Laboratoire 1

Chromatographie des mdicaments

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BUTS
Apprendre la technique de la chromatographie.
Identifier un analgsique inconnu par chromatographie sur couche mince (CCM) en
dterminant sa composition.

PRINCIPE
La chromatographie fut originellement la technique permettant la sparation des
pigments jaunes et verts des plantes. Depuis, la chromatographie s'est tendue et
est utilise pour sparer un trs grand nombre de composs. Elle est fonde sur
l'adsorption slective des composs sur les solides grande surface. Lorsque le
mlange passe travers le solide, les composs sont adsorbs et dtachs de la
surface des vitesses diffrentes. Ceci signifie qu'il y a un partage continuel entre
l'adsorbant et la phase mobile qui peut tre soit de la vapeur soit une solution.
La chromatographie sur couche mince (CCM) repose principalement sur des
phnomnes d'adsorption: la phase mobile est un solvant ou un mlange de
solvants qui progressent le long d'une phase stationnaire fixe sur une plaque de
verre ou une feuille semi-rigide de matire plastique ou d'aluminium. La vitesse de
migration de l'chantillon dpend d'une part, des forces lectrostatiques retenant le
composant sur la phase stationnaire et d'autre part, de sa solubilit dans la phase
mobile.
Le Rf d'un compos est dfini par le rapport suivant:
Rf =

distance parcourue par le compos

distance parcourue par le front de solvant

Le Rf d'une substance est une constante et constitue une de ses caractristiques

physiques, pour des phases stationnaire et mobile donnes.

MODE OPRATOIRE
a) MATRIEL ET PRODUITS
Plaque de gel silice
Bcher de 400 mL
Verre de montre

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Acide actylsalicylique (1)

Actominophne (2)
Cafine (4)
Phnactine (5)
Salicylamide (6)
Inconnu qui est un des mdicaments selon la liste suivante (3)
30 mL de solvant (actate d'thyle)
Rcipient contenant de l'iode
Lampe ultraviolette

Liste des mdicaments et leur composition

Mdicament

composition

ANACINE

acide actylsalicylique et cafine

EMPIRINE

phnactine, acide actylsalicylique et cafine

EXDRINE

actaminophne, acide actylsalicylique, cafine

et salicylamide

VANQUISH

acide actylsalicylique, actaminophne et

cafine

TYLNOL

actaminophne

Schmas des molcules composant les mdicaments

CCH3

OH
C

NH

O
H 3C

OCCH3
O

N
CH3

OH

Acide
actylsalicylique
(aspirine)

Actaminophne

CH3

Cafine

CCH3
NH

NH2
C
OH

N
OC2H5

Phnactine

Salicylamide
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b) MANIPULATIONS
1.- PRPARATION DE LA PLAQUE DE SILICE ET DE LA CUVE DLUTION
Utiliser un bcher de 400 mL avec un verre de montre comme couvercle.
Mettre dans le bcher environ 30 mL de solvant, couvrir et laisser sous la
hotte.
Avec un crayon la mine de plomb, faire dlicatement un trait, le plus fin
possible environ 1,5 cm du bord infrieur. viter de toucher la surface
de silice avec vos doigts.
Tracer des repres pour les taches en faisant une petite croix ou un point;
laisser environ 0,9 cm entre chaque repre.
l'aide d'un capillaire trs fin, appliquer les composs connus ainsi que
l'inconnu (suivre l'ordre indiqu). Il est trs important d'viter d'en dposer une
trs grande quantit; la tache ne devrait pas dpasser 1 2 mm de diamtre.
Pour ce faire toucher et retirer rapidement le capillaire de la surface de la
plaque.
Aprs avoir sch, faire une seconde application au mme point de repre.
Disposition des taches sur la plaque de silice

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Important: Il faut toujours manipuler la plaque par les bords et ne pas toucher
la surface de silice.
2.- LUTION
Aprs une attente de quelques minutes (2-3) pour s'assurer que le bcher soit bien
satur de la vapeur du solvant, dposer dlicatement la plaque dans ce dernier.
Refermer et laisser migrer le plus longtemps possible, idalement lorsque le front
de solvant est 1 cm du haut de la plaque. Le bcher ne doit pas tre dplac
pendant llution. Retirer dlicatement la plaque et marquer le front du solvant.
Laisser scher.
3.- EXAMEN DU CHROMATOGRAMME
a) Examiner la plaque de silice (chromatogramme) sous la lampe ultraviolette (UV)
et en faire un croquis lchelle.
A laide du crayon mine, encercler les taches observes et noter leur couleur.
b) Placer ensuite la plaque dans le bocal contenant de l'iode pendant 5 10
minutes. Retirer et observer nouveau le chromatogramme dvelopp.
Reconnatre et nommer le maximum de taches apparues au cours de la
chromatographie (les marquer directement sur le croquis).
c) partir du nombre, de la position (calculer les Rf) et de l'aspect des taches
obtenues de votre inconnu, identifier le mdicament par comparaison avec les
diffrents composants purs.
d) Rcuprer lactate dthyle dans les contenants appropris.
UV

IODE

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N.B.

Ces chromatogrammes ne sont pas lchelle par rapport celui que

vous allez recevoir lors de la sance de laboratoire.
Vous allez devoir dessiner votre chromatogramme lchelle dans votre
cahier de laboratoire.

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