CLI 418 : Protéines des liquides biologiques et physiopathologie endocrinienne

Master 1 de Biochimie, Option Biochimie clinique ; Année académique 2019/2020

COURS INTRODUCTIF

PREMIERE PARTIE : PROTEINES DES LIQUIDES BIOLOGIQUES, Pr TAMOKOU JD

Objectifs : (voir syllabus)
1. L'étude des protéines des liquides biologiques comprend :
 Dépistage et suivi des dysglobulinémies
Dosage de protéines spécifiques impliquées dans certaines pathologies
 Dépistage, le typage et le dosage des cryoglobulines
 Recherche d'une protéinurie significative d'une atteinte rénale
 Mise en évidence d'un profil oligoclonal des IgG dans le LCR
 Recherche de ß2-transferrine
 Analyse spectrophotométrique du LCR
 Etude de la répartition des isoenzymes ou des macroenzymes
 Exploration de l'Hb A1c et des pathologies de l'hémoglobine
 Exploration des Anomalies des lipoprotéines

L'exploration des protéines des liquides biologiques comprend :

Thème 1: Dépistage et suivi des dysglobulinémies rencontrées au cours du myélome, des
amyloses AL et des plasmocytomes solitaires et dosage des chaînes légères libres sériques.
- Le dépistage et le suivi des dysglobulinémies rencontrées au cours du myélome (Tumeur,
souvent cancéreuse, de la moelle osseuse et d'autres pathologies (gammapathies monoclonales
bénignes (MGUS)) ; des amyloses AL (maladie rare qui se caractérise par des dépôts inhabituels
de protéines insoluble (substance amyloïde) dans les tissus, entre les cellules, et souvent dans la
paroi des petits vaisseaux), des plasmocytomes solitaires (tumeur unique, par définition,
siégeant parfois dans l'os mais le plus souvent en dehors. Il ne s'accompagne pas d' atteinte de la
moelle osseuse et le taux d'Ig monoclonale reste faible. Il peut se développer sur la colonne
vertébrale (rachis) ou bien sur les os longs, ...) ainsi que la recherche d'une éventuelle atteinte
rénale par le dosage des chaînes légères libres sériques.

Thème 2 : Exploration des protéines spécifiques : CRPus, cystatine C, myoglobine,

céruléoplasmine, RBP, préalbumine et α2-macroglobuline.
- Le dosage de protéines spécifiques impliquées dans certaines pathologies:
CRPus (L'inflammation de bas grade, dont un des marqueurs est la hausse de la CRP ultra-
sensible : CRPus, pourrait participer à l'augmentation du risque cardiovasculaire : instabilité de
la plaque d'athérome) ; cystatine C (la cystatine C est une protéine de type protéase à cystéine,
codée par le gène CST3 situé sur le chromosome 20 humain. Son dosage est un indice de la
fonction rénale et permet d'évaluer le débit de filtration glomérulaire : insuffisance rénale) ;
myoglobinémie et myoglobinurie (permettent d’évaluer une atteinte musculaire) ;
céruléoplasmine (le dosage de la céruléoplasmine permet de connaître la concentration sanguine
de cette protéine transporteuse de cuivre. Il permet de contribuer au diagnostic d'une surcharge
toxique ou héréditaire en cuivre, par exemple au cours de la maladie de Parkinson et de la
maladie de Wilson qui correspond à un défaut d'élimination biliaire du cuivre), RBP (Une
protéine de liaison du rétinol, est une protéine de transport du plasma sanguin et du cytosol des
1
cellules des vertébrés susceptible de se lier au rétinol, au rétinal et à l'acide rétinoïque afin d'en
contrôler les effets dans l'organisme et préalbumine (la préalbumine est une protéine qui
participe au transport des hormones thyroïdiennes et de la vitamine A. Elle est souvent utilisée
pour aider les clinicien à diagnostiquer une malnutrition protéique et calorique : dénutrition), α
2-macroglobuline (est une glycoprotéine, de masse moléculaire 720 kDa synthétisée par le foie,
par les macrophages et les fibroblastes lors des processus inflammatoires).

Thème 3 : Dépistage, typage et dosage des cryoglobulines et intérêts diagnostics.

- Le dépistage, typage et dosage des cryoglobulines (Les cryoglobulines sont des
immunoglobulines, présentes dans le sang (cryoglobulinémie), et qui se solidifient ou se gélifient
à froid, et se redissolvent à la chaleur de façon réversible. Leur recherche est utile au diagnostic
de certaines maladies auto-immunes ou de certaines maladies du sang) qui peuvent apparaître
dans de nombreuses pathologies: les hémopathies lymphoplasmocytaires, les maladies immuno-
prolifératives, inflammatoires chroniques auto-immunes, infectieuses ou virales. Il existe des
liens forts entre le type de la cryoglobuline identifiée et la symptomatologie clinique ou la
maladie causale.

Thème 4 : Dépistage et typage d’une protéinurie et intérêts diagnostics.

- La recherche d'une protéinurie significative d'une atteinte rénale. Le typage des
protéinuries physiologique, glomérulaire ou tubulaire permet de dépister les anomalies de tout ou
partie du néphron. La recherche de protéinurie associée aux dysglobulinémies peut mettre en
évidence une Ig monoclonale complète et/ou la présence de protéinurie de Bence-Jones.

Thème 5: Mise en évidence d'un profil oligoclonal des IgG dans le LCR et intérêts
diagnostics.
- La mise en évidence d'un profil oligoclonal des IgG dans le LCR, évocatrice d'une
Sclérose en Plaques : SEP (est une neurologique ou maladie auto-immune qui touche des
individus génétiquement prédisposés, généralement les jeunes mais qui semble déclenchée par
des éléments environnementaux qui agissent comme des facteurs de dérégulation de l'immunité,
d'inflammation et de dégénérescence des nerfs) ou d'autres maladies neuro-inflammatoires,
réalisée par une technique par isoélectrofocalisation suivie d'une révélation par
immunoempreinte (selon préconisation du Consensus Européen de Neurologie).

Thème 6 : Recherche de ß2-transferrine et intérêts diagnostics.

- La recherche de ß2-transferrine, témoignant de la présence de LCR dans les liquides de
ponction ou d'écoulement tels que les rhinorrhées (écoulement nasal) et les otorrhées
(écoulement de liquide séreux, mucoïde ou purulent provenant du conduit auditif externe, témoin
d'une affection de l'oreille, le plus souvent d'origine infectieuse, comme lors d'une otite externe
ou d'une otite moyenne avec perforation du tympan).

Thème 7: Analyse spectrophotométrique du LCR pour le diagnostic des hémorragies

d'origine méningée non détectées par le scanner cérébral.
- L'analyse spectrophotométrique du LCR pour le diagnostic des hémorragies d'origine
méningée non détectées par le scanner cérébral (5% des cas à 24 H et 50% à 1 semaine). La
présence d'OxyHb, de MetHb et de bilirubine permet de détecter un saignement méningé entre
12 H et 2 semaines après le début des symptômes (céphalée d'apparition brutale).

2
Thème 8: Etude de la répartition des isoenzymes ou des macroenzymes (PAL, CPK et
LDH) et intérêts diagnostics
- L'étude de la répartition des isoenzymes/isozymes ou des macroenzymes aide au diagnostic
de pathologies osseuses, hépatiques ou cancéreuses (PAL), d'atteinte myocardique ou cérébrale
(CPK), d'atteinte musculaire, hépatique, cardiaque, pulmonaire ou rénale (LDH).

Thème 9 : Exploration de l'Hb A1c et des pathologies de l'hémoglobine

- L'exploration des pathologies de l'hémoglobine :
 Diagnostic et suivi des hémoglobinopathies telles que les Hémoglobinoses S
(drépanocytose), C, D, E, les thalassémies (α et ß, hémoglobines H, Bart's),
hémoglobines hyperaffines et hémoglobines instables. 3 techniques de mise en
évidence d'une hémoglobine anormale: l'électrophorèse capillaire,
l'isoélectrofocalisation et la CLHP et éventuellement des techniques supplémentaires
selon la nature de l'hémoglobinopathie suspectée. Analyse les anomalies du gène bêta
responsables de thalassémies ou d'hémoglobinopathies par des techniques de
biologie moléculaire (séquençage).
 Dosage de l'Hb A1c dans le cadre du diagnostic et du suivi des patients diabétiques.
Le dosage des fructosamines sériques est également réalisé dans le cadre de patients
diabétiques porteurs d'un variant d'hémoglobine pour lesquels un dosage
d'hémoglobine glyquée n'est pas réalisable.

Thème 10: Exploration des Anomalies qualitatives et quantitative des lipoprotéines

- L'exploration des Anomalies des lipoprotéines chez des sujets à risque cardiovasculaire.
La séparation des lipoprotéines par électrophorèse met en évidence les lipoprotéines
qualitativement anormales (IDL, Lp(a), Lp(x)) et permet de classer les hyperlipoprotéinémies
quantitativement anormales.