But de TP 

:
Apprendre à réaliser la technique de la culture in vitro ‘le sauvetage d’embryon immature du blé
et mutagenèse par UV ‘ ; en utilisant le milieu de culture ms afin de suivre leur développement et
la reproduction asexuée artificielle par la mise en place d’un environnement contrôlés.

Principe de TP :
Dans ce TP on va mettre en évidence la totipotence des cellules végétales par la culture in vitro
des embryons de blé ; c’est pour ça il faut bien choisir le milieu de culture adéquat qui assure
un bon développement des explants .
La culture se fait dans des boite de pétri qui contiennent le milieu solide MS : qui est un milieu
basique pour la culture de cellules ou des tissus de plantes il contient tous les nutriments dont
une plante a besoin pour croitre ainsi que les hormones végétales phytohormones comme : les
auxines ,les cytokines. Qui sont des substances nécessaires pour la croissance .

Résultats :
1er observation : après 7 jrs

Figure 01 : la graine de blé témoin figure 02 : la graine de blé sous UV

2ème observation : après 14 jrs

Figure 03 : la graine de blé témoin figure 04 : la graine de blé sous UV

3ème observation : après 21 jrs

Figure 04 : le blé témoin figure 05 : le blé sous UV

Discussion :
Pour le témoin :
après une semaine de culture ;on remarque sur l’un des 2 grains l’apparition des racines ce qui
justifie le réveille de la semence en vie ralentie âpres l’hydratation et culture sur milieu MS qui
donne naissance à une radicule puis racine ,on observe ainsi le début d’élongation de la tige et
aussi une pousse axillaire pour la formation des feuilles contrairement à l’autre graine qui est
encore en vie ralentie ou bien le temps est insuffisant pour déclencher la croissance . .
après 2 semaines et 3 semaines on remarque que l’autre grain s’est réveillé et a commencé à
développer aussi la partie racinaire et la partie aérienne et pour l’autre grain , avec plus de
temps passe la croissance continu et ,on a obtenu un développement morphologiquement
remarquable et réussi a cause de la sécrétion optimal des hormones dont la partie racinaire plus
ramifié et la partie aérienne qui croit en longueur également donc on a une plantule qui a une
rhizogenese et une collagénase

cette croissane est grace au milieu MS qui contient tout les nutriments nécessaires ( sel, ,des
composés organique, des vitamine) plus les conditions aseptique et le taux de secretion
hormones tel que « cytokinine et auxine » qui sont nécessaires pour la croissance végétale de
bourgeon et le système racinaire ,
pour chaque augmentation de taux de cytokinine y a une pousse axilaire et l’élongation de la
tige et le même pour l’ auxine pour la croissance de système racinaire plus de temps plus le taux
de ces hormones est élevés
Aucune contamination est apparait ce qui indique que notre manipulation et stérilisation sont
bien faite et notre milieu est adéquat pour la culture
Pour l’UV :
On remarque dans les 3 semaines sur une grain y’a une contamination donc pas de croissance
cela dû aux fautes de manipulation et les conditions non stérile .
Pour l’autre grain on remarque dans la première semaine l’apparition d’une petite tige et racine
plus le temps s’écoule plus cette tige et racine développe mieux après 3 semaines
on a obtenu un développement morphologiquement remarquable à cause des hormones comme
expliquer avant .
 On remarque que les boites témoins sont développées mieux que les boites sous UV
 cela revient au UV qui a engendré une mutation sur le génome de blé donc il a un effet
négatif sur les gènes de croissance .

conclusion :
la culture in vitro permet de générer toute une plante à partir des explants dont il faut fournir
un milieu ayant tous les éléments nécessaires à leur développement, ce milieu nutritif est
également favorable au développement des microorganisme. Donc il faut faire nos culture en
condition stérile .ces cultures se font pour réduire le cout de production et d’améliorer les plantes
sans oublier que ces cultures sont grâce à la totipotence des cellules végétales