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Analyse chimique et activité antimicrobienne d'un bio-produit cosmétique à

base d'huile essentielle de cannelle "Cinnamomum verum" pour le
traitement des mycoses

Conference Paper · January 2019

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10 authors, including:

Ainane Tarik Nawal Merghoub

ESTK University of Sultan Moulay Slimane Moroccan Foundation for Advanced Research Science and Innovation
138 PUBLICATIONS 626 CITATIONS 20 PUBLICATIONS 523 CITATIONS

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Meriem Elabboubi Sanaa Charaf

Université Hassan II de Casablanca Université Hassan II de Casablanca
6 PUBLICATIONS 61 CITATIONS 6 PUBLICATIONS 61 CITATIONS

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Analyse chimique et activité antimicrobienne d’un bio-produit

cosmétique à base d'huile essentielle de cannelle "Cinnamomum verum"
pour le traitement des mycoses
Tarik AINANE1, Fatima KHAMMOUR2, Nawal MERGHOUB3, Meriem ELABBOUBI2, Sanaa CHARAF2,
Ayoub AINANE2, M’hamed ELKOUALI2, Mohammed TALBI2, El Hassan ABBA1, Sanaa CHERROUD1
1 Ecole Supérieure de Technologie - Khenifra (EST-Khenifra), Université Sultan Moulay Slimane, PB 170, Khenifra 54000 Maroc.

2 Laboratoire de chimie analytique et de chimie physique des matériaux, Faculté des sciences Ben Msik, Université de Hassan II, BP 7955 Casablanca
20660, Maroc.
3
Centre de biotechnologie verte, MAScIR (Fondation marocaine pour la science avancée, l'innovation et la recherche) Rabat centre de design, Rabat,
Maroc.

ARTICLE INFO RESUME

Reçu : 09/06/2018
Reçu sous forme révisée : 09/06/2018 L‘industrie cosmétique est en croissance, chaque consommateur utilise de nombreux
Accepté : 10/06/2018 produits tout au long de la journée, ces produits deviennent plus spécifiques, plus
MOTS-CLES efficaces et plus ciblés dont l’industrie produit des bioproduits au lieu des produits
Bioproduit ; chimique, on parle alors des huiles essentielles qui ont des bienfaits et des activités
Huile essentielle ; innombrable qui les confère l’attitude d’être utilisées pour traiter les mycoses.
Cinnamomum verun ;
Analyse chimique ; L’objectif de ce travail est l’étude de la composition chimique et les activités
Activité antimicrobienne. biologiques d'une formulation cosmétique à base d'huile essentielle de Cinnamomum
Verum (écorce de cannelle). Après l'extraction de l'huile essentielle de cannelle par
hydrodistillation, nous avons analysé tous les constituants de cette huile par GC-MS.
Les résultats de ces analyses ont montré que la composition principale est constituée
de trois composés : le cinnamaldéhyde (89,31%), l'acétate de cinnamyle (2,44%), le
linalol (1,6%). L’autre partie de ce travail visait à étudier les activités antimicrobiennes
dans l'huile essentielle de cannelle en évaluant chacun contre les microbes
mycosiques, puis l'activité antibactérienne a été faite vis-à-vis : Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa et Staphylococcus aureus, et l'activité antifongique a été
faite vis-à-vis la levure Candida Albicans et l’Aspergillus niger. Les données de ces
activités microbiennes ont montré une activité remarquable, ce qui implique
l'utilisation de cette huile dans le traitement des mycoses

1. Introduction Dans le but de régresser l’effet des mycoses, différents

antifongiques sont conçus tel que Le fluconazole,
Contexte
Amphotéricine B et les dérivés Iodés(Contet-Audonneau et
Les mycoses sont des infections dues au développement des
Schmutz 2001), mais la plupart des antifongiques sont
champignons, qui touchent les différentes parties du corps et
potentiellement toxiques et ne sont pas exempts d'effets
engendrent différents types d’infections (superficielles et
secondaires sur l'hôte. Alors les formulations poussent toujours
profondes).
plus loin les frontières de la chimie et de la galénique pour
Les maladies fongiques représentent un problème critique pour
découvrir, chaque jour, de nouvelles présentations.
la santé et ils sont l'une des principales causes de morbidité et
Ces présentations sont sous formes des huiles essentielles qui
de mortalité dans le monde entier(Jamalian et al. 2012).
se caractérisent par ses différentes activités (antifongiques,
Problématique et questions scientifiques associées
antimicrobiennes, antioxydantes) et l’absence d’effets

* auteur correspondant : Tel.: +212 (0) 6 34 576 500.

E-mail : ainane@gmail.com
123 BIOSUNE’1-2018
secondaires. De plus, les plantes sont très abondantes et
accessibles
Les huiles essentielles font l'objet d'une recherche scientifique
intensive et attirent l'attention des industries cosmétiques et
pharmaceutiques en raison de leur potentiel en tant que
composés pharmacologiques actifs ou conservateurs naturels.
La diversité énorme de ce groupe de composés normaux et le
large éventail de propriétés biologiques les rendent attrayants
pour beaucoup d'industries
Objectifs scientifiques et/ou techniques
L'objectif de ce manuscrit est de donner une étude chimique et
biologique sur l'huile essentielle de Cinnamomum Verum,
d'intérêt industriel dans les préparations cosmétiques. Plus
précisément, ce travail repose sur l'identification des composés
chimiques de cette huile essentielle par chromatographie en
phase gazeuse couplée à la spectrophotométrie de masse GC-
MS et la réalisation d'activités antimicrobiennes par des tests
antibactériens contre Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa et Staphylococcus aureus et des tests antifongiques
contre Candida Albicans et Aspergillus niger.
Revue / SYNTHESE bibliographique
Différentes études avait comme objectif l’étude de la
composition chimique et les différentes activités d’huile
essentielle de Cinnamomum Verum.
Le cinnamaldéhyde était le composant le plus abondant de
cette dernière, dont cette huile présente une plus forte activité
contre (Trichophyton rubrum, T. mentagrophytes, T. tonsurans,
Microsporum canis, M. gypseum et M. audouini), un
champignon filamenteux (Aspergillus fumigatus) et 5 souches
de levures (Candida albicans, Ca. glabrata, Ca. tropicalis, Ca.
parapsilosis et Crytococcus neoformans) avec des valeurs de
concentration minimale d'inhibition (MIC) allant de 0,04 à 0,31
mg / ml,
Elle est caractérisée par une grande activité antibactérienne
contre les bactéries cariogènes, S. mutans et S. sobrinus.
Notre travail vient pour confirmer ces résultats et étudier
l’activité antifongique et antibactérienne contre des
champignons responsable de mycoses.
2. Matériels et méthodes
2.1. Matériel végétal : Extraction et analyse des huiles
essentielles
L'écorce de la plante Cinnamomum Verum a été achetée sur le
marché local de Khenifra (Maroc) et identifiée au département
de génie de l'environnement (EST-Khenifra, Université Moulay
Ismail). Des spécimens de référence des plantes ont été séchés
et déposés à l'herbier de laboratoire. Après cette étape, une
plante séchée a été soumise à une distillation à la vapeur dans
un appareil de type Clevenger pendant 3 h et l'huile essentielle
obtenue a été séparée de l'eau et séchée sur Na2S04 anhydre
puis stockée à 4 ° C jusqu'à utilisation.
L'analyse des huiles essentielles est réalisée par
chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie
de masse GC-MS (Hewlett Packard 5971A). La détermination des
proportions relatives de diverses molécules est obtenue par
Ainane et al.
chromatographie en phase gazeuse couplée à une ionisation de
flamme (GC-FID). L'analyse par GC-MS et GC-FID est effectuée
dans des conditions identiques. La GC-MS a été réalisée sur une
colonne DB-5 (5% de Phénylméthylsiloxane) dont les dimensions
sont: longueur: 30 m; diamètre: 250 μm; épaisseur du film 0,32
microns. Le programme de température appliqué était de 40 ° C
pendant 5 minutes, de 40 à 200 ° C à 3 ° C / min puis maintenu à
200 ° C pendant 5 minutes. Le gaz porteur était de l'hélium
(pression : 49,9 kPa, débit : 1 ml / min). La source du
spectromètre de masse à une température de 230 ° C et la
gamme de masse est balayée de 50 à 350 uma. L'identification
des composants était basée sur deux processus. Première
méthode: sur la comparaison de leurs indices de rétention GC
(RI) sur des colonnes non polaires et polaires, déterminés par
rapport au temps de rétention d'une série de n-alcanes avec
interpolation linéaire, avec ceux de composés authentiques ou
de données littéraires. Et une seconde méthode sur
l'appariement par ordinateur avec les bibliothèques spectrales
de masse commerciales et la comparaison des spectres avec
ceux de notre bibliothèque personnelle. Les quantités relatives
des composants individuels ont été calculées sur la base de leurs
aires de pic GC sur les deux colonnes capillaires Rtx-1 et Rtx-
Wax, sans correction du facteur de réponse FID.
2.2. Évaluation de l'activité antimicrobienne
L'huile essentielle de Cinnamomum Verum a été testée contre
cinq micro-organismes, dont deux bactéries à Gram négatif :
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, une bactérie à Gram
positif, Staphylococcus aureus, la levure Candida Albicans et la
moisissure Aspergillus niger. Les spores de la moisissure ont été
récoltées dans de l'eau distillée stérile à partir de cultures
monoclonales, développées sur du dextrose de pomme de terre
à 24 ° C pendant 7 jours. Les concentrations inhibitrices
minimales (CIM) de l'huile essentielle ont été déterminées pour
tous les micro-organismes testés en utilisant la méthode de
microdilution en bouillon. [18-20] Des échantillons microbiens
ont été préparés par dilution avec des milieux de croissance
pour obtenir des inoculum à 105 unités formant des colonies
(CFU) par ml de culture. Les cultures d'essai ont été réalisées
dans un bouillon de Muller Hinton pour les bactéries, ou dans un
bouillon de dextrose Sabouraud pour Candida Albicans ou
Aspergillus Niger. Les milieux de culture ont été complétés avec
0,5% de Tween-20. Des échantillons de l'huile essentielle ont été
préparés par différentes dilutions dans du DMSO, et testés à
une concentration finale allant de 0,5 à 5 μg d'huiles par ml de
culture. La croissance microbienne a été autorisée dans des
plaques de microtitration à 96 puits en distribuant dans chaque
puits 180 μL de culture microbienne et 20 μL d'échantillon
d'huile essentielle à diverses concentrations. La quantité finale
de DMSO, étant inférieure à 4%, était sans effet d'inhibition de
la croissance. Des échantillons de blanc ont été préparés pour
tous les extraits en ajoutant 20 μL d'échantillon d'huile
essentielle à 180 μL de milieu de culture Mueller Hinton (ou
Sabouraud dextrose). Les plaques ont été incubées à 37 ° C, 24
h pour les bactéries et 48 h pour Candida Albicans ou Aspergillus
Niger. Les antibiotiques, la tétracycline et la pénicilline ont été
utilisés comme témoins positifs contre les bactéries et le
124 BIOSUNE’1-2018 Ainane et al.
chloramphénicol et l'Amphotéricine B pour Candida Albicans et
Aspergillus Niger, respectivement. La viabilité des Pic Composé %
microorganismes examinés a été évaluée en mesurant 1 α-pinene 0.37
l'absorbance des cultures à 600 nm contre le bouillon de 2 camphene 0.12
Mueller Hinton ou de Sabouraud dextrose, en utilisant un 3 benzaldehyde 0.24
spectrophotomètre Multiscan (spectrophotomètre scientifique 4 β-pinene 0.15
Thermo-Fisher). Les tests ont été réalisés en triple et répétés 5 myrcene 0.05
deux fois. L'inhibition de la croissance microbienne a été 6 α-phellandrene 0.01
exprimée en termes de pourcentage selon l’équation : 7 α-terpinene 0.03
 A  Ablanc  8 p-cymene 0.02
% Inhibition  1   séchantill on   100 9 β-phellandrene 0.23
  Acontrole  10 linalool 1.60
11 2-ethenyl-3-methyl phenol 0.01
• Aéchantillon : absorbance de l'échantillon d'essai de culture ;
12 borneol 0.01
• Ablanc: absorbance de l'échantillon d'extrait dans le bouillon
nutritif ; 13 terpinen-4-ol 0.02
• Acontrôle: l'absorbance du contrôle de culture. 14 α-terpineol 0.01
15 cinnamaldehyde 89.31
16 δ-elemene 0.33
17 α-cubebene 0.12
3. Résultats et discussions
18 eugenol 0.39
Dans une enquête menée sur le traitement des mycoses, les 19 ethyl 3-phenyl-propan-1-ol 0.05
patients sont de moins en moins confiants dans leurs
20 cinnamyl acetate 2.44
traitements médicamenteux. Ils souhaitent de plus en plus
21 α-humulene 0.01
savoir tout sur ce qu'ils vont consommer, mais aussi se tourner
22 δ-cadinene 0.01
plus facilement vers des formulations naturelles vendues chez
23 bicyclogermacrene 0.01
les herboristes, en effet, plus de 80% des Marocains font
24 benzyl benzoate 0.01
confiance à la phytothérapie. Les huiles essentielles, secrétées
naturellement par les plantes, pour le protéger, ou pour le
rendre attractif, répondent parfaitement à leurs attentes : les Tableau 2. Activités antimicrobiennes de Cinnamomum Verum
domaines d'utilisation sont variés, les produits vendus en Huile essentielle.
cosmétologie sont aléatoires, et le coût, qui dépend de la
composition, n'est pas excessif. Dans la deuxième enquête, H.E ou MIC (μg/mL)
nous avons mené une étude sur des dizaines de produits composé E.coli P. S. C. A.
cosmétiques dans différentes régions du Maroc, la plupart de aerugin aureus albica Niger
ces produits sont donc des formulations à base d'extraits de osa ns
plantes, en particulier l'huile essentielle de cannelle. Cette H.E de C. 265.44 335.34 576.71 231.37 119.26
étude a donc été réalisée afin d'évaluer les propriétés Verum ±53.56 ±68.06 ±112.52 ±51.03 ±25.78
antimicrobiennes d'une huile essentielle d'écorce de Tetracycl 0.86±0 0.94±0. 0.85±0 n.t n.t
Cinnamomum Verum sur des souches responsables de ine .29 31 .34
mycoses. Penicillin 0.66±0 0.87±0. <0.05 n.t n.t
L'huile essentielle (tableau 1) montre la composition chimique .23 37
de l'huile essentielle de l’écorce de Cinnamomum Verum. La Chloram n.t n.t n.t <0.05 0.75±0
composition de l'huile essentielle de Cinnamomum Verum est phénicol .22
très variable, en fonction de la localité de croissance et de Amphote n.t n.t n.t 0.75±0 3.13±1.
l'organe utilisé. Cependant, beaucoup d’articles rapportent ricin B .15 06
l'eugénol comme composant principal de l'huile des feuilles et
du cinnamaldéhyde pour l'huile de l'écorce. [21-25] Ceci est en CMI : Concentration minimale inhibitrice, valeurs données en μg
accord avec l'échantillon utilisé dans cette étude / mL.
(cinnamaldéhyde = 89,31%), d'autres constituants importants n.t : non testé.
présents dans une concentration intéressante étaient l'acétate
de cinnamyle (2,44%) et le linalol (1,6%). L'activité antimicrobienne de l'huile essentielle a été étudiée
contre 3 bactéries et 2 espèces de champignons, en utilisant des
méthodes MIC. L'huile essentielle a montré une forte activité
Tableau 1. Constituants identifiés dans les huiles de antimicrobienne contre tous les microorganismes testés
Cinnamomum verum (Ecorce). incluant trois bactéries et deux espèces de champignons
125 BIOSUNE’1-2018
comme indiqué dans le tableau 2. Elle était très efficace contre
les bactéries Gram-positives Staphylococcus aureus et les
bactéries Gram-négatives Escherichia coli et Pseudomonas
aeruginosa.
Des études généralisées ont démontré l'efficacité de produits
naturels tels que les huiles essentielles végétales pour réduire
les dommages des bactéries et des champignons responsables
de la mycose. Leur recherche a recommandé l'application
d'huiles essentielles végétales comme une bonne alternative
aux traitements chimiques. Nos résultats indiquent une activité
antimicrobienne acceptable de l'huile essentielle de
Cinnamomum Verum. A notre connaissance, l'activité
antimycotique de Cinnamomum Verum contre les bactéries et
champignons pathogènes n'a jamais été rapportée, mais
plusieurs travaux antérieurs ont étudié l'activité de cette huile
sur les mêmes souches, c'est-à-dire que l'application médicale
n'a pas été faite . [26-30] Plusieurs facteurs, tels que la structure
chimique, le composé biologique actif, la concentration d'huiles
essentielles et le type de micro-organismes jouent un rôle
important dans l'efficacité des huiles essentielles. Les analyses
GC-MS de l'huile essentielle de Cinnamomum Verum ont montré
que différents composés tels que le cinnamaldéhyde (89,31%),
l'acétate de cinnamyle (2,44%), le linalol (1,60%) constituaient la
majeure partie de l'huile (93,35%). La capacité chimique de
l'huile essentielle de Cinnamomum Verum a été démontrée par
l'existence de ces trois composés qui présentaient une activité
antimicrobienne.
De tels résultats ont été observés dans les travaux de Didry et
al. (1994), [31] dans laquelle le cinnamaldéhyde avec trois autres
composés : eugénol, thymol et carvacrol, également l'effet
synergique avec certaines combinaisons de ces composés
présente une activité inhibitrice sur les micro-organismes oraux
tels que : Streptococcus sp., Peptostreptococcus sp. et
Prevotella sp. Aussi le travail de Chen et al. (2015) [32] qui ont
montré une activité inhibitrice du cinnamaldéhyde avec
Carvacrol et lauroyl arginate contre Salmonella Tennessee dans
les infections intestinales. De nombreuses publications ont
rapporté la capacité antimicrobienne des huiles essentielles
riches en cinnamaldéhyde, en particulier les mêmes espèces de
Cinnamomum sp. [33-40]
4. Conclusion
Notre travail s’est focalisé sur l'utilisation de l'huile essentielle
de Cinnamomum verum pour le traitement des mycoses. Au
cours de ce travail nous avons effectué une analyse chimique de
cette huile par GC-MS qui a confirmé la présence de
cinnamaldéhyde comme composés majeurs, présente
également une valeur ajoutée dans les préparations
pharmaceutiques et cosmétiques selon leur importance de
l'inhibition de plusieurs bactéries pathogènes et champignons.
D'autre part, nos résultats d'activités antibactériennes contre
trois bactéries et deux champignons (Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida
Albicans et Aspergillus niger) ont montré l'efficacité de cette
huile essentielle et la confirmation de plusieurs travaux
Ainane et al.
antérieurs, ce qui explique l'utilisation de l'huile essentielle
Cinnamomum verum dans les préparations cosmétiques, en
particulier le traitement des mycoses.
En termes de perspectives, l’étude de cette huile essentielle
peut être développée en étudiant son effet envers d’autres
maladies.
Remerciements
Remercier ici tous les organismes et toute personne ayant
contribué selon vous aux travaux que vous avez réalisés
(contributions financière, matérielle ou intellectuelle, relecture
du papier…). Bien distinguer les personnes à remercier le cas
échéant et les co-auteurs (voir rubrique « Auteurs » ci-dessus).
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