REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

UNIVERSITE DES SCIENCES ET DE LA TECHNOLOGIE MOHAMED BOUDIAF _USTO MB

Faculté des sciences de la nature et de vie

Département de sciences de la nature et de vie

Module : outils biotechnologiques

Thème

Séquençage
Présenté par :
 Saim Hana
 Malouk Nourhen
Niveau : Master 1 microbiologie appliquée
Groupe : 05
Section : 02

1
 SOMMAIRE :
INTRODUCTION………………………………………………….………..……3

HISTOIRE DE SÉQUENÇAGE …………………………………..….………… …

4
 PREMIÈRE GÉNÉRATION ………………………….………….……… …
4
 DEUXIÈME GÉNÉRATION …………………………………….…… ……
4
 TROISIÈME GÉNÉRATION …………………………………….…………
4
PROCÉDURE GÉNÉRALE POUR LE SÉQUENÇAGE DU GÉNOME ………..
……….5
 GÉNÉRATION DES SÉQUENCES ………………………………….
……….5
 BASE CALLING ………………………………………………….
……….5
 COUPE DES SÉQUENCES VECTORIELLES ……………………….
……….5
 VALIDATION DE L’ASSEMBLAGE …………………………………….
…..5
 FINITION …………………………………………………………….
…..5
MÉTHODES ……………………………………………………………….
…….6
SÉQUENCES DE LA PREMIÈRES GÉNÉRATIONS …………………….
……6
 MÉTHODE DE MAXAM
GILBERT…………………………………..6
 MÉTHODE DE
SANGER…………………………………………….7
PRINCIPE DE LA MÉTHODE………………………………….
…7
NAISSANCES SU SÉQUENÇAGE DE NOUVELLE GÉNÉRATION .
…………..8
1. SÉQUENÇAGE PAR RÉSEAU CYCLIQUE ……………………….
…..8

2
 2. SÉQUENÇAGE PAR HYBRIDATION …………………………….
…..8
3. MÉTHODE ÉLÉCTROPHORÉTIQUE
……………………………….9
4. SÉQUENÇAGE TOMPORELLE DE MOLÉCULE UNIQUE
……………9
LES AVANTAGES DU SÉQUENÇAGE NGS….
……………………………..10
SÉQUENÇAGE DU DEUXIÈME GÉNÉRATION ...……………….…………
10
SÉQUENÇAGE DE TROISMIÈME GÉNÉRATION……………………….…
10
CHOIX D’UNE STRATÉGIE DE SÉQUENÇAGE ……………………………….…
10
a. LONGUEUR DE LECTURE ET COUTS PAR LECTURE………………….…
10
b. PRÉCISION
BRUTE ……………………………………………………...10
c. LECTURE APPARIÉES
…………………………………………………..11
d. PROTOCOLE DE
PRÉTRAIREMENT ……………………………………..11
e. PROTOCOLE DE POST TRAITEMENT
…………………………………...11
COMPARAISON ………………………...
……………………………………...11
CONCLUSION ……………...………………………………………………….12
1. INTRODUCTION
Les technologies de séquençage se sont développées rapidement au cours des
dernières décennies et ont été comparées au moteur d'une voiture, ce qui nous
permet de naviguer sur la carte routière de divers génomes , qu'ils soient aussi
primitifs que des virus ou aussi avancés que des êtres humains. Le séquençage
de l'ADN a rapidement révolutionné la biologie moléculaire, la médecine, la
génomique et les domaines connexes. Conçu pour la première fois par Frederick

3
Sanger en 1977 , les progrès majeurs réalisés au fil des ans dans les technologies
de séquençage ont permis de mettre au point de nouvelles méthodes d'analyse de
l'ADN. ont conduit au développement de plateformes de séquençage de l'ADN
nouvelles et améliorées. Ces technologies, ainsi que divers outils informatiques
pour l'analyse et l'interprétation des données, ont aidé les chercheurs à mieux
comprendre les génomes de divers organismes importants sur le plan
économique. Elles Ils ont fait du séquençage un outil de recherche à la fois
puissant et réalisable, qui a évolué au point de pouvoir être facilement utilisé,
même dans les petits laboratoires, avec une grande efficacité, en contournant la
nécessité de recourir à des systèmes de séquençage volumineux et encombrants.
(Verma, Kulshrestha, & Ayush, 2016)

2. HISTOIRE DU SÉQUENÇAGE :
L'ADN (Acide DésoxyriboNucléique) est une molécule présente dans toutes les cellules des
êtres vivants. Elle renferme l'information nécessaire pour se développer et se reproduire.
L'information en elle-même est codée par la suite de quatre différents acides nucléiques
ordonnés d'une façon compréhensible pour l'organisme. Le séquençage est  le processus
utilisé pour la découverte de cette séquence. Plusieurs méthodes existent, se développent et
s'améliorent toujours plus avec le temps. Nous en sommes aujourd'hui à la 3ème génération
de ces outils de séquençage.

4
  Première génération
Développée par Sanger  en 1975-77 une étape d'amplification génère des fragments d'ADN
de différentes longueurs. Chaque fragment se termine par un fluorochrome spécifique,
signature d'une des bases. Les fragments sont ensuite traités par électrophorèse. Ceux-ci se
regroupent et s'ordonnent en fonction de leur longueur. La séquence des couleurs ainsi lue est
alors utilisée pour transcrire le fragment dans son ensemble.
Il faut noter qu'une autre méthode, chimique, a été proposée par Maxam et Gilbert en 1977 et
n'a pas été retenue, plus complexe et difficile à mettre en place, ne résistant pas au passage à
l'industrie
 Seconde génération
La seconde génération d'outils de séquençage est apparue en 2005 en réponse au prix élevé et
au faible débit du séquençage de première génération. Ici, des dizaines de milliers de
séquences sont traitées ensemble, en parallèle. C'est l'apparition du séquençage haut-débit.
Le "high throughput sequencing" ou encore le "next-generation sequencing" sont les termes
les plus utilisés pour en parler. Il existe de nombreuses techniques, développées par
différentes entités dont les principales sont Roche, Illumina et  Life Technologies mais toutes
ont la même philosophie, c'est à dire :
 Amplification de l'ADN  principalement via PCR par émulsion (emPCR) ou par
PCR par phase solide (solid- phase amplification).
 Succession de cycles de lavage et identification ("wash & scan" ) : incorporation de
nucléotides dans la chambre de réaction, lavage de la chambre de réaction, capture
de l'image.
 Troisième génération
La troisième génération de séquençage de masse est symbolisée par le séquençage d'une
seule molécule d'ADN (SMS ou "Single Molecule Sequencing" en anglais).
Contrairement à la seconde génération,  aucune amplification de l'ADN (ou ARN) n'est
nécessaire pour effectuer les mesures. Une seule molécule est "lue".

5
 3. PROCÉDURE GÉNÉRALE POUR LE SÉQUENÇAGE DU GÉNOME  :

 génération des séquences  :

La première étape de tout projet de
séquençage du génome est la génération des séquences 
génération d'une énorme quantité de
données de séquençage (Fig. 1).
Appel de bases
 base calling  :
Les données brutes générées par le coupe des séquences
vectorielles :
séquençage sont traitées pour
convertir les chromatogrammes en
valeurs de qualité. Cette procédure élagage des séquences
est connue sous le nom de "base
calling" ou "fragment readout". assemblage de séquences

 coupe des séquences

vectorielles  :  validation de l’assemblage 
L'étape suivante est facultative, car
seules les méthodes qui impliquent
la construction d'une bibliothèque Échafaudages
utiliseront l'élagage des séquences
du vecteur. Il s'agit d'une étape
Finition
importante car certaines parties du
vecteur sont également séquencées Figure 1 : diagramme des étapes de séquençage de
par des amorces universelles, de n’importe quelle génome
même que la région d'insertion. Un
tri supplémentaire des régions de bonne et de mauvaise qualité est effectué pour garantir un
assemblage de séquences plus précis. Les données traitées sont ensuite assemblées en
recherchant les chevauchements de fragments pour former des "contigs". Cependant, en
raison des régions répétitives, les fragments peuvent être mal alignés, ce qui entraîne un
mauvais assemblage. C'est pourquoi la validation de l'assemblage est effectuée manuellement
ou à l'aide de logiciels

 validation de l’assemblage  :
localiser la position correcte des lectures.
Les contigs sont ensuite orientés l'un après l'autre à l'aide d'informations appariées pour former des
chaînes ordonnées appelées "échafaudages" .Cette étape est suivie par l'étape finale et la plus
cruciale du séquençage du génome : la FINITION
 La Finition:
Elle comprend le comblement des lacunes (également connu sous le nom de "chemin de
tuilage minimum") et la réévaluation de l'ensemble des données. (Verma, Kulshrestha, &
Ayush, 2016)

6
 4. MÉTHODES  :
Bien que la plupart des techniques de séquençage soient très différentes, leurs procédures
peuvent être résumées en un flux de travail général qui est fondamental pour parvenir à un
séquençage à faible coût et à haut débit. Comme indiqué ci-dessus, les techniques de
séquençage peuvent être classées en trois générations. Chaque génération a été développée
principalement pour améliorer les lacunes de la génération précédente. La première
génération a marqué le début de l'ère des technologies de séquençage et a jeté les bases sur
lesquelles les générations suivantes se sont développées. Les technologies de la deuxième
génération, qui constituaient une amélioration considérable par rapport à leurs prédécesseurs,
sont actuellement en plein essor. par rapport à leurs homologues antérieurs sont actuellement
en plein essor dans les laboratoires du monde entier. La troisième génération comprend des
technologies qui sont en cours de développement, qui se sont révélées prometteuses et que
leurs concepteurs et leurs détracteurs prévoient par leurs concepteurs et leurs détracteurs
comme celles qui finiront par remplacer les technologies de la deuxième génération.

Séquençage de la première génération  :

 Méthode de Maxam-Gilbert :
Nous avons mis au point une nouvelle technique de séquençage de l'ADN La pure détermine
la séquence de nucléotides d'une molécule d'ADN marquée par iermaaly en la cassant au
niveau de l'ade-.t, guadine, cytosine ou
thymine avec des agents chimiques.
Le pattialolavage au niveau de chaque
base produit un ensemble imbriqué de
fr radioactifs allant de l'extrémité
marquée à chacune des positions de
cette base. L'électrophorèse sur gel de
polyacrylamide résout les fragments
monocaténaires ; leurs tailles révèlent
dans l'ordre les les points de rupture.
L'autoradiographie d'un gel produit à
partir de de quatre clivages chimiques
différents, chacun spécifique d'une
base dans un sens que nous décrirons,
montre alors de base dans un sens que
nous décrirons, montre alors un motif
de bandes à partir d'où l'on peut lire
directement la séquence. La méthode
est limitée La méthode est limitée par
le pouvoir de résolution du gel de
polyacrylamide. dans l'état actuel du
développement, nous pouvons
Figure2 : Le séquençage de l’ADN de Maxam et Gilbert
séquencer vers l'intérieur environ 100
bases à partir de l'extrémité d'un
fragment d'ADN marqué de façon terminale. Nous attaquons l'ADN avec des réactifs qui
7
endommagent d'abord et retirent ensuite une base de son sucre. une base de son sucre. Le
sucre exposé est alors un point faible de l'épine dorsale et se brise facilement. Le sucre exposé
est alors un point faible du squelette et se casse facilement ; une série de réactions
d'élmination catalysées par un alcali ou une amine clivera le sucre complètement de ses 3' et
5'. complètement le sucre de ses phosphates 3' et 5'. La réaction avec les est limitée,
n'endommageant qu'un résidu toutes les 50 à 100 bases le long de l'ADN. La deuxième
réaction de clivage du brin d'ADN doit aller jusqu'à son terme. doit aller jusqu'au bout pour
que les molécules finalement analysées ne présentent pas de dommages cachés. analysées ne
présentent pas de dommages cachés. Le réactif spécifique à la purine est le sulfate de
diméthyle; le réactif spécifique de la pyrimidine est l’hydrazine. Le séquençage nécessite des
molécules d'ADN, qu'elles soient bicaténaires ou monocaténaires, qui sont marquées à l'une
des extrémités d'un brin avec 32p. d'un brin avec 32p. Il peut s'agir d'une étiquette 5' ou 3'. Un
fragment de restriction de restriction de n'importe quelle longueur est marqué aux deux
extrémités - par exemple, en étant d'abord traité avec la phowbatase alcaline pour éliminer les
phosphates terminaux, puis marqué avec de l'a2P par transfert de l'ATP marqué à l'y avec de
l'eau.y avec la polynucléotide kinase. Il existe alors deux stratégies : soit (i) la molécule
double brin est coupée par une deuxième enzyme de restriction et les deux extrémités sont
séparées sur un gel de polyacrylamide et isolées pour le séquençage, soit (ii) la molécule
doublement marquée est déformée et les brins sont séparés sur un gel (1), extraits et
séquencés. (ALLAN & WALTER, 1977)

 méthode de Sanger :
Principe de la méthode :
l'activité inhibitrice du 2',3'-didésoxythymidine triphosphate triphosphate sur l'ADN
polymérase I dépend de son incorporation dans la chaîne d'oligonucléotides en croissance à la
place du (ddTTP) sur l'ADN polymérase I dépend de son incorporation dans la chaîne
d'oligonucléotides en croissance à la place de l'acide thymidylique (dT). Comme le ddT ne
contient pas de groupe 3'-hydroxyl la chaîne ne peut pas s'allonger davantage, de sorte que la
terminaison. se produit spécifiquement aux positions où le dT devrait être incorporé. Si une
amorce et une matrice sont incubées avec l'ADN polymérase en présence d'un mélange de
ddTTP et de dTTP, ainsi que des
trois autres
désoxyribonucléotides. trois
autres désoxyribonucléosides
triphosphates (dont l'un est
marqué par 32p). 5' et avec des
résidus ddT aux extrémités 3' est
obtenu. Lorsque ce mélange est
fractionné par électrophorèse sur
des gels d'acrylamide dénaturants,
la répartition des bandes montre la
distribution des résidus ddT dans
les fragments nouvellement
synthétisés. dT dans l'ADN
Figure 3 : aperçu schématique de la méthode Sanger
(terminaison de chaîne) pour le séquençage de l'ADN
8
nouvellement synthétisé. En utilisant des terminateurs analogues pour les autres nucléotides
dans des incubations séparées et en faisant passer les échantillons en parallèle sur le gel, on
obtient un motif de bandes à partir duquel la séquence peut être identifiée. comme dans les
autres techniques rapides mentionnées ci-dessus. Deux types de triphosphates terminaux ont
été utilisés : les dérivés didésoxy et les dérivés arabiques. les dérivés didésoxy et les

arabinonucléosides. L'arabinose est 5463

un stéréo-isomère du ribose dans lequel le groupe 3'-hydroxyle est orienté en position trans
par rapport au groupe 2'-hydroxyle. Les nucléotides arabinosyl (ara) agissent comme des
inhibiteurs de fin de chaîne de l'ADN polymérase I d'Escherichia coli d'une manière
comparable au ddT (Atkinson, Deutscher, P, A, & A, 1969), bien que les chaînes synthétisées
se terminant par l'araC 3' puissent être étendues à d'autres chaînes. 3' araC peuvent être
prolongées par certaines ADN polymérases de mammifères . Afin d'obtenir un schéma de
bandes approprié de bandes permettant la lecture d'une séquence étendue, il est nécessaire
d'avoir un rapport d'avoir un rapport triphosphate terminateur/triphosphate normal tel que
l'incorporation du terminateur ne soit que partielle. se produise. Pour les dérivés didésoxy, ce
rapport est d'environ 100 et, pour les dérivés arabinosyl, d'environ 5000 (F, S, & A, DNA
sequencing with chain-terminating inhibitors, 1977)

Naissance du séquençage de nouvelle génération (NGS)

L'avènement des techniques de séquençage de nouvelle génération a simplifié et accéléré la
tâche autrefois herculéenne du séquençage (Bubnoff, 2008 )
Progressivement, les technologies de séquençage de nouvelle génération, rapides et rentables,
se sont imposées comme le choix populaire par rapport à leurs homologues plus lents et
encombrantes de la première génération. Elles ont permis de contourner le goulot
d'étranglement causé par la préparation de modèles d'ADN individuels, comme l'exige le
séquençage de première génération. individuels, comme l'exigeait la première génération.
Lorsque ces technologies sont complétées par des outils et des logiciels issus de domaines
puissants tels que la bioinformatique et la biologie computationnelle, elles entraînent une
vitesse à laquelle les données sont générées (Metzker, 2005). Les techniques utilisées dans les
NGS peuvent être regroupées en plusieurs catégories. Celles-ci comprennent :
1. Le séquençage par réseau cyclique : Dans cette technique, les séquences cibles sont
physiquement séparées sur un réseau et sont séquencées par l'ajout répété d'une série
d'enzymes à chaque cycle pour détecter l'incorporation de bases. en ajoutant un ensemble
d'enzymes à chaque cycle pour détecter l'incorporation des bases. Cette technique est basée
sur le séquençage par synthèse car la séquence est détectée au fur et à mesure de
l'incorporation de la base soit en utilisant des substrats nucléotidiques bloqués de manière
réversible, soit en ne fournissant qu'un seul type de nucléotide par cycle (Shendure & Ji,
2008).
2. Séquençage par hybridation : Dans cette technique, un grand nombre de sondes sont fixées
sur un réseau.L'ADN cible fragmenté (dont la séquence doit être déchiffrée) est ajouté à la
matrice, où il se lie à des sondes complémentaires. Ces séquences de sondes peuvent être
l'ADN d'un génome de référence. Cette technique permet d'éviter toutes les étapes

9
compliquées de la et est plus efficace lorsqu'un génome de référence est disponible (Mardis,
2013).
3. Méthodes microélectrophorétiques : Comme son nom l'indique, une méthode
microélectrophorétique est la miniaturisation de la méthode conventionnelle de Sanger. Le
concept de cette technique est le suivant de conserver la précision et la longueur de lecture de
la méthode de Sanger, mais d'introduire le parallélisme afin de réduire le temps et le coût
(Blazej, Kumaresan, & Mathies, 2006)
4. Séquençage en temps réel de molécules uniques : Plusieurs institutions et organisations
développent des techniques pour réaliser un séquençage ultra-rapide de l'ADN dans lequel la
séquence sera détectée dès qu'un nucléotide est incorporé. Ces approches comprennent le
séquençage par nanopores et la surveillance en temps réel de l'activité de l'ADN polymérase.
Le premier consiste à séquencer les acides nucléiques en analysant chaque base lors de son
passage à travers une membrane biologique ou un pore synthétique appelé nanopore. Le
second comprend la détection de l'incorporation de nucléotides par FRET (transfert d'énergie
par résonance (transfert d'énergie par résonance de fluorescence) ou à l'aide de guides d'ondes
à mode zéro (Augustin, Ankenbauer, & Angerer, 2001)

Figure4 : Étapes du séquençage haut débit (NGS)

10
Les

avantages de séquençage NGS :

1. Suppression des techniques lourdes et fastidieuses telles que la transformation d'E. coli et le
prélèvement de colonies.
2. Génération de centaines de millions de lectures de séquençage en parallèle.
3. Diminution spectaculaire du volume effectif de réactif par réaction (de picolitres à
femtolitres).

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Collectivement, ces différences ont permis aux technologies NGS de produire une grande
quantité de données à un coût raisonnable. de produire une grande quantité de données à des
coûts bien moindres et en beaucoup moins de temps.

Le séquençage de dexième génération

Le séquençage de deuxième génération englobe principalement trois technologies : Le
pyroséquençage Roche 454, la technologie Solexa d'Illumina et le séquençage par ligature
d'ABI/SOLiD. En utilisant l'émulsion PCR en émulsion et le séquençage par réseau cyclique,
ces plates-formes jouent un rôle crucial en rendant les projets de séquençage du génome entier
moins longs et plus économiques (Mardis, Next-generation DNAsequencing methods, 2008)

Le séquençage de troisième génération

Bien que les technologies susmentionnées aient révolutionné la génomique et permis de
générer des données massivement parallèles, elles ne sont pas encore disponibles. génomique
et ont rendu possible la génération de données massivement parallèles. la volonté d'explorer
des techniques encore plus efficaces a donné naissance aux technologies de troisième
génération. Compte tenu des limites et des biais de la PCR, les technologies TGS utilisent le
séquençage de molécules uniques (SMS). Bien qu'il soit difficile de définir les techniques de
deuxième et de troisième génération, les techniques énumérées ici se sont avérées de lecture,
de faciliter la préparation des échantillons et de réduire la durée et le coût du séquençage. le
temps et le coût du séquençage (Pareek CS, 2011)
5. CHOIX D'UNE STRATÉGIE DE SÉQUENÇAGE
Compte tenu de la croissance rapide des technologies de séquençage, chacune d'entre elles
présentant des avantages et des inconvénients uniques en termes de performance et de coût, il
devient aujourd'hui difficile de choisir la meilleure technologie. de performance et de coût, il
devient difficile de choisir la meilleure technologie pour une application particulière. Les
paramètres à prendre en compte lors du choix d'une méthode de séquençage sont les suivants
[ (Liu, et al., 2012) . (Edwards & Caskey, 1991)] :
a. Longueur des lectures et coût par lecture : La longueur de lecture est le nombre de
bases contiguës séquencées dans un cycle donné. de bases contiguës séquencées dans un cycle
donné. Elle reste l'un des paramètres les plus importants pour la sélection des plateformes de
séquençage. L'augmentation de la longueur de lecture facilite l'assemblage et l'assemblage et
réduit les erreurs d'assemblage, car elle fournit un contexte unique pour les séquences
répétitives. En outre, à mesure que le coût par lecture diminue, le séquençage de lectures plus
longues deviendra plus économique. le séquençage de lectures plus longues deviendra plus
économique
b. Précision brute : Il s'agit d'une mesure importante de contrôle de la qualité dans les
projets massifs de séquençage de l'ADN. dans les projets de séquençage massif de l'ADN. Des
taux d'erreur plus faibles se traduisent par un meilleur assemblage et une séquence finie de
meilleure qualité pour une même couverture.
c. Lectures appariées : Les lectures appariées sont celles qui sont séparées par une
distance connue dans le génome d'origine (Chaisson, Brinza, & Pevzner, 2010 ).Ces lectures
sont cruciales pour l'échafaudage de l'assemblage de génomes de-novo, pour résoudre les
régions répétées et pour de nombreuses autres activités en aval. et pour de nombreuses autres
applications en aval. L'importance de ce paramètre est évidente son implémentation dans
presque toutes les technologies NGS.

12
d. Protocoles de prétraitement : Les protocoles de prétraitement comprennent la
préparation de l'échantillon, la construction de la bibliothèque in vitro, le chargement de
l'échantillon et la maintenance des mécanismes de montée en charge.
Ces protocoles peuvent également inclure l'élimination des séquences de faible qualité,
l'élimination des séquences contaminantes et la suppression des caractéristiques indésirables .
e. Protocoles de post-traitement : Ces protocoles comprennent la création de logiciels et
d'outils en ligne permettant d'assembler d'immenses quantités de données de séquençage à
lecture courte, l'élimination des chimères de contigs et la production de séquences finies,
f.
6. COMPARAISON
Ce tableau présente les principales différences entre les trois générations d'outils de séquençage haut-débit et
présente les améliorations que promet la 3ème génération d'outils de séquençage.

7. CONCLUSION :
Les technologies de séquençage ont facilité un grand nombre d'applications. Indispensables à
la recherche moderne dans de nombreuses sciences de la vie, elles ont permis aux
scientifiques de travailler dans les plus petits échantillons. sciences de la vie, elles ont permis
aux scientifiques travaillant dans les plus petits laboratoires de répondre à n'importe quelle
question posée par la séquence d'ADN.de répondre à n'importe quelle question posée par la
séquence d'ADN. Le séquençage a aidé les scientifiques à extraire des informations

13
génétiques de d'une série d'entités biologiques avec la plus grande clarté. Grâce à la puissance
du Grâce à la puissance du séquençage, il est possible de décoder un génome entier à partir du
plus minuscule des échantillons d'ADN (par exemple, les cellules d'une plante). de prédire
divers attributs d'une crime , de prédire divers attributs d'un fœtus avant qu'il ne naisse, de
détecter des maladies congénitales de détecter des maladies congénitales, d'identifier les
fonctions de chaque partie d'une séquence d'ADN donnée, de comparer différents génomes
entre eux. séquence d'ADN donnée, comparer différents génomes, étudier les modèles
d'évolution, et bien d'autres choses encore. Ces technologies ont également été Ces
technologies ont également été étendues avec succès à des domaines connexes tels que
l'épigénomique, la transcriptomique et la métagénétique, transcriptomique et la
métagénomique (Metzker, 2010). La section suivante décrit certaines des applications de la
technologie du séquençage et séquençage et envisage certaines de ses orientations futures.
(Verma, Kulshrestha & Ayush, 2016)

Figure3 : Comparaison des méthodes de séquençage Sanger, de nouvelle

génération (NGS, next-generation sequencing) et de troisième génération
(TGS, third-generation sequencing)

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