mais celle-ci
imprègne un support solide poreux ou un milieu gélifié. Il y a formation de zones
de dépôt et l’identification se fait par précipitation mais en général par coloration.
Les supports les plus courants sont : le papier, l’acétate de cellulose et les gels.

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3-Immunoélectrophorèse
La révélation est basée sur une réaction antigène-anticorps. On utilise une plaque
de verre avec gélose dans laquelle on creuse une gouttière parallèlement au sens
de migration des protéines puis dépôt d’un antisérum dans la gouttière une fois
l’électrophorèse terminée.

4-Electrofocalisation
On utilise un support avec gradient de pH. Déplacement des protéines sous
l’influence d’un champ électrique. Chaque molécule migre jusqu’à l’endroit où le
pH =pHi.

5- Electrophorèse capillaire
Il s’agit d’une technique récente qui commence à se développer et qui offre
essentiellement les avantages de la rapidité, de la très grande résolution et
partant, de la très grande sensibilité de la détection.

II- APPLICATIONS DE L’ELECTROPHORESE

On distingue deux grands types d’applications :

- Applications analytiques :
- Vérification de la pureté des protéines.
- Détermination du poids moléculaire.

- Applications médicales

Exemple :

-Séparation et identification des mélanges de

protéines sériques sur acétate de cellulose
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 L’acétate de cellulose en couche mince est fréquemment utilisée en
biochimie clinique dans la séparation des protéines du sérum.
Habituellement on obtient par électrophorèse sur support solide
après coloration cinq constituants à partir du sérum. On peut
déterminer la qualité de chaque protéine par mesure de l’intensité de
la coloration des différentes bandes.

Albumine 1 2  

Le sérum albumine, la plus abondante est la plus rapide a pH basique (pH 8,6) car
c’est la plus acide des protéines Les sérum globulines sont classés par mobilité
décroissante en  1,  2, et. Les  globulines ne migrent pratiquement pas.
Il y a variation de l’albumine et globulines lors des maladies inflammatoires :
 Il y a variation en fonction de l’espèce et de l’état tels que chez les
drépanocytaires.

 Séparation de l’hémoglobine A et S : on peut déterminer le statut des

enfants c’est-à-dire AA, AS, SS en fonction de celui des parents qui
sont AS.
 Dans l’inflammation hépatique il y a une augmentation des
globulines surtout de bêta et de gamma globulines et une diminution
de l’albumine.
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  Dans les réactions inflammatoires telles que le rhumatisme articulaire
aigue, tuberculose et cancer on constate une augmentation des α2
globulines .
 Dans les maladies infectieuses chroniques et parasitaires on constate
l’augmentation des gammaglobulines.

Tracé densitométrique du protéinogramme d'un sérum normal

CONCLUSION
L’électrophorèse, au carrefour de la biologie, de la physique et de la chimie, est
devenue un outil indispensable dans de nombreux laboratoires de recherche, tant
médicaux qu'agronomiques (analyse du génome...), et dans l'industrie (contrôle
qualité dans l'agroalimentaire...). Cependant il est nécessaire de souligner que
l’électrophorèse en biochimie clinique n’est pas un moyen de diagnostic direct
mais il peut servir d’examen complémentaire.