Spectrométrie RMN

Présenté par: Dr Benabdallah Imene

Encadré par: Pr Rezk-Kallah.H
Pr Abourejal. N
2eme année post-graduation Dr Chebaiki. I
2022-2023
 plan
INTRODUCTION

PRINCIPE

INSTRUMENTATION

ANALYSE RMN

APPLICATION

AVANTAGES ET LIMITES

CONCLUSION
 Introduction

La RMN est une méthode spectroscopique d'analyse de la matière, fondée

sur les propriétés magnétiques de certains noyaux atomiques ayant un
spin non nul. L'échantillon à étudier, placé dans un champ magnétique
très intense, acquiert une aimantation nucléaire qui est détectée par sa
mise en résonance avec un champ élecromagnétique.
 Principe

Spin:
C’est une grandeur vectorielle
associée à la rotation des noyaux
sur eux mêmes.
Il peut prendre des valeurs entières
ou demi-entières : 0, 1/2, 1 et 3/2
pour les noyaux les plus courants
1H ; 13C ; 19F ; 31P.
Les noyaux de spin nul sont
inexploitables en RMN.
 Principe
Moment magnétique µ:
Soumis à un champ magnétique
intense appelé B0, les spins
s'orientent dans l'axe du
champ, soit :
Dans le même sens de l’axe B0
« parallèle » ;basse énergie
Dans le sens contraire
« antiparallèle »; haute énergie.
Principe

En apportant de l’énergie sous

forme de radiofréquence
RF(rayonnement
élèctromagnétique) les spins sont
animés d'un mouvement de
précession autour de l'axe de B0, tel
une toupie autour de la verticale,
avec une pulsation propre ω0
proportionnelle à l'intensité B0.
 Principe
La résultante de l'ensemble des moments magnétiques est
une aimantation M alignée suivant B0, aimantation M
est mesurée par RMN car elle est proportionnelle au
nombre de noyaux présents
 Principe
-Or, elle ne peu être détectable, sauf si elle est
basculée à 90°
-Donc on applique ensuite un champ B1 dans
une direction perpendiculaire à B0.
-Les moments magnétiques subissent maintenant
l'action de la résultante B0 + B1 qui a pour effet
de déplacer M autour de l'axe de B1

On coupe le champ B1, et l'aimantation M tend

à retrouver sa position initiale en présence de
B0 seul.
-Retour à l'équilibre qui s'accompagne d'une
émission d'onde électromagnétique que l'on
peut détecter :
c'est le signal de RMN.
Instrumentation
 Console:
contrôler la sonde
Envoyer la radio fréquence
pour exciter l’échantillon
Réceptionner le signal
d’émission envoyé par la
sonde

Ordinateur:
Lié à la console via Aimant
connexion ethernet supraconducteur
Envoie des commandes
pour controler
l’aimantation du noyau
choisi
Préamplificateur:
Pour éviter toute pertede
signal
Lié à sonde
 Dispositif où on insère le
tube à RMN contenant
l’échantillon

Pour éviter
l’évaporation de He

Sonde, exciter les spins,

détecter le signal RMN
Conserver le courant
élèctrique

Assure la production d’un

champs magnétique ≈ 22
Tesla

Aimant supraconducteur
 Analyse RMN

Préparation de L’échantillon:
Liquide (urine, sérum…) ne nécessite pas un traitement préalable
Solide: doit être solubiliser dans un solvant Deutéré adéquat
Le volume à introduire dans le tube à RMN est de 600 µl
(correspond à une hauteur de 4 cm sur le tube)
Un solvant deutéré , solvant dont les proton H1 sont remplacés
par le H2, ne donne pas de signal lors de la mesure.
CDCl 3, CD3OD, d6-DMSO, D2O
 Analyse RMN

Lecture du Spectre RMN:

Le signal réceptionné par la console est ininterprétable,
Traduit en un spectre lisible par la Transformée de Fourier
 Analyse RMN
Lecture du Spectre RMN:

L’énergie nécessaire pour faire résonner un

proton dépend de son environnement
moléculaire.
2H du même environnement moléculaire:
(situés à la même distance de tous les
atomes de la molécule): résonnent pour une
même énergie Pour une molécule=
différents environnements
moléculaire = différents
niveaux énergitiques
L’environnement moléculaire est
convertie en une grandeur:
Déplacement Chimique (ppm)

Chaque déplacement est

représenté par un signal : Massif

Chaque massif contient un

certain nombre de pics

Les pics sont obtenus par la règle de Comparaison avec des

Multiplicité n+1 (n: nbr de H portés tables de déplacements
par le C voisin) chimiques
 Applications
Les applications de la RMN sont diverses et incluent les domaines de recherche et industriels

Indus
Biologie
Prot, lipid, Ac
pétrol nucl

Pureté, impurté, Chimie

Indus
Qt des PA, des pharm Science des
excipients polymères

Toxico
Médecine
IRM, tissus
endommagés
 Applications
Applications en Toxicologie:
Le paracétamol constitue un très bon exemple d'application de la RMN du proton. Les différents catabolites
de cette substance : dérivés glucuronoconjugués, sulfatés, N-acétyl-cystéinyl et cystéinyl sont détectés dans
l'urine de sujets intoxiqués et les proportions de ces divers catabolites ont pu être évalués
 Applications
Applications en Toxicologie:

Le RMN a quantifié de l’acide salycilique et ses métabolites

l’acide salicylique urique (a) et l’acide gentisic (b) dans les
urines
 Applications
Applications en Toxicologie:

Détection de l’acide valproïque et son

métabolite, valproïque glucuronide dans les
urines
 Applications
Applications en Toxicologie:

Identification des NPS (nouvelles substances psychoactives):

RMN a permis l’identification de 7 NPS, impliquées dans un cas
d’intoxication mortelle:
Il s’agit de:
4-Chloro-alpha-pyrrolidinopentiophenone ,
Dibutylone ,
-4-Chloroethcathinone ,
4-Alpha-pyrrolidinohexuiphenone ,
3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone ,
3-Methoxy-phencyclidine
Alpha-pyrrolidinopropiophenone
Dibutylone

4-Chloro-alpha-
pyrrolidinopentiophenone ,

4-Chloroethcathinone
 Avantage et limites
-Manque de sensibilité:
concentration de 50-100 µM est
requise
-Technique onéreuse
-Ne demande pas de préparation d'échantillons, -Installation délicate
-Très rapide -Non sélective
-Permet de déterminer la structure
précise
-Quantifier les molécules responsables d'une
intoxication et leurs métabolites
-La détection de composés de faible poids
moléculaire comme les acides formique ou
glycollique,
 conclusion

La RMN sert principalement pour la détermination structurale de composés moléculaires

chimiques.
Elle précise la formule développée et la stéréochimie des molécules. Elle revêt une
importanceparticulière en chimie organique, en biochimie et en chimie macromoléculaire
(polymères, gels, matériaux).
Elle a fait également ses preuves dans la caractérisation de molécules biologiques
etminérales (verres, céramiques…) et a trouvé des applications dans les domaines agro-
alimentaire (contrôle de qualité) et pharmaceutique.
Enfin, l'imagerie médicale RMN (dite IRM), connue du grand public, ainsi que la RMN in
vivo se développent fortement aujourd'hui.
 Références bibliographiques
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