Groupage Sanguin et ses difficultés 

:
Introduction

Le groupage sanguin est une méthode utilisée pour déterminer les différents types de
sang présents dans le corps humain.

Cependant, cette technique n'est pas sans difficultés et peut causer des problèmes lors de
transfusions sanguines.

1-Le système ABO :

Le système ABO est un système de groupes sanguins qui classifie les différents types de sang en
fonction de la présence ou de l'absence antigènes sur la surface des globules rouges. Il a été
découvert par le scientifique autrichien Karl Landsteiner en 1901.

Le système ABO est basé sur l'interaction entre deux types d'antigènes : les antigènes A et les
antigènes B. Il existe quatre groupes sanguins principaux dans le système ABO : le groupe A, le
groupe B, le groupe AB et le groupe O.

-Le groupe A a des antigènes A sur la surface des globules rouges.

-Le groupe B a des antigènes B sur la surface des globules rouges.

-Le groupe AB a à la fois des antigènes A et B sur la surface des globules rouges.

-Le groupe O n'a ni antigène A ni antigène B sur la surface des globules rouges.

En plus des antigènes, le système ABO implique également la présence d'anticorps spécifiques
dans le plasma sanguin. Les personnes du groupe A ont des anticorps anti-B, les personnes du
groupe B ont des anticorps anti-A, les personnes du groupe AB n'ont pas d'anticorps anti-A ni
anti-B, et les personnes du groupe O ont à la fois des anticorps anti-A et anti-B.

La compatibilité entre les différents groupes sanguins du système ABO est importante
lors des transfusions sanguines. Les personnes de groupe sanguin O sont considérées
comme donneurs universels car leur sang ne contient pas d'antigènes A ou B. En
revanche, les personnes de groupe sanguin AB sont considérées comme receveurs
universels car leur sang contient à la fois les antigènes A et B, ce qui signifie qu'ils
peuvent recevoir du sang de tout groupe sanguin sans risque de réaction immunitaire.

2-Le système rhésus :

Le système Rhésus, également connu sous le nom de système Rh, est un autre système de
groupes sanguins qui joue un rôle important dans la compatibilité sanguine. Il tire son nom du
fait qu'il a été initialement identifié chez les macaques Rhésus.
Le système Rh détermine la présence ou l'absence d'un antigène spécifique appelé antigène D
sur la surface des globules rouges. Si une personne possède cet antigène, elle est considérée
comme Rh positif (Rh+), tandis que si elle ne le possède pas, elle est considérée comme Rh
négatif (Rh-).

3-Le groupage :

Le groupage doit être effectué en double détermination par deux personnes différentes et deux
séries de réactifs différentes. Chaque détermination doit comporter aussi bien l’épreuve
globulaire que l’épreuve sérique (Beth -Vincent et Simonin-Michon)

La validation de ces 2 épreuves est assurée par la réalisation de 3 témoins:

-L’épreuve sérique est validée par le témoin allo

- L’épreuve globulaire est validée par le témoin AB

- Les auto-anticorps sont mis en évidence par le témoin auto.

Les auto-anticorps, interfèrent aussi bien dans l’épreuve globulaire que dans l’épreuve sérique.
On ne doit jamais donner une réponse définitive s’il n’y a pas de concordance entre l’épreuve
globulaire et sérique.

Toute discordance entre les épreuves globulaire et sérique interdit de valider le groupe sanguin
et impose :

- Dans un premier temps de vérifier l'aspect des sérums-tests, ainsi que l’aspect des hématies

-tests et l'absence d'altération de l'échantillon de sang à tester.

- De différencier dans un deuxième temps, les vraies agglutinations des fausses agglutinations
telles que le phénomène de rouleau.

-De pratiquer dans un troisième temps les trois témoins qui valident l'épreuve globulaire et
l'épreuve sérique afin de cerner à quel niveau se situe l'anomalie.

4-les difficultés du groupage ABO :

Peuvent être placées dans l’un des deux cadres suivants :

- Discordance entre l’épreuve globulaire et sérique avec des témoins négatifs.

- Discordance entre les deux épreuves avec un ou plusieurs témoins positifs.

a-Discordance entre l’épreuve globulaire et sérique avec un témoin positif :

-Témoin allo positif -Témoin AB positif -Témoin auto positif

Témoin Allo positif : sérum du sujet + hématies O

Présence dans le plasma du sujet testé, d'anticorps préexistants : Certaines personnes peuvent
avoir des anticorps préexistants contre certains antigènes du groupe ABO ou Rh en raison d'une
exposition antérieure (transfusion, grossesse). Ces anticorps peuvent interférer avec les
réactions de groupage sanguin, conduisant à des résultats faussement positifs ou négatifs.

cad Ac irrégulier reconnaissant un Ag autre qu’Ag A ou B, exprimé par les hématies test et
provoquant une agglutination des hématies dans les conditions de réalisation du groupage ABO.
L’épreuve sérique ne peut être validée.

Pour surmonter la difficulté liée à la présence de ces anticorps, il faut :

- Identifier l’allo-anticorps présent dans le sérum du malade à l’aide d’un panel érythrocytaire
- Refaire le groupage en utilisant des hématies tests dépourvues de l’antigène correspondant à
l’anticorps identifié.

Témoin AB positif : sérum Ab + hématies du sujet

Il est le garant de l’épreuve globulaire, elle résulte d’une réaction de polyagglutinabilité. La

polyagglutinabilité des hématies est un phénomène immunologique. Il s’agit d’un antigène qui
est démasqué ou anormalement présent à la surface des globules rouges et reconnu par un
anticorps spécifique présent dans la plupart des sérums humains = antiT, antiTn…

Témoin auto positif : sérum du sujet + ses propres hématies

Anticorps dirigés contre les antigènes du groupe sanguin du patient lui-même : Dans certains
cas, les patients peuvent développer des anticorps dirigés contre leurs propres antigènes
sanguins. La présence d’un auto-anticorps de classe IgM perturbe aussi bien l’épreuve globulaire
que l’épreuve sérique donc toutes les réactions sont fortement positives et le test d’auto-
agglutination est positif.

Pour surmonter la difficulté au niveau de :

°° L’épreuve globulaire : en général, 2 ou 3 lavages en eau physiologique à 37°C permettent

d’éluer les auto-anticorps. Si ces lavages restent insuffisants pour éluer la totalité des anticorps,
on pratiquera une élution à 56°C pendant 10 mn. L’épreuve globulaire est validée par le témoin
AB négatif.

°° L’épreuve sérique : la difficulté est surmontée par une ou plusieurs adsorptions du sérum
du malade sur des hématies de GS O à + 4°C. L’épreuve sérique est validée par le témoin allo
négatif.
b-Discordance entre l’épreuve globulaire et sérique avec des témoins négatifs :

-Sang de nouveau-né : Les anticorps naturels sont souvent de titre faible, voire absents
(souvent anticorps anti-A, anti-B maternels) c’est le seul cas où une défaillance de l’épreuve
sérique peut être acceptée.

-Titre d’anticorps faible (immunodéprimé) : La discordance se traduit par une absence

d’agglutination attendu à l’épreuve sérique sur plaque Pour surmonter la difficulté, il faut faire
l'épreuve sérique en tube avec incubation à +4 °C et utiliser des hématies est traitées par les
enzymes protéolytiques.

-Allogreffe ABO incompatible : incompatibilité ABO mineures

-Hémopathies malignes : LA, SMP.

-Présence d’hémolysines ABO à titre élevé : La présence d’hémolysine anti-A et / ou anti-B à

titre élevé chez les sujets de GS O peut se traduire au niveau de l’épreuve sérique par une
agglutination plus faible avec les hématies tests A et/ou B associée à l’hémolyse d’une partie ou
de la totalité de ces hématies tests. Pour surmonter le problème, il faut décomplémenter le
sérum pendant 30 mn à 56°C et refaire l’épreuve sérique.

5-Image de double population :

L’agglutination avec les anticorps anti A et / ou anti B et anti AB n’est pas totale. Il existe des GR
libres. Cette image de double population se remarque particulièrement sur plaque d’opaline,
lors de la détermination du groupe ABO, les agglutinats baignent sur un fond rose.

L’image de double population peut s’observer dans les situations suivantes :

- Les transfusions non iso-groupe = Malade de groupe A (ou B ou AB) transfusé avec du sang de
GS O

- L’hémorragie fœtale : les GR du fœtus peuvent pénétrer dans la circulation maternelle

- Les groupes A faibles

-Hémopathies malignes

- Les chimères : ce sont des mosaïques constituées de deux populations de cellules provenant de
deux zygotes génétiquement différents.

6-phénomène de rouleaux :

Les rouleaux sont des amas de globules rouges qui ressemblent à des assiettes empilées. Leur
formation est due le plus souvent à la présence de certaines protéines en quantité anormale
dans le sang (immunoglobulines, fibrinogène). Les rouleaux fournissent une indication non
spécifique de la présence d'une pathologie.
La difficulté est surmontée au niveau :

°° De l’épreuve globulaire par un simple lavage des hématies avec de l’eau physiologique,
l’épreuve globulaire est validée par le témoin AB négatif.

°° De l’épreuve sérique en diluant légèrement (au 1/2 ou au 1/3) le sérum dans l’eau
physiologique tout en préservant le pouvoir hémagglutinant des anticorps du système ABO.
L’épreuve sérique est validée par un témoin allo négatif.