UNIVERSITE DE LUBUMBASHI

FACULTE DES SCIENCES PHARMACEUTIQUES

PROMOTION : DEUXIEME GRADE
Analyse du chloramphénicol par spectrophotométrie d’absorption
UV-Visible

1. Mode opératoire

1.1. Calcul de la prise d’essai

- Peser dix capsules une à une ;

- Vider les capsules, peser la masse totale des capsules vides et faire la différence de
poids entre la masse totale des capsules remplies et celle des capsules vides ;
- Calculer la masse moyenne ;
- Calculer la prise d’essai.

Formes pharmaceutiques Masse moyenne Ecart limite en

pourcentage de la masse
moyenne
Capsules, granulés non 300 mg ou plus 7,5%
enrobés et poudre (en Masse moyenne poudre = ? Les capsules contrôlées
unidoses) ; gélule de couleur satisfont à l’essai
blanc crème avec des écrits Prise d’essai (PE) = ? d’uniformité de masse
en rouge ; Chloramphénicol
gélule de 250 mg
Date de fabrication :
05/2021
Date d’expiration : 04/2024

La longueur d’onde du chloramphénicol est λ= 271 nm

1.2. Identification et dosage

L’identification sera faite par sur spectrophotométrie UV-VIS par comparaison de spectre

a. Préparation des solutions standards

- Prélever 10 mg de chloramphénicol standard et diluer dans 10 ml méthanol. On

obtient la solution mère à 1000ppm.
Nous allons préparer quatre solutions filles à partir de la solution mère :

- Solution fille à 10ppm

Prélever 0,5ml de la solution mère et porter à 50 ml avec de méthanol

- Solution fille à 20ppm

Prélever 1ml de la solution mère et porter à 50ml avec de méthanol

- Solution fille à 30ppm

Prélever 3ml de solution fille et porter à 100ml

- Solution fille à 40ppm

Prélever 2ml de solution mère et porter à 50ml

Nous obtenons ainsi quatre solutions.

b. Préparation des solutions de l’échantillon

La prise d’essai (PE) est de … mg de poudre avec 50 mg de principe actif

- Solution mère à 1000ppm

PE de poudre dans 50 ml de méthanol on obtient une solution mère à 1000ppm

- Solution fille à 20ppm

On prélève 1ml de solution mère qu’on dilue dans 50 ml de méthanol et on obtient une
solution fille à 20.ppm.

Après lecture au spectrophotomètre UV-Vis à 271 nm, nous obtenons les résultats suivants
pour le dosage :

Solutions standards
Concentrations Absorbances
10 ppm
Il est à noter que l’absorbance A provient de
20 ppm
la moyenne de trois absorbances provenant de
30 ppm
trois différentes solutions 40 ppm filles à 20ppm.

Solutions Echantillons
Concentrations Absorbances

20 ppm

L’absorbance moyenne Am est ……..

Une autre lecture sera effectuée pour l’identification en comparant le spectre de la solution
standard avec celle de l’échantillon.

2. Rapport de la manipulation

- Trouver les différents inconnus dans le mode opératoire ;

- Tracer la droite de régression linéaire avec son équation Y=ax+b ;
- Calculer la concentration de notre échantillon.