Nom ; kadri

Prénom ; mohammed seghir

Spécialité ; biochimie appliquée

Tp 1 ;Extraction et dosage des polyphénols totaux

Compte rendu

• Introduction
Le principe de cette méthode consiste a faire tremper les plantes dans un
solvant organique volatil a chaud Soit pour obtenir des produits que l’on ne
peut extraire par un autre procédé soit en vue de rendements plus élevés .
• Matériel utiliser
Balence professionnelle plus verre montre
Cuillére spatule
Agitateur magnétique
Barreau magnétique
Papier filtre
Eprouvette graduée
Entonnoir
Pissette
Fiole jaugée
Evaporateur rotatif
Pompe a vide
• Méthodes
On prend avec une cuillére spotule la poudre du café et on pése 5g sur la
balence profesionnelle
 Macération a froid du café avec 100 ml de méthanol dans une eprouvette
graduée plus on mélange a l’aide du barreau magnétique sur un agitateur
magnétique
Filtration du mélange sur papier filtre mais avant on rince la fiole jaugée avec
de l’eau distillé
Evaporation du mélange avec l’évaporateur rotatif a 60 degré C et la pompe
a vide
Après qu’on récupere notre matiére végetale je le réversse dans l’ampoule a
décontée (extraction par décontation liquide/liquide) ,ensuite je resot la phase
de l’acétate et je remplace avec (N-butanol)
L’extraction par décontation doit répondre a 3
critéres ;solubilité,densite,muscibilite
Les molécules qui sont soluble dans l’acétate d’éthyle vont migrait
On peut aussi refaire l’extraction par épuisement pr acétate
Après la gamme d’étalonnage je vais faire le dosage des polyphenols totaux
La lecture est effectué contre un blanc au spéctrométrie a une longueur d’onde
de 700 nm
3) les résultats et interprétation
Après les deux méthodes de préparation et de dosages en déduire les résultats
suivant ; 0 – 0,1 – 0,16 – 0,31 – 0,41 – 0,67 – 0,91
Et les résultats des extraits sont ;
E1 ; 0,41
E2 ; 0,26
[] de 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
l’acide
gallique
(mg/ml)
Do 0,1 0,16 0,31 0,47 0,67 0,91

La courbe ;
On déduire la courbe des absorbances suivantes
 y = 1,7764x
DO R² = 0,9885
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

5) y=ax. A =1.7764
E1=0,41
0,41÷1,7764 =0,23mg/ml
E2 = 0.26
0,26÷1,7764 =0,15mg/ml

6) qu’est ce qu’un étalon ?

Un étalon est une réalisation de la définition d’une grandeur donnée,avec une
valeur déterminée et une incertitude de mesure associée utilisée comme
référence
- Comment préparer une gamme d’étalonnage ?
EN genéral de 0,2 a 10mg/3 en NH a partir de substances de références,
commerciales ou synthétisées en laboratoire
- Qu’elle est l’intérét d’ajouter un réactif ?
L’ajout d’un des réactifs en excés ou l’élimination de l’un des produits au fur et
a mesure de sa formation permet d’augmenter le rendement d’une réaction
conduisant a un équilibre
- Qu’elle est l’intérét d’ajouter un blanc ?
Pour calibrer le spectro et utiliser dans la réaction

- Qu’est ce que veut dire la polariation d’un solvant ?

Un solvant est dit polaire s’il est composé de molécules polaire . Ses molécules
comportent des liaisons polarisées . Comprennent des atomes portant des
charges partielles positives et négatives

Conclusion
Cette expérience nous a permis de découvrir la spéctrophotométrie
d’absorption. Le dosage par étalonnage repose sur l’utilisation de solutions
(appelées solutions étalons ) qui contiennent l’espéce chimique à doser en
différentes concentration connue