Ultrastructure de la cuticule et de la région vaginale

de Scutellonema bradys, S. cavenessi et S. clathricaudatum

(Nemata : Hoplolaimidae)
Danamou MOUNPORT",
Pierre BAUJARD** et Bernard -TINY**
* Dipartement de Biologie Animale, Université CheikhAnta Diop, Dakar et ** Laboratoire de Nimatologie,
Centre ORSTOM, B.P. 1386, Dakar, Sénégal.

RÉSUMÉ
L'ultrastructure de la cuticule et de la région vaginale de Scutellonema bradys, S. cavenessi et S. clathricaudatum est décrite. La
cuticule, composée de sept couches distinctes, présente une ultrastructure caractéristique de celle des Hoplolaimidae. Aucune
différence de structure ou d'épaisseur cuticulaire n'a été observée entre ces trois espèces. Des canaux intracuticulaires suggérant
la possibilité d'échanges de matières entre couches séparées de la cuticule ont été observés. L'étude de la région vaginale des trois
espèces montre i) l'existence d'un diverticule tubulaire périvulvaire d'origine cuticulaire dont la longueur varie suivant l'espèce, ii)
l'épaisseur trts importante de la paroi vaginale et une forte musculature périvaginale chez S. bradys, iii) l'existence de muscles
dilatateurs médians du vagin chez les trois espèces.

SUMMARV
Ultrastructure of the czlticleand vaginalregion of Scutellonema bradys,S. cavenessi and S. clathricaudatum (Nemat&:Hoplolaimidae)

The fine structureof the cuticle and vaginal region inScutellonema bradys, S. cavenessi and S. clathricaudatumis described. The
body cuticle is a seven layered structure corresponding to the hoplolaimid type. Cuticle thickness and finestructure are identical
in the threespecies. Intracuticular canals have been observed suggestingthe possibility of exchange of materials between separated
layers of the cuticle. Electron microscope studyof the vaginal area shows i) a perivulvar cuticular appendice whose length varies
according to the species;ii)important thickening of the vagina Wall and a strong perivulvar musculature inS. bradys; iii)median
dilatator muscles of the vagina in the three species.

Les caractéristiques externes de la cuticule des néma-
todes phytoparasites ont longtempsété utilisées dans
leur description. L a microscopie électronique (balayage,
transmission) a permisd'affiner la systématique des
Tylenchida enprenant en compte des critères ultrastruc-
turaux : région labiale; ultrastructure de la cuticule, de
l'appareil digestif, de l'appareil reproducteur (Shepherd,
Clark & Dart, 1972; Clark, Shepherd & Kempton, 1973;
Baldwin, Hirschmann & Triantaphyllou, 1977; Mag-
genti, 1979; Geraert, 1980; Eisenback, 1982; Mounport,
Baujard & Martiny, 1990). Au microscope photonique,
Scutellonema bradys (Steiner & Le Hew, 1933) Andras-
sy, 1958 et S. cavenessi Sher, 1964 ne se distinguent que
par l'anatomie de larégion vaginale qui présente, en vue
latérale, chez la première espèce deux structuresovoïdes
supposées être des glandes vaginales (Sher, 1964; Ger-
mani e t al., 1985). Le but de cette étude estde présenter
l'ultrastructure de la cuticule des trois espèces et de
caractériser les structures permettant en particulier de
distinguer S. bradys de S. cavenessi.
Matériel et méthodes
S. bradys, S. cavenessi et S. clathricaudatum White-
head, 1959 proviennent respectivement de Martinique,
d u Mali etdu Sénégal; S. cavenessi et S. clathricaudatum
sont maintenus en élevage de routine aulaboratoire sur
mil (Pennisetum typhoides Rich.). Les nématodes sont
f i é s au glutaraldéhyde à 2,5 O/O dans un tampon caco-
dylate de sodium 0,l M à pH 7,2 pendant une nuit. Ils
sont ensuite sectionnés et traités comme décrit précé-
demment (Mounport, Baujard & Martiny, 1990). Des
coupes ultrafines sont obtenuesà l'aide d'un couteau de
diamantmontésur u n ultramicrotomePorter Blum
MTl; l'observation est faiteau microscope électronique
Jeol 100 CXII sous une tension d'accélération de 80 kV.

29 1
D. Mounport, P. Baujard di B. Martiny

Fig. 1. Ultrastructure de la cuticule de Scutellonenza brudys et S. cavenessi en coupes longitudinales (CL), transversales (CT) et
tangentielles (CTG) - S. cavenessi :A : (CL); C, D : (CT); E : Champ latéral (CT);F : Couche vacuolaire (CTG); H : Couche
de corpuscules denses et couche basale (CTG) - S. bradys :B :(CL); G : Couche striée (CTG) (cb: couche basale; ccd : couche
de corpuscules denses; cce:couche corticale externe; cci : couche corticale interne; cf
: couche fibrillaire; cg: couches granuleuses;
cic : canal intracuticulaire; CS : couche striée; cva : couche vacuolaire; he : hemidesmosome; hy : hypoderme; ml : membrane
limitante; ms : muscles somatiques. (L’échellerepre‘sente 1 Pm).

292 Revue Nématol. 14 (2) :261-275 (1991)


Résultats
LACUTICULE
L‘ultrastructure et l’épaisseur de la cuticule (1,7 pm)
sont identiques chez les trois espèces; nous présentons
des coupes transversales, longitudinales et tangentielles
de la cuticule de S. bradys et S. cavenessi. La cuticule,
recouverte extérieurement par une fine membrane limi-
tante (Fig. lB, C), peut être divisée en sept couches; de
l’extérieur vers l’intérieur, on observe :
- une couche corticale externe (CCE) trilamellaire
d’épaisseur constante (0,04 pm)apparaissant sous la
forme de deux bandes opaques aux électrons séparées
par une bande claire (Fig. 1 A, B, C);
- une couche corticale interne (CCI), épaisse de 0,lO
à 0,20 pm, finement granuleuse, se rétrécissant forte-
ment entreles anneaux en coupe longitudinale (Fig. 1A,
B);elle présente parfois ungradient d’opacité aux
électrons lui confërant un aspect stratifié;
- unecouche vacuolaire de 0,25 pm d’épaisseur,
remplie d’une substanceplus ou moinsdenseaux
électrons et présentant destravées de matériel finement
granuleux identique à celui de la couche précédente.
Entre les anneaux, la couche présente des structures de
forme triangulaire en coupe longitudinale assurant sa
continuité (Fig. 1 A, B); une coupe tangentielle montre
que ces structures ont l’aspect d’un ensemble de canaux
parallèles à l’axe du nématode (Fig.1F); enfin, la couche
vacuolaire communique avec une couche plus interne de
la cuticule par l’intermédiaire de canalisations radiales
(CIC) situées entre les anneaux (Fig. 1 A, B, G);
- une couche striée, ondulée dans sa partie supé-
rieureencoupelongitudinale, atteintson épaisseur
maximale au milieu des anneaux (0,15-0,25 pm); les
stries sont une alternance de fines bandes denses et peu
denses aux électrons, perpendiculaires à l’axe longitudi-
nal du nématode. La couche striée est régulièrement
traversée par les séries decanauxdécrits ci-dessus
(Fig. 1 G);
- une couche de nature fibrillaire dense aux élec-
trons; son épaisseur (O-0,20 pm) en coupe transversale
ou longitudinale est variable (Fig. 1 A, B, C); en coupe
transversale, elle est interrompue en plusieurs points au
niveau desquels la couche striée esten contact avec celle
décrite ci-après (Fig. 1 C). Les canauxissus de la couche
vacuolaire aboutissent à cette couche fibrillaire;
- une assise de corpuscules globuleux très denses
aux électrons, épaisse de 0,07 pm, présentant des on-
dulations régulières en coupe transversale(Fig. 1 C). En
coupe tangentielle, ces corpuscules ontla forme d’hexa-
gones réguliers bien agencés donnant un aspect pavi-
menteux à la couche (Fig. 1 H);
- une dernièrecouchereprésentant en épaisseur
(0,70-0,85 pm) la moitié de la cuticule; elle est formée
Revue Nérnatol. 14 (2) :261-275 (1991)
Ultrastructure de la cuticule de trois Scutellonema
d’un empilement de corpuscules très peu denses aux
électrons; la couche est rattachée aux structures sous-
jacentes par des séries d’hémidesmosomes (Fig. 1 C, D).
Au niveau des champs latéraux, on observe une
structure quasi-identique; la différence essentielle nota-
ble est le remplacement de la couche striée par deux
couches finement granuleuses peu denses aux électrons :
en coupe transversale, celles-ci apparaissent dans une
zone située avant la première incisure du champ latéral
(Fig. 1 E); elles atteignent leur épaisseur maximale au
milieu de celui-ci.
LARI~GION
VAGINALE
La vulve, chez les trois espèces, présenteune ex-
croissance cuticulaire plus ou moins longue, invaginée
ou non, tubulaire (Fig.2 A à F); en coupe longitudinale,
cette structure apparaît sous la forme de deux projec-
tions cuticulaires appelées (( épiptygmes D. Il s’agit en
fait d’une structure unique, tubulaire, comme le mon-
trent des coupes longitudinales passantau niveau d’une
des extrémités de la vulve où les (( épiptygmes D sont
soudés (Fig. 2 Dy F). Elle est constituée des couches
corticales interne et externe de la cuticule; à sa base, on
peutnoterune infiltration de la couche vacuolaire
(Fig. 2 B, D). La longueur de cette structure tubulaire
varie suivant l’espèce considérée : chez S. cavenessi et
S. cluthricaudatuw~,elle estrelativementpluslongue
(respectivement 4 3 pm et 5 3 pm) que chez S. bradys
( 2 3 Pm).
Le vagin est u n tube aplati long de 10 pm environ;
sa paroi est constituée de quatre couches : les couches
corticales externe et interne, la couche de corpuscules
denses aux électrons et la couche basale de la cuticule.
Chez S. cavenessi et S. clathricaudatum, la paroi vaginale
a une épaisseur moyenne de 0,7 pm vs 1,5 pm chez
S. bradys où elle est facilement visible au microscope
photonique. En coupe transversale, la lumière du vagin
apparaît irrégulière montrant un ensemble de crêtes et
de sillons pouvant expliquer son extensibilité (Fig. 4 B).
Deux types de muscles, constricteurs et dilatateurs
sont insérés sur la paroi vaginale : i) un muscle circulaire
constricteur du vagin est localisé dans la partie interne
du vagin (Fig. 2 A, C, E; Fig. 4 B); en coupe sagittale,
S. bradys se distingue nettement des deux autresespèces
par l’épaisseur de ce muscle (2,OO pm vs 1,30 p m chez
S. clathncaudatum et 1,OO pm chez S. cavenessz); en vue
latérale, au microscope photonique (Fig. 3 A, B, C), le
muscleconstricteurapparaîtsous la formededeux
structures ovoïdes disposées de part etd’autre du vagin;
celles-ci ontété interprétées à tortcommeglandes
vaginales (Sher, 1964; Germani et al., 1985). Le muscle
constricteurestrattaché à la paroi vaginale par des
hémidesmosomes. Trois séries de deux muscles dilata-
teurs f i é s antérieurement et postérieurement au niveau
des cordes hypodermiques latérales (Fig. 4 A) sont
rattachées à la paroi vaginale par des hémidesmosomes:
293
 D. Mounport, P. Baujard & B. Martiny

Fig. 2. Ultrastructure de la région vaginaleScutellonema

de bradys, S. cavenessi et S. clathricaudutum en coupes longitudinales(CL)
et sagittales (CSG)- S. cavenessi. A :(CSG); B :Epiptygmes invaginés (CSG); D :Extrémité latérale de la vulve (CL) - S. bradys.
C :(CSG); F : Extrémité latérale de la vulve (CL) - S. clathn'caudatzm. E :(CSG) (cv :muscle constricteur du vagin; cva :couche
vacuolaire; di:muscles dilatateurs inférieurs; dm : muscles dilatateurs médians; ds :muscles dilatateurs supérieurs;ep : épiptygme;
lut :lumière de l'utérus; IV : lumière du vagin; pv : paroi vaginale; sut : sécrétions utérines; vu : vulve. L'échelle représente2 Pm).

294 Nématol. Revue (1991) 14 (2) :261-275


Fig. 3. Vue latérale de la région vaginaleau microscope photonique.A : Scutellonema cavenessi;B : S. bradys; C : S. clathricaudatum
(Les flèches montrent le muscle constricteur du vagin. L’échelle représente 10 km).
i) deux paires de dilatateurs supérieurs sont fiiées
aux extrémités latérales internesdu vagin, au niveau de
la jonction utéro-vaginaie (Fig. 2 A, C);
ii) deux paires de dilatateurs médians s’insèrent sur
le muscle constricteur (Fig. 2 C; Fig. 4 B);
iii) enfin, des dilatateurs inférieurs se rattachent au
niveau de la vulve (Fig. 4 C).
La partie internedu vagin communique avec l’utérus;
celui-ci est limité ventralement par u n prolongement de
la cuticule vaginale et dorsalement par une assise de
cellules secrétrices; les produitsdesécrétionde ces
cellules sontcaractériséspar u n gradientcroissant
d’opacitéauxélectrons aufuret à mesuredeleur
évacuation par la lumière vaginale (Fig. 2 C, E).
Discussion
L‘épaisseur de la cuticule des trois espèces étudiées
estpeudifférente de celle d’Hoplolaimus Columbus
(1,8 pm in Lewis & Huff, 1976); d’un point de vue
ultrastructural, la cuticule de S. bradys, S. cavenessi et
S. clathricaudatum présenteune organisation caractéris-
tique des Hoplolaimidae(DeGrisse, 1974; Lewis &
Huff, 1976; Wang & Chen, 1982). La cuticule des
Hoplolaimidae présenteà sa base une couche épaisse de
corpuscules très peu denses aux électrons, responsable
selon Lewis et Huff (1976) de la résistance d’Hoplolui-
mus Columbus à la dessication et au choc osmotique.
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Ultrastructure de la cuticule de trois Scutellonema
Nous avons observé des canaux intracuticulaires non
signalés par ces auteurs; l’existence de ces canaux sug-
gère la possibilité d’échange de matière entre couches
séparées de la cuticule; cependant, ces canaux ne s’ou-
vrentpas à l’extérieur commeceuxdécritschez les
Dorylaimida (Spiegel et al., 1983). Sous les champs
latéraux, la couche striéeest remplacée par deux couches
de naturegranuleuse; chez la plupart des nématodesdu
sous-ordredesTylenchinaprécédemmentétudiés, la
couche striée, qui ‘est encontact avec l’hypoderme,
engendre deuxà quatre couches fibreuses (Johnson, Van
Gundy & Thomson, 1970; Johnson, 1981).
L’étude d e la région vaginale de S. bradys a permisde
caractériser,lesstructurespermettantdeséparer les
espèces S. cimenessi et S. bradys. L’observationdes
coupes longitudinales, transversales et tangentielles de
la région vaginale de S. cavenessi n’a révélé, en aucun
cas, l’existence’à l’intérieurdu vagin d’une << deuxième
paire d’épiptygmes courts D, comme l’ont signalé De
Grisse et Roose (1975) chez la même espèce. Dans une
étude aumicroscope électroniqueà balayage de la région
vulvaire de S. cavenessi et S. clathricaudatum, la struc-
ture tubulaire del’épiptygme a été observée (Baujard et
al., 1990); l’aplatissement, dans un sens antéro-posté-
rieur del’épiptygme tel qu’il apparaît sur la Figure 2, E,
peut être interprété à tort au microscope photonique
comme étant une lèvre unique antérieure ou postérieure
à la vulve.
295
 D. Mounport, P. Baujard dl- B. Martiny

D’autre part, De Grisse et Roose (1975) dénombrent

huit muscles dilatateurs f i é s par paire aux extrémités
internes et externes de la paroi vaginale comme chez
Pt-utylenchuspenetruns (Kisiel, Himmelhoch & Zucker-
m a , 1972); nous avons observé chez la souchede
S. cuvenessi ainsi que chez les deux autres espèces
étudiées, deuxmuscles dilatateurs supplémentairesFiés
dans la zone médiane de la paroi vaginale; ces diffé-
rences peuventêtreimputablessoit à une erreur de
diagnose, soit à une variabilité desdites structures en
fonction des populations.

WFÉRENCES
BALDWIN,J. G., HIRSCHMANN, H. & TRIANTAPHYLLOU,A. C.
(1977).Comparativefinestructure of the oesophagus of
males of Heterodera glycines and Meloidogyneincognita.
Nematologica, 23 : 239-252.
BAUJARD, P., MOUNPORT, D., MARTINY, B. & N’DIAYE,A.
(1990). Observations en microscopie électronique àbalayage
surdeuxespèces du genre Scutellonema Andrassy,1958
(Nemata : Hoplolaimidae). Revue Nématol., 13 : 351-360.
BYERS,J. R. & ANDERSON,R. V. (1972).Ultrastructural
morphology ofthe body Wall, stoma and stomatostyle
of the
nematode, Tylenchorhynchus dubius (Buetschli,1873)Fi-
lipjev, 1936, Can. J. Zool., 50 : 457-465.
CLARK,S . A., SHEPHERD, A. M. & KEMPTON, A. (1973).
Heterodera spp. Nematologica, 19 :
Spicule structure in some
242-247.
CLIFF,G. M.& BALDWIN, J. G. (1985). Fine structureof body
Wall cuticle of females of eight genera of Heteroderidae. J.
Nematol., 17 : 286-296.
DE GRISSE,A. (1974). The structure of the cuticleof the body
annules in Hoplolaimidae as compared with other tylen-
chids. XlIth int. Symp. Nematol., Granada, Espana, 1-7Sep-
tember 1974 :32 [Abstr.].
DE GRISSE, A, Sr ROOSE,D. (1975). The ultrastructure of the
vulva region in Scutellonema cavenessi Sher, 1964 (Nema-
toda I Hoplolaimidae). Meded. Fac. Landbouww. iiliiksuniv.
Gent., 40 : 501-510.

Fig. 4. Ultrastructure de la région vaginale de Scz(te1lonema

cuitenessi eti codpes longitudinales (CL) et transvkrsales (CT).
A :Site de fiiation des muscles dilatateurs au niveau du champ
latCral (CL); B : Vagin,partiesupérieure (CT); C : Vagin,
partie inférieure (CT) (CU: cuticule; cv : muscle constricteur
du vagin; di : muscle dilatateur inférieur; dm : muscle dila-
tateur mëdian; dv : dilatateurs du vagin; hy : hypoderme; IV :
lumière du vagin; ms : muscles somatiques; pv : paroi du
vagin. L’échelle repi-ésente 2 gm).

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 Ultrastructure de la cuticule de trois Scutellonema

EISENBACK,D. J. (1982). Morphological comparison of head LEWIS, S. A. & HUFF,T. F. (1976). Cuticle anatomy of Ho-
shape and stylet morphology of secondstagejuvenile of plolaimus colunzbus. J. Nematol., 8 : 293.
Meloidogyne species. 3.Nenzatol., 14 : 339-343. MAGGENTI, A. R.(1979). The role of cuticular strata nomen-
GERAERT,E. (1980).Structure of thefemalereproductive clature in the systematics of nemata. j? Nenzatol., 11 : 94-98.
systeminsomeDorylaimidaandEnoplida(Nematoda). MOUNPORT, D., BAUJARD, P. & ~ ~ R T I N B.
Y (1990).
, Étude
Nentatologica, 26 : 255-271. ultrastructurale de la cuticle dePratylenchus brachyurus, P.
GERMANI,G.,BALDWIN, J. G.,BELL, A. H. & Wu, X. Y . loosi et P. sefaensis (Nemata : Pratylenchidae). Revue Néina-
(1985). Revision of the genusScutellonema Andrassy, 1958. tol., 13 : 249-254.
Revue Nématol., 8 : 289-320. SHEPHERD, A. M., CLARK, S. A. & DART, P. J. (1972). Cuticle
JOHNSON, P. W. (1981). Observationson the cuticle of Meloi- structure in the genus Heterodera. Nematologica, 18 : 1-17.
dogyne hapla males. 3.Nematol., 13 : 231-233. SHER,S. A. (1964).Revision of the Hoplolaiminae(Nema-
JOHNSON, P. W.,VAN GUNDY,S. D. & THOMSON, W.W. toda). III. Scutellonema Andrassy, 1958. Nenzatologica, 9 :
(1970). Cuticle ultrastructure of Henzicycliophora arenaria, 421-443.
Aphelenchus avenae, Hirschnzanniella gracilis and Hirs-
SPIEGEL, Y., ROBERTSON, W. M., HIMMELHOCH, S. & Zuc-
~

chnzanniella belli. J. Nematol., 2 : 42-58.

KERMAN, B. M. (1983). Electron microscope characterizat-
KISIEL, M. S., HIMMELHOCH, S. & ZUCKERMAN, B. M. (1972). ion of carbohydrates residues on the bodyWall of Xiphinenta
Fine structure of the body Wall and vulva area of Pratylen- index. J. Nematol., 15 : 528-534.
chus penetrans. Nematologica, 18 : 234-238.
WANG,K. C. & CHEN,T. A. (1982). Electron microscopy of
Accepté pour publication le 10 avril 1990. the posterior bodyof Scutellonerna sp. J. Nematol., 14 : 475.

Revue Nématol. 14 (2) :261-27.5 (1991) 297