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Introduction 

La chromatographie est une technique d’analyse, très utile et simple à mettre en


œuvre. On l’utilise en général pour suivre l’avancement d’une réaction, pour
connaître la composition d’une fraction séparée sur colonne ou visualiser la
pureté d’un produit. Elle est basée sur la différence d’affinités (au sens
d’interactions Intermoléculaires) d’un constituant d’un mélange entre une phase
solide (silice le plus souvent, mais aussi alumine ou cellulose) et une phase
liquide, un éluant.

La chromatographie sur couche mince (CCM) repose principalement sur des


phénomènes d’adsorption.
Objectif 
 Apprendre à manipuler la chromatographie sur couche mince (CCM)
 Séparation et identification des espèces chimique (des composés
flavonoïques) dans un mélange homogène.
Le principe :
l s'agit d'une technique d'analyse qui s'appuie sur les différences d'affinités
de substances chimiques entre une phase fixe, la plaque, et une phase
mobile, l'éluant

Matériels et méthodes :

S’effectue généralement sur une fine couche de silice (phase stationnaire)


déposée Le mélange (extraie ) à étudier est ensuite posé à l'aide d'un pipette
pasteurs(le diamètre de la tâche environ 2mm pas dépasse 3mm) . ²²²²Puis placé
dans une cuve contenant l'éluant (tableau 1).

Le niveau de l'éluant devant être en dessous du produit déposé. La cuve de


chromatographie est ensuite refermée par un couvercle. Figure 1

L'éluant migre sur la plaque de silice par évaporation Figure1

La plaque de chromatographie est ensuite lue directement si les composés sont


visibles, ou placée dans cristaux d'iode.

Iode est un révélateur semi-destructif car l'iode finit par s'évaporer de la plaque
CCM, pour ne laisser que le composé original
Dans tous les cas, ne pas oublier de tracer le front du solvant dès la sortie de la
plaque de la cuve avant son évaporation.

Tableau 1 : Systèmes solvants utilisés pour la CCM

Résultats :
Distance parcourue par≤constituant ( milieu de latache)=D
rf =
distance parc o ur ue par ≤front de solvant=D 2

Nombre des spots rf Le composant flavonoïde


Group1 3
Group2 7
Groupe 2 Groupe1

Discussion :

Le résultat du groupe B est meilleur que celui du groupe A car le système de


révélation du groupe B est de meilleure qualité que celui du groupe A

Conclusion :

La technique du CCM est une technique fiable et rapide, plus le composé est
polaire plus il sera adsorbé et moins vite il se déplace Les composants de
l’échantillon ont des vitesses variables selon leur solubilité, les composants plus
solubles migrent lentement.

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