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Analytica Chimica Acta 477 (2003) 325–329

Estimation rapide des sucres globaux par photodégradation

UV et spectrophotométrie UV
B. Roigÿ, O. Thomas
Laboratoire Génie de l'Environnement Industriel, Ecole des Mines d'Alès, 6 Avenue de Clavières, 30319 Alès Cedex, France

Reçu le 29 mars 2002ÿ; reçu sous forme révisée le 15 octobre 2002 ; accepté le 1er novembre 2002

Abstrait

La méthode UV/UV développée pour la mesure de paramètres spécifiques de pollution des eaux usées (ammonium, azote Kjeldahl,
phosphore total) est adaptée au dosage des sucres dans les jus de fruits et boissons non alcoolisées. La procédure est basée sur la
détection spectrophotométrique UV des sous-produits de la photodégradation UV des glucides. Le temps d'analyse est considérablement
réduit en utilisant des conditions de pH spécifiques et des échantillons dilués. © 2002 Elsevier Science BV Tous droits réservés.

Mots-clés : Sucre mondial ; Méthode UV/UVÿ; photodégradationÿ; Les glucides

1. Introduction [9,10]. Enfin, les techniques de spectroscopie infrarouge

La détermination de la teneur en glucides (glucose,
fructose, saccharose, etc.) des matières premières, des
produits finaux et lors de la fermentation dans un bioprocédé
industriel tel que la production de vin, d'alcool hydraté ou de
pénicillines est très importante. Il existe également un besoin
d'analyse de l'eau et des eaux usées pour les glucides dans
l'industrie alimentaire.
Plusieurs procédures analytiques utilisant l'oxydation
chimique des glucides réducteurs ont été proposées.
Cependant, ces procédures nécessitent une étape de
chauffage qui prend du temps, avant la détermination de la
teneur en glucides réducteurs. Plusieurs procédures
d'injection de flux pour la détermination de la teneur en
glucides réducteurs ont été proposées [1,2]. D'autres
techniques peuvent également être utilisées, comme la
chromatographie [3–6], l'électrophorèse capillaire [7,8] ou les procédures
ÿ transformée de Fourier (FT) utilisée comme méthode de
Auteur correspondant. Tél. : +33-4-66-78-27-70 ;
télécopie : +33-4-66-78-27-01.
Adresse e-mail : benoit.roig@ema.fr (B. Roig).
moyen (IR) ont également souvent été utilisées en conjonction
avec l'analyse spectrale multivariée [11–14]. Cet article
décrit le dosage de certains glucides par spectrophotométrie
d'absorption UV suite à une réaction photochimique UV. Une
procédure UV/UV, basée sur la détection par absorption UV
d'un produit de réaction photochimique UV a été proposée
pour la détermination de l'azote Kjeldahl [15], du phosphore
total [16] et aussi comme test de dégradabilité [17] dans
divers eaux usées. Cette procédure est étendue dans ce
travail au dosage des sucres (glucose, fructose, saccharose)
dans les jus de fruits, les boissons gazeuses et le vin. Il
consiste en la production par irradiation UV de produits de
photodégradation « glucidiques ». La procédure est d'abord
appliquée aux composés modèles. Elle est ensuite étendue
à la mesure de la teneur en glucides de liquides commerciaux
tels que le Coca Cola, le sirop de menthe et les jus de fruits.
Les valeurs
globales de sucre obtenues par cette méthode
électrochimiques.
UV/UV sont comparées à celles obtenues par analyse IR à
référence.

0003-2670/02/$ – voir avant-propos © 2002 Elsevier Science BV Tous droits réservés.

IIP : S0003-2670(02)01427-7
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2.expérimental

2.1. Appareil

Le dispositif UV/UV a été décrit précédemment

[15]. Il est composé d'une source UV (pour la photodégradation
UV) et d'un détecteur d'absorption UV (pour
mesure UV en ligne). La source UV est faible
lampe à mercure à pression et le détecteur UV est un
Spectrophotomètre UV-Vis Anthelie (Secomam) piloté par le
logiciel Dathelie, version 4.1f. La longueur du trajet de la cellule
en quartz Suprasil est de 10 mm et la
la vitesse de balayage est de 1800 nm min-1.
Fig. 1. Spectres UV illustrant le principe de détection des glucides.
La spectrométrie FTIR a été utilisée comme référence
méthode. Les spectres ont été mesurés entre 650 et
3000 cmÿ1 avec un spectromètre FTIR Spectrum OneTM
(Perkin-Elmer) équipé d'une sonde totale atténuée composés par colorimétrie à la dinitrophénylhydrazine
cellule de réflexion (ATR) et contrôlée par Spectrum [18].
Logiciel OneMC . La formation de ces composés peut être suivie par
spectrophotométrie d'absorption UV soit à
2.2. Réactifs et solutions la longueur d'onde d'absorbance maximale (268 nm) à l'aide
d'une courbe d'étalonnage (obtenue après irradiation de
Toutes les solutions ont été préparées avec de l'eau de solutions standards), ou de tout le spectre en utilisant une
haute pureté provenant d'un système MilliQ (conductivité > 18 m cm). méthode d'exploitation multicomposante [19]. Le
Solution tampon (pH 9,0) : décahydrate de tétraborate de les résultats ont été comparés à ceux obtenus par FTIR
sodium (Aldrich) ; 38 g ont été dissous dans 800 ml d'eau (en utilisant une cellule ATR) comme référence. Dans ce cas, à l'échelle mondiale

et a été ajouté à 30 ml d'hydroxyde de sodium 2,5 M
(Carlo Erba) et dilué à 1000 ml avec de l'eau.
Glucose, galactose, fructose, lactose et saccharose
(Riedel de Haen) ont été utilisés sans autre purification.
la concentration en sucre peut être déterminée après étalonnage
sur la base de la somme des valeurs d'absorbance liées
à l'absorption IR spécifique. La Fig. 2 montre, par exemple, les
pics d'absorbance IR du glucose, du fructose et
saccharose.

Échantillons d'aliments liquides provenant de sources commerciales et L'efficacité de la formation de l'absorbant

les jus de fruits naturels et les boissons non alcoolisées ont été analysés. produits est limité par plusieurs paramètres expérimentaux

3. Méthodes

3.1. Principe des sucres (glucides) UV/ UV

détection

Les sucres (glucides) n'absorbent pas les UV

molécules, mais leur détection UV est possible par cette
Procédure UV/UV. Tout d'abord, après addition du pH 9,0
solution tampon, l'échantillon est irradié aux UV pendant 10 min.
Sous l'influence du rayonnement UV, les sucres sont oxydés en
composés absorbant les UV caractérisés
par une absorbance maximale à env. 268 nm (Fig. 1).
Ces produits ont été identifiés comme carbonyle Fig. 2. Absorbance de certains sucres par FTIR/ATR.
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parmi lesquels le pH, le taux d'oxydation et la dilution sont les aux acides carboxyliques. Ainsi des conditions d'oxydation plus douces
le plus important. (comme une simple lampe UV) doit être utilisé afin de
fournir une réaction d'oxydation appropriée qui permet
3.2. Conditions expérimentales la formation d'un composé avec une absorption stable
Pic.
3.2.1. pH et effet de dilution
Le pH affecte les UV et l'effi cacité de la photodégradation. A
4. Candidatures
partir de la même concentration de sucre initial
solution, l'absorbance obtenue est plus grande à alcaline
Dans un premier temps, la mesure a été calibrée en utilisant
pH qu'à un pH neutre ou acide. Ainsi, un isobestique
deux monosaccharides (glucose et fructose) et deux
point se trouve dans la série pH des spectres d'absorption
disaccharides (lactose et saccharose). Pour chaque sucre, un
(Fig. 3). Ce point indique la présence de deux composés
courbe standard a été établie. Quel que soit le sucre,
absorbants dont les concentrations sont
les pentes de la courbe (correspondant à la réponse UV en
dans une relation linéaire [20].
fonction de la concentration en sucre) sont très proches (tableau
La limite de détection est la plus faible (env. 25 mg lÿ1) à la
1). On peut donc supposer que les disaccharides
pH optimal (pH 9,5).
sont décomposés en monosaccharides dans cette procédure. Des
Des conditions alcalines sont nécessaires pour les solutions
expériences complémentaires doivent être menées
contenant de faibles concentrations de sucre. Cependant, pour les
éliminer les polysaccharides s'ils sont suspectés d'être présents.
solutions à forte concentration en sucre, il est toujours préférable de
utiliser des conditions alcalines car cela réduit le temps d'analyse.
La méthode UV/UV a ensuite été appliquée à des
solutions de sucres (seuls et en mélanges) et sur
échantillons bruts provenant de produits liquides alimentaires (fruits
3.2.2. Effet oxydant
jus et boissons gazeuses).
L'association de l'irradiation UV avec un oxydant chimique
(peroxodisulfate) a été démontrée 4.1. Solutions standards
avec succès pour la détermination des composés azotés dans
travaux antérieurs pour lesquels la présence de l'oxydant
Plusieurs solutions étalons de glucose, fructose,
favorise une meilleure réaction [15]. Ainsi l'utilisation de ce
le galactose, le lactose et le saccharose seuls et en mélange ont
réactif a été testé pour la détermination des sucres. Le taux
été analysés. Les concentrations obtenues
de la méthode UV/UV est augmentée en utilisant cet oxydant mais,
par la méthode ont été comparés à ceux attendus
l'oxydation est trop importante. Les intermédiaires absorbants
(Fig. 4), dans la gamme 20–400 mg lÿ1. Les résultats montrent
(composés carbonylés) ne sont que faiblement
une bonne relation linéaire. Par conséquent, la détermination de
observés, car ils sont rapidement oxydés davantage
la teneur en sucre de solutions aqueuses simples
semble possible en utilisant la procédure UV/UV.

4.2. Échantillons bruts

L'application aux échantillons bruts a été réalisée sur

jus de fruits commerciaux, boissons gazeuses et deux produits naturels

Tableau 1

Données de la courbe standard obtenues pour le glucose, le fructose, le saccharose

et lactose (absorbance UV par rapport à la concentration en sucre)

Glucose Fructose Saccharose Lactose

Slope 0,0055 0,0054 0,0057 0,0055

Intercept 0,04 0,05 ÿ0,02 0,03

Coefficient de régression 0,993 0,998 0,997 0,993

Fig. 3. Spectres UV après dégradation dans différentes conditions de pH.
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Tableau 2

Caractéristiques des échantillons bruts étudiés

Nom Composition commerciale Teneur en sucre mesurée

par FTIR (g lÿ1)
Coca Cola Du sucre 100
Limonade Du sucre 85
Menthe glaciale Sirop de glucose, sirop de fructose, glucides 128
jus de pomme Fructose 104
du jus d'orange Sirop de glucose, sirop de fructose, sucre 68
Sirop de grenadine Sirop de glucose, sirop de fructose, sucre 480
Jus d'ananas Sirop de glucose, sirop de fructose, sucre 225
– 71
Jus naturel de mandarine
– 58
Jus naturel de cerise

très proche (concordance moyenne = 5,5 %). La figure 5 montre la

corrélation linéaire entre les valeurs obtenues par le
deux techniques. Notez que la mesure UV/UV
a été réalisée sur des échantillons dilués (facteur de dilution =
1000) en un temps beaucoup plus court (10 min).

5. Conclusions

La méthode UV/UV permet de déterminer simplement la teneur

globale en sucre. Le principe consiste
de la production de produits de photodégradation UV de
les sucres. Plusieurs sucres ont été étudiés et montrent
Fig. 4. Détermination de la teneur en sucre par méthode UV/UV comparée à
le même comportement. Ainsi, il est possible de proposer une
des solutions étalons.
modèle pour le calcul d'une concentration globale en sucre. La
procédure a été appliquée avec succès aux aliments
jus de fruits très concentrés en sucre
produits liquides (boissons gazeuses et jus de fruits commerciaux
(Tableau 2). La teneur en sucre a été comparée à
et naturels). Dans ces cas, les concentrations de sucre
ceux obtenus par la procédure FTIR/ATR. Les résultats montrent
sont élevés (entre 40 et 500 g lÿ1).
que les deux méthodes donnent des résultats Cette méthode pourrait être étendue à la détermination du
sucre (à des concentrations plus faibles) dans les
processus, comme par exemple dans la production de vin.

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