PUCES A ADN

Réalisé par:
AZALIM Mina
MOUINE Hanane
BERNANE Sokaina
EL KHATIBI Fatima-Ezzahra
Encadré par:
Mme. EL BLIDI

2018/2019
PLAN:
1- Introduction (historique)
2- Définition
3- Types
4- Les étapes de construction et
Fonctionnement
5- Domaines d’utilisation (exemples)
6- Les avantages et les inconvénients
7- Conclusion (perspectives)
Historique :
 La technologie des puces à ADN est basée sur le
principe d’hybridation développé par southern (1974).

 Leur concept date de 1987 « suite logique aux

anciennes méthodes de northern blotting ».

 Les premières puces à ADN sont apparues en 1993.

Qu’est ce qu’une Puce à ADN?
 Une bio puce, puce à ADN, est un ensemble de molécules d'ADN
fixées en rangées ordonnées sur une petite surface qui peut être
du verre, du silicium ou du plastique

 Puces à ADN sont des multi capteurs permettant de caractériser

et quantifier un acide nucléique dans un échantillon.

 Elles permettent la caractérisation génomique rapide de bactéries

pathogènes et facilitent les études épidémiologiques.
Types:
Les étapes de construction
& Fonctionnement
 Les étapes de construction
& Fonctionnement

SONDE :
1-Les fragments d'ADNc amplifiés par la technique de PCR sont
déposés sur une lame de verre.

2-L’ADN est lié de manière covalente au support par une

exposition aux UV.
 Les étapes de construction
& Fonctionnement

Préparation de la cible :
1- Les ARNm sont extraits des deux cultures dont on veut comparer leurs
expressions.
2- Les ARNm sont ensuite transformés en ADNc monocaténaires par
transcription inverse RT-PCR.
3- L’ADN de la première culture est marqué avec un fluoro-chrome vert, et
l'ADN de la seconde culture est marqué en rouge.
4- Mélange des deux ADNc (vert et rouge) : c’est la cible.
 Les étapes de construction
& Fonctionnement
Hybridation :
1-Le mélange est placé sur la sonde pour que l’hybridation ait lieu.
2-La puce est alors incubée une nuit à 60 degrés.
3- A cette température, un brin d'ADN qui rencontre son complémentaire
s'apparie pour donner de l'ADN double brin.
 Les étapes de construction
& Fonctionnement

Analyse des données :

1- La puce est placée sous un scanner électronique.
2-les intensités sont analysés par des logiciels sur ordinateur.
3-Superposition des images vertes et rouges.
5-On calcule le ratio des intensités= fluorescence rouge /
fluorescence verte.
 Les domaines d’utilisation :

La cancérologie

Criblage des médicaments

 Les domaines d’application

L’agriculture &
l’agroalimentaire

L’environnement :

Guerre biologique
& chimique
 Avantages :

 Étude simultanée des profils d’expression de plusieurs

milliers de gènes.

 Les données sont cumulables.

 Les groupes de gènes affichent des comportements

identiques dans une situation biologique donnée.
 Inconvénients

o La technique est assez lourde à mettre en place.

o L’équipement de départ est d’un coût relativement élevé.

o Le grand nombre de résultats obtenu très rapidement

nécessite un traitement informatique et statistique non
négligeable.
CONCLUSION
Références
http://www.ipubli.inserm.fr/bitstream/handle/10608/552/MS_1997_
11_1317.pdf?sequence=7&isAllowed=y

http://www.afhalifax.ca/magazine/wp-
content/sciences/PuceADN/microarray-WLin-2004.pdf

https://nhtuong.files.wordpress.com/2008/03/puce-a-adn.pdf

https://www.gazettelabo.fr/archives/pratic/1999/36puces.htm

https://www.youtube.com/watch?v=VNsThMNjKhM

Illustration par vidéo :

https://www.youtube.com/watch?v=0ATUjAxNf6U