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Dveloppement animal et vgtal

TD1 Dveloppement des ailes de la drosophile


On s'intresse dans ce TD la mtamorphose: Mtamorphose complte : insecte holomtabole, la larve se nourrit de choses compltement diffrentes quand elle devient adulte (cest le cas de la drosophile) Mtamorphose incomplte

Aprs l'embryon, on obtient une larve acphale, la larve grandit pour arriver la formation d'une pupe (nymphe) qui sous linuence de l'ecdysone va subir la mtamorphose Dans la nymphe, il y a des disques imaginaux d'origines ectodermiques, il y en a pour chaque organe (2 pour les antennes, 2 pour les yeux, 2 pour les glandes salivaires, 2 pour les ailes, 2 pour les ailes...) en tout 9 paires de disques imaginaux 2 grosses tapes pour transformer les disques imaginaux en organe (les ailes en loccurrence): L'version: on forme une espce de bouton Une phase d'allongement : on aura une face ventrale et dorsale, donc l'aile a 2 pithliums colls l'un l'autre
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Il y a 3 axes qui vont dnir l'aile: " - L'axe dorso-ventral (partie ventrale et la partie de l'aile appose l'abdomen) " - L'axe proximo-distal (la base de l'aile qui est attache au thorax est la partie proximale) " - L'axe antro-postrieur (partie antrieure et celle qui porte la soie) Ces 3 axes se mettent en forme en mme temps Expriences de Hadorn: Il prend des disques imaginaux alaires et on les transplante dans une drosophile adulte, mais rien ne se passe, les disques restent l'tat indiffrenci Il prend des disques imaginaux et les transplante dans une larve, cette fois-ci, les organes surnumraires se dveloppent (4 paires d'ailes), il fait un signal pour que ces disques se diffrentient Ces disques ne se diffrentient pas n'importe ou. Chez l'adulte, la paire d'ailes est porte par le deuxime segment thoracique (segment T2). Le segment T2 provient des parasegments 4 et 5 (postrieur 4, antrieur 5) Dans le segment T2, il y aura une srie de gnes durant le dveloppement embryonnaire: " Gnes maternels effets maternels " Gnes zygotiques (GAP, pair rules) Aprs lexpression des gnes GAP et pair rules, il y aura lexpression des gnes didentits segmentaires et des gnes homotiques (gnes Hox 8 gnes). Les gnes Hox sont tous sur le mme chromosome (3) et sont organiss en 2 complexes: " - Complexe antnnapedia " - Complexe bithorax (3 gnes) : le gne Ubr (ultrabithorax), il contrle l'identit des " segments dans les 2 segments abdominaux Le mutant bithorax: on a une substitution du balancier par une partie antrieure d'aile Le mutant postbithorax: forme dans le compartiment postrieur de T3, la portion postrieure de laile Le mutant bithorax + postbithorax aura des ailes surnumraires (2 paires d'ailes) Le mutant contrabithorax : partie postrieure de l'aile devient partie postrieure altre (balancier) Les gnes d'identit segmentaire: engrailed (en) et wingless (wg) Engrailed : c'est un facteur de transcription. Il sexprime dans la partie postrieure du disque imaginal Mthode de recombinaison mitotique pour teindre le gne engrailed uniquement dans le disque et non pas dans toute la larve. Le systme ne marche que si on parle de drosophile homozygote pour engrailed. Il faut pour cela ouvrir la larve, et irradier avec un n pinceau une
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partie du disque, il y aura des recombinaisons mitotiques surtout dans les cellules irradies et certaines cellules lles n'auront plus l'allle engrailed. On aura sur certaines parties des dfauts d'expressions. Il y aura une partie d'aile normale et une autre partie d'aile qui se dveloppe, il y aura une nouvelle frontire antro-postrieure qui se dveloppe On en dduit que le gne engrailed est impliqu dans le dveloppement de la partie postrieure. C'est un gne slecteur qui imprime la position postrieure au niveau de l'aile Engrailed va aller dans le noyau pour activer un autre facteur hedgehog (hh) Hedgehog sexprime normalement sur le pourtour du disque imaginal, mais on va le forcer s'exprimer dans la partie postrieure : ipout cassette, pour se faire, on injecte des vecteurs (plasmides) Il faut un systme pour visualiser la protine. Pour cela on met un deuxime plasmide qui va permettre de faire dmarrer le systme plus haute temprature, c'est le contrle idal qui permet de voir la mtamorphose. Aprs augmentation de la temprature, un fragment d'aile surnumraire va apparaitre avec 2 rgions antrieures Hedgehog va activer son tour decapentaplegic (dpp) (activation indirecte), mais de son cot engrailed va inhiber l'expression de dpp dpp va permettre d'activer d'autres molcules qui vont former des gradients: omb et spalt. Ceci permet, de dlimiter un patron interveine (L1) (L2) (L3) (L4) (L5) (futures veines dans les ailes de la drosophile) Pour l'axe dorso-ventral: Cot dorsal: gne slecteur (apterous) va induire serrat et fringe qui diffusent, elles sont des ligands pour le rcepteur notch Cot ventral: il y a un autre ligand de notch (delta) produit par un autre mcanisme. Le fait d'avoir ses ligands sur la partie dorsale, cela bloque le signal de transduction de notch. Fringe diffuse la frontire et favorise l'interaction notch delta ce qui va produire wingless Pour l'axe proximo-distale: Partie distale: wingless va activer un certain nombre de gnes vestigial (Vg...) Partie proximale: c'est ddp qui sera important, il va agir sur des rcepteurs de types EGF qui activent des gnes de la charnire

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