Travaux pratiques de

Chromatographie

License CAE

Réaliser par :
- Sakhi Oumaima
- Mounchid Wafae
- Joulane Fatima ezzahra
- Khadija Makboul
 Chromathographie
Introduction :
La chromatographie sur couche mince est la plus
simple des méthodes chromatographiques utilisée pour
la séparation des composants. Elle consiste à placer sur
une feuille (papier, silice ou autre, voir plus loin) une
tache et de la laisser éluer en la trempant dans un
solvant ou un mélange de solvant (appelé éluant),
l’éluant diffuse le long du support. La tache migre sur la
feuille plus ou moins vite selon la nature des
interactions qu'elle subit de la part du support et de
l'éluant.
L’extraction liquide-liquide est une méthode de
purification basée sur la différence de solubilité d’un
soluté dans deux phases non miscibles. En chimie
organique, on utilise habituellement une phase
aqueuse et une phase organique qui consiste à faire
passer un produit d’un solvant dont il est difficile à
séparer (eau) à un autre solvant dont il sera facilement
isolable (solvant organique).
Réactifs
 eau distillée
 herbicide (atrazine)
 insecticide
 éthyle acétate
 échantillon inconnue
 hexane
 éluant (hexane + éthyle acétate)
 silice poudre

Matériels :
- Ampoule à décanter
- Balance - éprouvette
- Colonne – erlenmeyer
- Plaque de silice
- Capillaire
- Evaporateur rotatif
- Tubes à essai
- Ballon de laboratoire
- Buchner (filtration sous vide)
- Chambre UV
- Cuve chromatographique
Mode opératoire :

Etape 1 : Filtration sous vide :

On prend un échantillon d’eau contaminée et on le met
dans un entonnoir pour séparer rapidement tous les
solides de l’eau
Etape 2 : extraction liquide-liquide :
On prend 50 ml de l’échantillon et on le met dans
ampoule, on ajout 50 ml d’éthyle acétate (solvant non
miscible avec l’eau). Apres l’agitation, deux phases de
densité différentes se forment, puis on élimine la phase
aqueuse qui se situe dans la partie inferieur, et on
récupère dans un bécher la phase organique. Si des
impuretés qui reste encore dans la phase organique, on
ajoute l’eau distillée et on agite, puis on élimine la
phase aqueuse
Etape 3 : La distillation simple sous vide :
On pesé la masse du ballon avant remplir par la phase
organique et le met dans l’appareil rotavapor pour
éliminer rapidement d’éthyle acétate ajoute pendant la
première étape, après distillation on pèse le ballon
Etape 4 : Préparation de CCM :
On prépare l’éluant 70 % d’hexane et 30 % d’éthyle
acétate, et on le met dans le fond de la cuve (5mm)
puis fermer le couvercle.
On prend plaque de silice et on trace avec un crayon un
trait à 1cm. Sur ce trait on trouve 3 petits points. On
dépose a l’aide pipette pasteur la solution organique
(soluble dans l’éthyle acétate) sur point 1. Et Atrazine
Clothianidine sur les points 2 et 3.
On place la plaque dans la cuve, fermer et laisser
l’éluant diffuser, on sortit la plaque lorsque l’éluant est
arrivé a le front du plaque, puis on trace au crayon le
front de l’éluant. On sèche la plaque et le met dans la
chambre UV, et on compare la tache de la solution
organique avec les produit de référence.