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NORME McFARLAND
- Pour usage in vitro uniquement- N° de catalogue TM50-TM60

Les étalons McFarland sont utilisés pour Procédures


normaliser le nombre approximatif de bactéries dans
une suspension liquide en comparant la turbidité de la 1. Mélanger l'étalon McFarland sur un mélange vortex
suspension d'essai avec celle de l'étalon McFarland. avant l'examen. Assurez-vous que l'étalon
Un étalon McFarland est une solution chimique McFarland est aliquoté dans un tube de la même
de chlorure de baryum et d'acide sulfurique ; la taille et du même diamètre que le tube utilisé pour
réaction entre ces deux produits chimiques aboutit à la préparer la suspension à tester.
production d'un fin précipité, le sulfate de baryum. 2. Préparer une suspension d'essai en obtenant une
Lorsqu'il est bien agité, la turbidité d'un étalon culture fraîche et pure de l'organisme d'essai et en
McFarland est visuellement comparable à une inoculant un bouillon approprié.
suspension bactérienne de concentration connue, 3. En présence d'un bon éclairage, comparer
comme indiqué ci-dessous. visuellement la turbidité de la suspension
d'essai avec celle de la norme McFarland en
Approximatif comparant la clarté des lignes sur la carte
Mc Farland

1%H2ALORS4
1% BaCl2
Standard

Chat Bactérien Wickerham.


(ml)

(ml)

Non. Suspension / 4. Si la suspension à tester est trop légère, ensemencer avec des
mL organismes supplémentaires ou incuber le tube jusqu'à ce
que la turbidité corresponde à celle de l'étalon. Si une dilution
TM50 0,5 0,05 9,95 1,5 x 108 est nécessaire, utiliser une pipette stérile et ajouter
TM51 1.0 0,10 9,90 3,0 × 108 suffisamment de bouillon ou de solution saline pour obtenir
TM52 2.0 0,20 9,80 6,0 × 108 une turbidité qui correspond à celle de l'étalon.
TM53 3.0 0,3 9.7 9,0 x 108
TM54 4.0 0,4 9.6 1,2 × 109
TM55 5.0 0,5 9.5 1,5 x 109 Précautions
TM56 6.0 0,6 9.4 1,8 × 109
TM57 7.0 0,7 9.3 2,1 × 109 • Les normes McFarland sont sensibles à l'air et à la lumière, par
TM58 8.0 0,8 9.2 2,4 × 109 conséquent, assurez-vous que les tubes sont fermés
TM59 9.0 0,9 9.1 2,7 × 109 hermétiquement à tout moment et maintenus dans l'obscurité.

TM60 10.0 1.0 9.0 3,0 × 109


• Le niveau des normes McFarland doit être vérifié
Avant utilisation, l'étalon McFarland doit être de temps en temps pour s'assurer qu'aucune
bien agité et aliquoté dans des éprouvettes évaporation ne s'est produite. Jeter si un volume
identiques à celles utilisées pour préparer la est perdu
suspension d'inoculum. Une fois aliquotés, les tubes
doivent être hermétiquement fermés pour éviter • Les étalons McFarland doivent être
l'évaporation. Avant chaque utilisation, bien agiter vigoureusement agités sur un vortex mécanique
pour s'assurer que le sulfate de baryum est réparti avant chaque utilisation et inspectés pour un
uniformément dans la solution. aspect trouble uniforme. Si de grosses particules
La norme la plus couramment utilisée dans le apparaissent ou si des agglutinations sont
laboratoire de microbiologie clinique est la norme apparentes, jetez le standard
McFarland 0,5, qui est prescrite pour les tests de
sensibilité aux antimicrobiens et les tests de • Le nombre réel de bactéries viables présentes dans
performance des milieux de culture. une suspension ajustée dépend de la taille, de la
viabilité et de l'agglutination de la bactérie
particulière utilisée
Contrôle de qualité 3. Washington JA, Warren E, Karlson AG. Stabilité
des étalons de turbidité au sulfate de baryum.
La précision de la densité des étalons Appl Microbiol 1972; 24:1013.
McFarland peut être vérifiée à l'aide d'un 4. Baker CN, Thornsberry C, Hawkinson RW.
spectrophotomètre avec un trajet lumineux de 1 Standardisation de l'inoculum dans les tests de
cm; un étalon McFarland 0,5 a une lecture sensibilité aux antimicrobiens : évaluation des
d'absorbance de 0,08 à 0,1 à 625 nm. cultures sur gélose pendant la nuit et système de
Alternativement, réglage un bactérien standardisation rapide de l'inoculum. J Clin Micro
suspension à la même turbidité et en préparant des 1983; 17:450-7.
dilutions en série de 10 peuvent vérifier l'exactitude d'un 5. Isenberg HD, éd. Manuel de microbiologie
étalon McFarland en effectuant un comptage sur plaque procédures cliniques, Vol I. Washington,
de la dilution et en s'assurant que la suspension donne un DC : ASM, 1992.
nombre représentatif de colonies. Exemple pour la norme 6. NCCLS. M22-A2 Assurance qualité des
McFarland 0,5 : préparé microbiologique
média culturel. 2ndéd. Wayne, Pennsylvanie : NCCLS,

Nombre prévu de colonies 1996.


Dilution à partir de 0,1 ml 7. Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover
dix-1 TNTC FC, Yolken RH, Eds. Manuel de clinique
dix-2 TNTC microbiologie. septeéd. Washington DC:
dix-3 TNTC ASM, 1999.
dix-4 TNTC
Original : Décembre 2002 Révisé /
dix-5 TNTC
Révisé : Octobre 2014
dix-6 150
dix-sept 15

Stockage et durée de conservation

Nos étalons McFarland doivent être stockés en


position verticale à 4°C à 25°C et à l'abri de la
lumière. Dans ces conditions, ils ont une durée de
conservation de 12 semaines à compter de la date
de fabrication.

Références

1. McFarland J. Nephelometer: un instrument pour les


milieux utilisés pour estimer le nombre de
bactéries dans les suspensions utilisées pour le
calcul de l'indice opsonique et pour les vaccins.
Confiture

Association médicale 1907 ; 14:1176-8.


2. Wickerham LJ. Taxonomie de levures.
Bulletin technique no. 1029. Washington,
DC : Département de l'agriculture des États-Unis, 1951.

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