Leçon 9: Les Mitochondries

1
 Objectif de la leçon.

Connaître la structure et les rôles de la mitochondrie

2
 1. Structure de la mitochondrie
- Organites cytoplasmiques à double membrane, semi-autonomes;
- Principale fonction : production d’énergie;
- 1 000 à 2 000 /cellule, jusqu’à 25% volume total,

3
La présence d’une
membrane interne
permet de séparer deux
compartiments dans la
mitochondrie:

Matrice Crêtes Membrane Espace inter- Membrane

- La matrice : milieu interne membranaire externe

intérieur de la
mitochondrie
- L’espace
intermembranaire
4
 2. Composition chimique de la membrane externe
Très perméable grâce à la présence de porines qui permettent le passage
des molécules de masse moléculaire inférieure à 10kDa. Ce qui fait que la
composition de l’espace intermembranaire est similaire à celui du cytosol.
- Des perméases
 Les porines
Environ 30 kDa, protéines à feuillets β.
La protéine la plus abondante de la membrane externe, également appelée VDAC (Voltage
Dependant Anion Channel).
Elles réalisent le transfert de molécules hydrophiles jusqu’à 10 kDa, le transfert du pyruvate,
de l’ADP, de l’ATP.
Elles interagissent avec les protéines MAP2 (Microtubule Associated Proteins).
Déplacement des
mitochondries sur le
système
microtubulaire 5
 Des transférases pour les acides gras
 Des transférases pour les acétyl-CoA
 Des transférases pour les protéines

- DES PROTÉINES RÉCEPTRICES

6
 3. Composition de l’espace intermembranaire

- composition en ions et petites molécules identique à celle du

hyaloplasme;
- contient les protons qui proviennent de la chaîne respiratoire
mitochondriale ;
- contient le cytochrome C qui circule entre les deux
membranes.
Cependant la composition de l’espace intermembranaire est
différente de celle de la matrice mitochondriale.

7
 4. Composition chimique de la membrane interne

C’est une membrane de faible fluidité, imperméable, ayant de

nombreux systèmes de transport actif.

Contient plus de protéines que la membrane externe.

Dépourvue de cholestérol mais riche en cardiolipine

(diphosphatidyl-glycérol).

Riche en transporteurs et complexes protéiques enzymatiques.

8
 4. Composition chimique de la membrane interne

Les complexes enzymatiques de la chaîne respiratoire

permettant la réalisation des réactions d’oxydation de la chaîne

de transport des électrons.

Contient l’ATP synthase qui fabrique l’ATP dans la matrice et les

complexes de transport : TIM 23, TIM 22 etc qui permettent

l’entrée et la sortie des métabolites.

9
 5. Composition chimique de la matrice
 protéines des 3 grands complexes de production de molécules
énergétiques.

- oxydation du pyruvate glucose AcétylCoA

- oxydation des acides gras AcétylCoA
- cycle de Krebs FADH2, NADH, CO2

 plusieurs copies identiques du génome de l’ADN mitochondriale

(ADNmt)

 des ribosomes mitochondriaux (mitoribosomes)

 des ARNt

 enzymes nécessaire à l’expression du génome mitochondriale

 globules lipidiques 10
 En MO : éléments filamenteux ou granulaires

DAPI :ADN
Phaloïdine : microfilaments
Mitochondries

Nombre
Aucune : réticulocytes, hématies
Quelques unes : spermatozoïdes
Nombreuses : fibres musculaires
Très nombreuses : ovocyte forme position

Localisation :
Entérocytes : pôle apical aspect filamenteux
pôle basal aspect granulaire
Cellules tubulaires rénales
11
Cellules musculaires
Répartition - uniforme dans le cytoplasme
- selon la fonction de la cellule
III- muscle : en regard des myofibrilles
Besoins énergétiques locaux,
tubules rénaux : région basale de la cellule

mitochondries

flagelle
myofibrilles

Muscle cardiaque Queue du spermatozoïde

Les mitochondries sont associées aux microtubules 12

Mouvements incessants : kinésines, dynéines
Les mitochondries sont déplacées par la dynéine ou la kinésine selon le
sens du déplacement sur le microtubule.

10 min
Le mouvement des mitochondries dépend du cytosquelette.
Il cesse au cours de la division cellulaire.
Dans certaines cellules, les mitochondries sont immobiles (spz).
13
 Mitochondries :
- organites mobiles, souples
- changent de forme constamment
- fusionnent les unes avec les autres
- se séparent à nouveau

Modifications rapides de formes d’une mitochondrie en 20 mn

14
 6. Mort des mitochondries
Renouvelées 15 fois en 150 j (cellules hépatiques)
Signal : - absence de fusion
- fission

Mito autosome lysosome

Les mitochondries endommagées permettent une libération de protéines

qui sont un signal de reconnaissance pour un autosome

Mort sélective par autophagie

15
 7. Fonctions de la mitochondrie
7.1. Respiration cellulaire

Dans la cellule, il ne peut y

Matières alimentaires
électrons riches en énergie
Gradient électrochimique
Transmembranaire de protons (H+)
Transport membranaire actif
avoir de vie cellulaire sans
énergie.
Les mitochondries sont des
organites cellulaires spécialisés
dans l'extraction de l'énergie
chimique contenue dans les
liens chimiques des molécules
combustibles comme le
glucose et dans le transfert de
cette énergie dans une autre
molécule = l’ATP.
Synthèse d’ATP
16
  Les glucides
Il y a environ 30 étapes biochimiques pour oxyder le glucose.

C6H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O

- respiration anaérobie : cytoplasme

1 Glucose 2 pyruvates
1 (C6) 2 (C3)

2 ATP

Les mitochondries permettent de réaliser une oxydation complète de

la matière organique, en conditions aérobies (présence de O2).
Cette oxydation débute dans le cytosol pour les glucides.
17
Les hexoses (dont le glucose) sont partiellement oxydés en
pyruvate lors de la glycolyse.
Des transporteurs de la membrane interne permettent l’entrée
du pyruvate dans la matrice mitochondriale.
Il y subit tout d’abord une décarboxylation oxydative
conduisant à la formation d’un acétyl-COA et d’un NADH,H+.
L’acétyl-COA permet l’alimentation du cycle de Krebs, qui
achève l’oxydation grâce à une double décarboxylation
couplée à la formation de 3 NADH,H+ et d’un FADH2 par
groupe acétyl.
Un GDP est de plus phosphorylé en GTP.
18
 - Respiration aerobie : matrice mitochondriale

2 pyruvate + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O

2 Pyruvate (3C)
+ O2 - O2
Respiration aérobie Cytosol

2 Pyruvates Acide
lactique
Respiration anaérobie
30 ATP

19
 Les acides gras : β oxydation (hélice de Lynen)

1 Triglycéride 3 Acyl-CoA +glycérol

Carnitine = transporteur des Acyl-CoA à

Membrane ext mito travers la membrane interne

Hélice de Lynen

Matrice

20
Les mitochondries permettent aussi la réalisation de l’oxydation
complète des acides gras par un ensemble de réactions appelé
bêta-oxydation des acides gras (ou hélice de Lynen). Les acides
activés (sous forme d’acyl-COA) pénètrent dans la matrice
mitochondriale grâce à un transporteur à carnitine.
Un acyl-COA subit alors une succession de 4 réactions
conduisant à la formation du pouvoir réducteur (NADH,H+ et
FADH2,), d’un acétyl-COA, et d’un nouvel Acyl-COA (avec un
groupement acyl réduit de deux carbones par rapport à l’acyl de
départ).

21
Ce processus est répété autant de fois que nécessaire pour
dégrader intégralement l’acide gras en de nombreux acétyl-COA.
Ainsi, un acide gras de 18 carbones va conduire à la formation
de 8 NADH,H+, 8 FADH2 et 9 acétyl-COA, suite à 8 « tours » de
l’hélice de Lynen. Chaque acétyl-COA peut ensuite rentrer dans
le cycle de Krebs, ce qui achève l’oxydation complète.

22
Les molécules d’acetyl-COA sont oxydées au cours du cycle de Krebs23
 Comment les substances traversent la MEMBRANE
CYTOPLASME

LIPIDES GLUCIDES PROTÉINES

ACIDES GRAS MONOSACCHARIDES ACIDES AMINÉS

PYRUVATE intermédiaires
(C3) CYCLE de KREBS

Pyruvate
CO2 décarboxylase
ACIDES GRAS
intermédiaires
Enzymes de la
CYCLE de KREBS
β oxydation
ACÉTYL-CoA
(C2)
MATRICE MITOCHONDRIALE
24
Comment les substances traversent la MEMBRANE EXTERNE

Voltage
dependent anion
chanel

25
 ADP3-
+ - Déplacement entraîné
ADP3- par la DDP
ATP4- ATP4-
ESPACE
Phosphate Phosphate
INTERMEMBRANAIRE H+
H+ Déplacement entraîné
par le gradient proton
Pyruvate Pyruvate Passage symport
H+ H+
CoA Acyl-CoA
Acyl-CoA CoA

Carnitine Acyl-carnitine Acyl-carnitine Carnitine

NAD+ Malate Malate NAD+

NADH C4 NADH MATRICE

Oxalo-acétate Aspartate Aspartate Oxalo-acétate

ADP C4
CoA
ATP
Acétyl-CoA
C2
Acétyl-CoA Citrate Citrate
CoA 26
C6
 Phosphorylation oxydative et chaines respiratoire

Acetyl-CoA
Cycle Krebs

-La chaîne respiratoire mitochondriale a

deux fonctions :
NADH FADH2 •respiration cellulaire
•production d'énergie
- Elle fait intervenir :
Phosphorylation oxydative •Les réactions d'oxydation
qui aboutissent à une
consommation d'oxygène
Libération d’électrons
•Une phosphorylation de l'ADP
intramitochondrial en ATP
Activation des pompes à protons
Gradient électrochimique

27
ADP ATPase synthase ATP
 Comment faire de l’ATP avec des électrons
Chaque fois qu’un électron réduit une
molécule, il lui amène une charge négative

Charge compensée par l’apport d’un H+

Ce proton est libéré avec l’e- lors de l’oxydation

Principe du couplage chimioosmotique

Les complexes de la chaîne de transport

prennent un H+ dans la matrice quand ils
sont réduits et le rélargue dans l’espace
intermembranaire lorsqu’ils sont oxydés

Création d’un gradient électrochimique

de H+ à travers la membrane interne 28
 Les chaînes respiratoires ou chaînes de
transport d’électrons
1 chaîne = 3 complexes enzymatiques + 2 transporteurs
Complexe NADH déshydrogénase
(Ubiquinone)
Complexe cytochrome b et c1
(Cytochrome c)
Complexe Cytochrome c oxydase

29
 La synthèse d’ATP
Espace inter- Force proton motrice
membranaire

Libération Accepteur
de H+ final d’e-
Membrane
interne Complexe
IV

Niveau d’énergie des e-

Matrice
30
L’ATP synthase
Gradient électrochimique généré par la
chaîne respiratoire
3H+

1 ATP
Énergie chimique

31
 7.2. Synthèse protéique
La mitochondrie possède un génome différent de celui
du noyau cellulaire (organite semi-autonome)
Pourquoi ?
Au cours de l ’évolution, il y a eu la colonisation de cellule
eucaryote primitive par une bactérie, devenue mitochondrie :

La mitochondrie assure donc elle même la synthèse d’un

certain nombre de ses protéines mais reste dépendante pour la
plupart des protéines, de la synthèse protéique du génome
nucléaire.
Génome mitochondrial transmis par la mère ( études
philogéniques de l ’espèce humaine) 32
 L’ADNmt (mitochondrial)

 ADN db, circulaire, de petite taille: 2 à 10 copies/mitochondrie

~ 2 000 copies par cellule

 Réplication indépendante de la phase S

 lu dans les 2 sens : 28 + 9 gènes = 37:

22 gènes = ARNt A à W

2 gènes = ARNr 16S et 12S

13 gènes = Sous unités de gros complexes: 2 sous unités ATP synthase

3 sous unités cytochrome c oxydase, 7 sous unités NADH
deshydrogénase ,1 sous unité cytochrome b-c1
33
 Le génome mitochondrial : sous le contrôle du noyau.

L’ADNmt ne code aucun facteur de transcription, mais codé par le

génome nucléaire.
L’ ADNmt ne code aucun système de réplication, mais codé par le
génome nucléaire.
L’ADNmt ne code aucun système de réparation, mais codé par le
génome nucléaire.

 Les différences avec le génome nucléaire :

- grands transcrits primaires clivés ensuite;
- pas d’introns;
- les 5’ et 3’ UTR sont très courtes ou même inexistantes.
34
Le génome mitochondrial : une transmission maternelle (99,99%).

Les mitochondries du spermatozoïde sont peu

nombreuses et dégradées.
- Fréq. des maladies liées au génome mitochondrial :
1/10.000, elles touchent les 2 sexes.
La transmission est toujours maternelle.

-Très nombreuses et d’expression

variable selon le % de mitochondries
anormales, l’âge des patients, le type de
mutation…

- Elles touchent le plus souvent de nombreux

35
organes.
Ex. : Syndrome de Kearns-Sayre
- avant 20 ans;
- troubles oculaires (ophtalmoplégie, rétinite pigmentaire);
- myopathie;
- troubles de la conduction cardiaque;
- +/- surdité, crises d'épilepsie, hypoparathyroïdie, retard de
croissance, Diabète, I. rénale…
Causé par de grandes délétions de l'ADN mitochondrial, le
plus souvent 4,9 kb.
% molécules mutées / molécules normales > 60%
expression phénotypique.

36
Maladies mitochondriales génétiques liées au génome nucléaire
~ 1500 protéines codées par le noyau ont une fonction au niveau
de la mitochondrie.
La transmission de ces maladies est mendélienne.
Toutes les mitochondries sont touchées.
Les organes les plus touchés : gros besoins énergétiques =
cerveau, muscles, cœur…
Les pathologies mitochondriales sont des maladies d’étiologie
variable. Tous les tissus et organes peuvent être atteints mais
ceux dont les besoins énergétiques sont les plus importants le
sont en priorité: cerveau, rétine, muscle squelettique, cœur et
rein.
37
 8. Adressage des protéines à la mitochondrie
(protéines codé par le génome nucléaire)

Les protéines codées par le génome nucléaire dans le cytosol

et destinées aux mitochondries comportent une séquence
peptidique signal de 15 à 30 acides aminés à l’extrémité N-
terminale.
Ce signal permet l’adressage de ces protéines à la
mitochondrie après leur synthèse, où se trouve des
récepteurs dans la membrane externe mitochondriale.

38
 7.3. Synthèse des stéroïdes
synthèse et exportation des hormones stéroïdiennes :
- exemple de coopération entre REL et la mitochondrie
- mise en jeu de plusieurs enzymes de la famille des cytochromes P450

: cytochrome P450

Progestérone

Récepteurs
aux benzodiazepines

39
 cholestérol
Mb ext

pregnenolone Mb int
matrice
StAR
cortisol

progestérone

Androgène

Estrogènes
Une des deux étapes limitantes de la production des stéroïdes est le transport
de cholestérol à travers l'espace intermembranaire. Parce que le cholestérol
est un lipide, il nécessite l'intervention d'une protéine de transport pour
transiter dans le milieu aqueux. Ce rôle est joué par la protéine StAR
(Steroidogenic Acute Regulatory protein) ou le récepteur au benzodiazepine.40
 7.4. Apoptose
Processus par lequel des cellules déclenchent leur auto-
destruction en réponse à un signal.
Mort cellulaire physiologique, génétiquement programmée
nécessaire à la survie des organismes pluricellulaires.
L’apoptose est en équilibre constant avec la prolifération cellulaire.

La mitochondrie a un rôle clé dans la régulation de l’apoptose

La phase effectrice de l'apoptose comporte:
- l'ouverture des pores de transition de perméabilité (pores PT) des
mitochondries et les canaux VDAC;
- la libération de molécules apoptogènes : le cytochrome c, les
caspases 2, 3 et 9 le facteur AIF. 41
Le cytochrome c
relargué dans le Pore PT

cytoplasme
participe à
l'assemblage d'un
complexe protéique
(apoptosome),
responsable de l'activation de protéases, enzymes
protéolytiques appelées caspases .
Les caspases détruisent d'importants composants moléculaires du
noyau et du cytoplasme, ce qui conduit à la mort de la cellule.
42