République du Bénin

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Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique

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Université Nationale d’Agriculture

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Ecole d’Aquaculture
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Licence Professionnelle

THEME

Etude préliminaire des effets d’un biocide agricole (Emamectine benzoate) sur les femelles
ovigères et le développement embryonnaire de Macrobrachium macrobrachion, Herklots,
1851

Réalisé par :

Sadeler K.O. ADEYEMI

Superviseur : Tuteur de stage :

Pr. Elie MONTCHOWUI Dr Arsène M. HOUSSOU
Professeur Titulaire des Universités Chercheur à l’URAGeP/LaSAH
Université Nationale d’Agriculture
Enseignant-Chercheur à l’Ecole
d’Aquaculture 7ème
Promotion
Université Nationale d’Agriculture
Certification
Je soussigné, Prof Dr Elie MONTCHOWUI, Professeur Titulaire des Universités,
Enseignant-Chercheur à l’Ecole d’Aquaculture de l’Université Nationale d’Agriculture
(UNA), certifie que ce travail a été réalisé par l’étudiant Kouyè Obafèmi Sadeler
ADEYEMI sous ma supervision, dans le cadre de son mémoire de fin de formation pour
l’obtention du diplôme de licence Professionnelle en Aquaculture de l’Université Nationale
d’Agriculture (UNA).

Le superviseur
Professeur. Elie MONTCHOWUI
Professeur titulaire des Universités
Ecole d’Aquaculture, Université Nationale d’Agriculture (UNA), Bénin

i
Dédicace
A mes parents Jean T. ADEYEMI et Fatima AMIDOU pour leurs contributions morales et
financières

ii
Remerciement
Je dis merci à mon superviseur le Professeur Elie MONTCHOWUI, Professeur Titulaire des
Universités, Enseignant-chercheur à l’Ecole d’Aquaculture de l’Université Nationale
Agriculture (Bénin) pour sa disponibilité et ses conseils qui ont été indispensables pour la
réalisation de cette étude.
Je tiens à remercier Dr Arsène Mathieu HOUSSOU qui a été pour moi un guide le long de
mes recherches. Sa disponibilité et ses conseils étaient capital tout au long des
expérimentations et de la rédaction de ce mémoire.
Mes remerciements vont également à l’endroit de Dr Guillaume KOUSSOVI qui m’a épaulé
et orienté tout au long des activités pratiques afin que je puisse conduire à bien
l’expérimentation.
Je voudrais aussi remercier le doyen en Master, Fabrice LOKONON pour son assistance, sa
disponibilité et son divers conseil.
Mes profondes reconnaissances vont à l’endroit de tous les enseignants de l’Ecole
d’Aquaculture pour leurs sacrifices et leurs engagements tout au long de notre formation
universitaire, encore une fois merci.
A tous ceux ou celles qui m’ont soutenue indirectement d’une manière ou d’une autre , je
vous remercie
Et pour finir, j’exprime mes profondes reconnaissances à mes parents.

iii
Liste des acronymes

iv
TABLE DES MATIRES

Certification...............................................................................................................................................i
Dédicace...................................................................................................................................................ii
Remerciement..........................................................................................................................................iii
Liste des acronymes................................................................................................................................iv
Resumé...................................................................................................................................................vii
Abstract.................................................................................................................................................viii
INTRODUCTION....................................................................................................................................1
PARTIE 1: SYNTHESE BIBLIOGRAPHIE...........................................................................................3
1.1- Description...................................................................................................................................3
1.1.2- Taxonomie.............................................................................................................................4
1.1.3- Morphologie....................................................................................................................5
1.1.4- Zones de distributions...................................................................................................7
1.1.5- Habitat et biologie...................................................................................................8
1.2 Généralité sur les pesticides...............................................................................................................8
1.2.1 Définitions...................................................................................................................................8
1.2.2 Importance des pesticides.....................................................................................................9
1.2.3 Classification des pesticidess...........................................................................................9
1.3 Etude de cas EMACOT....................................................................................................................11
1.3.1 Présentation..............................................................................................................................11
1.3.2 Principes actifs.....................................................................................................................11
1.3.3 Propriété physique et chimique....................................................................................12
PARTIE II- MATERIEL ET METHODES..........................................................................................13
2.1- Présentation du site d’expérimentation...........................................................................................13
2.2- Matériel biologique et leur origine..................................................................................................13
2.3-Matériel de mesures et de contrôle...................................................................................................15
2.4-Methode............................................................................................................................................18
2-4-1- Dispositif expérimental et conduite expérimentrale...........................................................18
2-4-2- Identification des doses de l’expérimentation.................................................................18
2-4-3- Test de toxicité aigüe....................................................................................................19
2.4.1.4- Traitement des données.........................................................................................21
III-RESULTATS ET DISCUSSIONS....................................................................................................21
3.1-effet des differantes doses d’emamectine benzoate sur les œufs de Macrobrachium macrobrachion v
................................................................................................................................................................21
3.1.1-données des parmetres physico-chimiques durant l’experimtation.................................21
3-2-Sensibilité des femelles ovigères à l’émamectine benzoate.............................................................22
3-3-Effet de l’émamectine benzoate sur la durée du développement embryonnaire et l’éclosion des
œufs........................................................................................................................................................23
3-3-1-Effet de l’émamectine benzoate sur la durée des stades de développement......................24
3-3-2-Viabilité des œufs dès la mort de la femelle......................................................................27
3-3-3-Survie des larves à l’éclosion........................................................................................27
3-4-DISCUSSION..................................................................................................................................29
3-5-CONCLUSION................................................................................................................................30
Référence bibliographique......................................................................................................................31

vi
LISTE DES FIGURES

Figure 1: Spécimens mâle (a) et femelle (B) de Macrobrachium macrobrachion..................................4

Figure 2: Anatomie externe d’une crevette Macrobrachium (Forster et Wickens, 1972).......................6
Figure 3: Zones de distribution naturelle de Macrobrachium en Afrique de l’Ouest (Zabi et Le Loeuff,
1992)......................................................................................................................................................7
Figure 4: mécanisme de transport des pesticides dans l’environnement..............................................10
Figure 5: image du pesticide EMACOT..............................................................................................11
Figure 6: Structure chimique de l’émamectine benzoate.....................................................................12
Figure 7: Carte montrant la vallée de l’Ouémé et le site de collecte des post-larves de Macrobrachium
macrobrachion......................................................................................................................................14
Figure 8: Pose de nasse pour la capture des post-larves de crevette....................................................15
Figure 9:vu d’une femelle ovigère de Macrobrachium macrobrachion...............................................15

LISTE DES TABLEAUX

Table 1:Moyenne des paramètres physico chimiques journaliers au cours de l’essai...................21

vii
Resumé
La modernisation de l’agriculture fait appel à l’usage des pesticides dans le but de maximiser
le profit. EMACOT, un insecticide tres utilisé dans le delta de la vallée de l’ouémé et don’t la
matière active est l’emamectine benzoate fait l’objet de cette étude. Il s’agit d’observer
l’effets de ce biocide (Emamectine benzoate) sur les femelles ovigères et le développement
embryonnaire de Macrobrachium macrobrachion. En effet, deux testes ont été effectués. Un
pré-teste et un teste aigu. Pour le pré-test, six differantes doses d’emamectine benzoates ont
été tesées : 5,7913 µg/L (D1) ; 2,89 µg/L (D2) ; 1,45 µg/L (D3) ; 0,72 µg/L (D4) ; 0,36 µg/L
(D5) ; 0,18µg/L (D6).en ce qui concerne le test aigu, trois doses sont testées: 57,913 µg/L
(D1) ; 115,826 µg/L(D2); 231,652µg/L(D3). L’unité experimental est un bac transparent de
capacité 3L contenant 1L de solution de chaque dose avec une femelle ovigère puis un
diffiseur d’air. L’entretient est effectué et les parametres physico-chimie remplissent les
normes et sont donc favorable aux essaies. Toute les doses testées pourle pré-teste n’ont pas
d’effet ni sur les femelles ovigère ni sur les oeufs. Par contre, les resultats du teste aigu on
permis d’une part de remarqué que les femelles ovigère qui ont nouvellement pondu sont plus
sensibles à l’effet mortel de l’emamectine benzoate que celle qui ont pondu deja quelques
jours et D’autre part, que l’emamectine benzoate reduit le temps de croissance en function du
stade de development des oeufs de Macrobrachium macrobrachion pondu.
On retient de tout ces essais que l’emamectine benzoate a une toxicité plus prononcé sur les
femelles ovigères de Macrobrachium macrobrachion pondu (surtout celles qui ont
nouvellement pondu) que sur les oeufs qu’elles portes.
Mots clés: Developpement embryonaire, EMACOT, Emamectine benzoate, femelle ovigère,
Matière active, Toxicité

viii
Abstract

ix
INTRODUCTION
L’agriculture est sans doute un secteur très important à l’humanité en ce sens qu’elle fournis de la
nourriture, des matières premières, et de l’empois. Selon la banque mondial (2021), ce secteur
joue donc un rôle déterminant dans la réduction de la pauvreté, la hausse des revenus et
l’amélioration de la sécurité alimentaire. En Afrique de l’Ouest, l’agriculture a un poids
économique particulier puisque dans la zone de l’Union Economique et Monétaire Ouest
Africaine (UEMOA), elle contribue pour 30% au Produit Intérieur Brut (PIB) et emploie plus de
50% de la population active (Renard et al., 2004). Vu de nombreux avantages que regorges ce
secteur, les paysans sont donc à la recherche des conditions et des facteurs pouvant leurs
permettre de maximiser le profit.
En effet, le Bénin dispose de plusieurs bas-fonds et plaines inondables auxquels s’intéressent
d’avantage les paysans face à la dégradation sans précédent des terres du plateau (Agbossou et
Danvi, 2000 ; Boko, 2016). Le delta du fleuve oueme reste une zone très prometteuse pour
l’agriculture du pays en générale et précisément pour la culture cotonnière. Ainsi, dans le but
d’obtenir un résultat à la fois quantitative et qualitatives, les paysans font recours aux pesticides
dont entre autres les herbicides permettant d’emblaver un espaces de culture plus grand, lutté
contre les adventices et les insecticides pour bannir les insectes nuisibles. L’agriculture deviens
donc moderniser et l’usage de ces produis prend d’ampleur chaque année. Parallèlement à son
immense potentialité pour l’agriculture, le delta du fleuve oueme joue aussi un rôle très importent
dans l’alimentation. Pour la majorité des villages de la zone deltaïques, la pêche est l’une des
principales activités que la population pratique durant toute l’année. Ils en récoltent donc des
poissons et des crustacés tels que Macrobrachium macrobrachion qui sont importants pour
l’alimentation des populations. Parmi les pesticides qu’utilises les agriculteurs dans cette zone
figure l’Emacot (emamectine benzoate). Considérant les quantités prescrites pour l’application de
ses produits, seulement 1% arrives directement sur les agents cibles, tandis que plus de 30 à
50%peut être perdu dans l’aire et le reste sur les espèces non ciblés de la terre ferme (Zhang et
al., 2004 ; Garvrilescu,2005 ; Gil rt Sinfort,2005). S’ils ont permis un grand progrès en
agriculture, les scientifiques et l’opinion publique s’intéressent aux effets des restes de ces
produits sur la santé des animaux habitant les environnements dans lesquels ils sont étés
appliqués. Les troubles neurologiques, reproductives, de croissance, cancérigènes, immunitaires,
endocriniennes, cytologiques, et génétique ont été identifiées chez plusieurs espèces aquatiques

1
(Luna-Acosta et al.,2012 ;Ray et al., 2013 ; Kremer, 2017 ; Blackshaw et al ., 2016) . ces
produits se retrouvent dans le milieu affecte donc la faune aquatique parmi laquelle se trouve la
crevette Macrobrachium macrobrachion, une especes très pratique à la consommation et un
modèle pour des études plus ou moins approfondie dans l’Unité de Recherche en Aquaculture et
Gestion des Pêches (URAGP) du Laboratoire des Sciences Animales et Halieutique (LaSAH) du
Bénin en vue d’une domestication future car la pression exercée sur elle en milieux naturelle a de
forte chance de réduire la dynamique reproductive de cette dernière (Koussovi et al., 2021).
L’importance de Macrobrachium macrobrachion et cette menace à la quelle elle est confrontée
sont les raisons de notre dévouement à évaluer la tolérance des embryons de Macrobrachium
mcrobrachion à un pesticide (émamectine benzoate) pour le compte de stage de rédaction du
mémoire de licence. L’objectif global est de connaitre les perturbations que peut engendrés ce
produit sur la crevette d’eau douce M. macrobrachion.
Il s’est agi spécifiquement d’observer l’effet de l’emmetine benzote sur les femelles ovigères et le
développement embryonnaire de Macrobrachium macrobrachion

2
PARTIE 1: SYNTHESE BIBLIOGRAPHIE
1.1- Description
Macrobrachium macrobrachion(voir figure…..)est une espèce de crevette d’eau douce ayant le
carpe du second chélipède un peu plus long que la paume ; la paume est plus longue que les
doigts, qui sont droits et couverts d’une couche dense de soies courtes et douces, évoquant de la
fourrure. Le corps des adultes est de couleur sombre, à l’exception des parties dorsales de couleur
claire sur les 3-4 derniers segments abdominaux ; le côté de la carapace est traversé par une ligne
sombre allant du dessous de l’œil jusqu’à la base du second chélipède. A l’inverse, le corps des
spécimens femelles et juvéniles est transparent ou légèrement pigmenté ; le côté de la carapace
présente trois (03) lignes verticales ou obliques (parfois à peine visibles) qui convergent vers la
base des troisièmes-quatrièmes pattes. Une caractéristique notable est la présence d’un « V » ou «
Y » renversé bleu sombre sur le dessous de la tête, les bras de cette marque en V entourant la
bouche. C’est une espèce de grande taille, avec un corps mesurant jusqu’à 130 mm
(Cumberlidge, 2006). Le nombre de dents rostrales varie de 11 à 16 sur la face dorsale et de 2 à 7
sur la face ventrale, donnant une formule dentaire 11-16 / 2-7 (Konan, K.M. 2009).

3
 a B

Figure 1: Spécimens mâle (a) et femelle (B) de Macrobrachium macrobrachion

1.1.2- Taxonomie
La systématique de la famille des Palaemonidae a beaucoup évolué depuis 1950. En effet,
Holthuis (1950) a défini quatre sous-familles à l’intérieur de la famille des Palaemonidae
(Palaemoninae Rafinesque, 1815 ; Pontoniinae Kingsley, 1878 ; Typhlocaridinae ;
Euryrhynchinae Holthuis, 1950). Balss (1957) reconnaît également quatre sous-familles dans
cette famille. Actuellement, la famille des Palaemonidae ne compte que deux sous-familles :
Palaemoninae et Pontoniinae. La sous-famille des Pontoniinae compte des espèces marines
(Valencia & Campos, 2007) et celle des Palaemoninae regroupe des espèces marines,
estuariennes et d’eaux douces. Cette sous-famille comporte au moins 17 genres (Holthuis, 1980 ;
Ramos-Porto & Coelho, 1998 ; Valencia & Campos, 2007) dont quatre (Leander Desmarest,
1849 ; Palaemon Weber, 1795 ; Brachycarpus Bate, 1888 et Macrobrachium Bate, 1868) ont des
représentants en Afrique de l’Ouest. La différenciation entre certaines espèces du genre
Macrobrachium est souvent difficile du fait de la grande homogénéité des formes et de la grande
variabilité morphologique intraspécifique (Mariappan & Balasundaram, 2004). De plus, De
Grave et al. (2008) signalent que Macrobrachium est l’un des genres de crevettes chez lesquels le

4
statut taxonomique des populations est douteux. La position systématique du genre
Macrobrachium, proposée par Martin et Davis (2001) est la suivante :

Phylum………………………………. Arthropoda
Sous-Phylum………………………… Crustacea
Classe………………………………… Malacostraca
Sous-Classe……………………….........Eumalacostraca
Super-Ordre………………………....... Eucarida
Ordre…………………………………. Decapoda
Sous-Ordre……………………............ Pleocyemata
Infra-Ordre …………...……………… Caridea
Super-Famille....................................... Palaemonoidea
Famille................................................... Palaemonidae
Sous-Famille……….............................Palaemoninae
Genre………………………………… Macrobrachium
Espèce…………………………………Macrobrachium macrobrachion

1.1.3- Morphologie
Le corps est divisé en trois divisions principales : la tête , le thorax et l'abdomen. La tête et le
thorax sont joints pour former un céphalothorax, contenant les mandibules, les flagelles, le rostre
et les yeux contenant une tige contenant cinq paires de pattes de marche. L'abdomen contient six
segments du corps avec le dernier segment portant un uropode (telson). Les cinq autres segments
portent la natationappareils (nageurs). Les deuxièmes pattes de marche sont modifiées pour
former les pinces et colorées de manière distincte en bleu ou en brunâtre. Les pattes contiennent
des poils (fourrures). Les mâles adultes sont considérablement plus gros que les femelles. La
deuxième patte de marche du mâle est plus épaisse. Le céphalothorax est également
proportionnellement plus grand chez le mâle que chez la femelle tandis que l'abdomen est plus
étroit chez la femelle. Les pores génitaux du mâle se situent entre les bases de la cinquième
jambe qui marche. Les pores génitaux féminins sont à la base des troisièmes pattes de marche. La
plèvre abdominale est plus basse et l'abdomen plus large chez la femme que chez l'homme. La

5
plèvre femelle forme une chambre à couvain qui carie les œufs entre la ponte
et l'éclosion. (Deekae et al, 2010)

Figure 2: Anatomie externe d’une crevette Macrobrachium (Forster et Wickens, 1972).

6
1.1.4- Zones de distributions

Figure 3: Zones de distribution naturelle de Macrobrachium en Afrique de l’Ouest (Zabi et Le

Loeuff, 1992).

7
1.1.5- Habitat et biologie
Macrobrachium macrobrachion vit dans des environnements d’eau douce influencés par des
zones adjacentes d’eaux saumâtres (Anger, 2013). Elle est souvent rencontrée dans des
conditions extrêmement turbides. Les femelles gravides migrent vers l’aval des fleuves vers les
estuaires, où les œufs éclosent en larves qui nagent librement dans l’eau saumâtre (Bauer, 2013).
Avant de se métamorphoser en post larves (PL), les larves planctoniques passent par plusieurs
stades. Après métamorphose, les PL adoptent un style de vie plus benthique et commencent à
émigrer vers l’eau douce en amont (Crisp et al., 2016). Les larves nagent activement queue en
premier, côté ventral au-dessus. Ce n’est qu’à partir du stade PL et même plus tard, que les
crevettes commencent à nager vers l’avant, côté dorsal au-dessus. A partir de la métamorphose,
les crevettes peuvent aussi marcher, pas seulement sur le substratum mais aussi sur des zones
humides incluant des graviers de par les bords des fleuves (Mueller & Carpes, 1991). Les larves
consomment en grande partie du zooplancton (principalement miniatures de crustacés), de très
petits vers, et les différents stades larvaires d’autres crustacés (New, 2002 ; Nik Sin & Shapawi,
2016). Les post-larves et les adultes sont omnivores, se nourrissant des algues, plantes
aquatiques, mollusques, insectes aquatiques, vers et autres crustacés (Turker, 2006 ; Collins &
Williner, 2003 ; Sourinejad et al., 2015). Les mâles et les femelles ont des taux de croissance
différents et les mâles montrent une croissance individuelle hétérogène ; ce sont des facteurs très
important dans la gestion du grossissement (Jayachandran, 2001).

1.2 Généralité sur les pesticides

1.2.1 Définitions
Le mot pesticide est un terme général utilisé pour décrire une substance (ou mélange) qui
détruit un organisme nuisible ou prévient ou detruit les dommages qu’un organisme
nuisible peut causer. Les organismes nuisibles peuvent etre des insects, des souris, ou
d‘autres animaux, des plantes indésirables (mauvaises herbes), des champions, des
bactéries ou des virus. Le code international de conduite pour la distribution et
l’utilisation des pesticides définit un pesticide comme toute substance ou association de
substances qui est destinée à repousser, détruire ou combattre les ravageurs, y compris les
vecteurs de maladies humaines ou animales et les espèces indésirables de plantes et

8
 d’animaux causant des dommages ou se montrant autrement nuisibles (FAO, 1990; OMS,
1994;FAO, 1996).
1.2.2 Importance des pesticides
Les pesticides sont indispensables dans l’agriculture urbaine. Ils permettent de contrôlés la
production en obtenant un résultats agissant à la fois sur la quantité et la qualité de la production.
Il est généralement admis que les pesticides jouent un rôle important dans le développement
agricole car ils peuvent réduire les pertes de produits agricoles et améliorer le rendement
abordable et la qualité des aliments[Aktar W., Paramasivam M., Sengupta D., Purkait S.,
Ganguly M., Banerjee S. Impact assessment of pesticide residues in
ish of Ganga river around Kolkata in West Bengal. Environ. Monit. Assess. 2008;157:97–104.
doi: 10.1007/s10661‐008‐0518‐9.] . Environ un tiers des produits agricoles sont produits en
fonction de l'application de pesticides. Sans l'utilisation de pesticides, il y aurait une perte de 78
% de la production de fruits, une perte de 54 % de la production de légumes et une perte de 32 %
de la production de céréales. Par conséquent, les pesticides jouent un rôle essentiel dans la
réduction des maladies et l'augmentation des rendements des cultures dans le monde (Tudi et al.,
2021)
1.2.3 Classification des pesticidess
Le classement des pesticides de l’organisation Mondiale de la santé (OMS), en fonction de leur
degré detoxicité est largement reconnu et utilisé par les gouvernements du monde entier. Les
pesticides y sont classés comme suit :
AC : Acaricide (contrôle des acariens)
AP: Aphicide
B : Bactériostatique (sol)
FM : Fumigant
F : Fongicide, autres que ceux utilisés pour le traitement des semences
FST : Fongicide, pour le traitement des semences
H : Herbicide
I : Insecticide
IGR : Insecticide régulateur de croissance
Ix : Ixodicide (contrôle des tiques)
L : Larvicide

9
M : Molluscicide (contrôle des limaces)
MT : Miticide
N : Nématocide (contrôle des nématodes à kystes)
O : Autres usages contre les agents pathogènes des plantes
PGR : Régulateur de croissance des plantes
R : Rongicide
RP : répulsif (espèce)
S: Appliqué au sol, non utilisés avec les herbicides/PGRS
SY : Synergiste
1.2.4 Mode d’infiltration des pesticides dans le sol

Figure 4: mécanisme de transport des pesticides dans l’environnement

Source : wikipedia

10
1.3 Etude de cas EMACOT
1.3.1 Présentation
Emacote est un insecticide utilisé en agriculture générale et plus dans les cultures vivrières, les
maraichages et le coton pour lutter essentiellement contre les chenilles. Son utilisation est très
remarqué dans le delta du fleuve Ouémé au Bénin.

Figure 5: image du pesticide EMACOT

1.3.2 Principes actifs

Le benzoate d’émamectine, un insecticide biologique lactone macrocyclique (figure 5), est un
nouveau type d’insecticide antibiotique dérivé semi-synthétique hautement efficace produit à
partir du produit de fermentation de l’avermectine B 1. Il a un large spectre, une efficacité ultra-
élevée, une faible toxicité, une pollution résiduelle et environnementale. En raison de sa faible
solubilité dans l’eau (24 mg/L), les formulations principales du benzoate d’emamectine sont
toujours EC avec de nombreux solvants organiques et WDG avec beaucoup de
tensioactifs. Cependant, le dosage de solvant organique de la plupart des EC est généralement
supérieur à 80%, ce qui a augmenté la pollution de l’environnement. Ces dernières années, 5,7%

11
de benzoate d’émamectine WDG se sont développés rapidement. Cependant, par rapport à la
faible teneur en benzoate d’émamectine, les tensioactifs hautement concentrés avec plusieurs fois
de pesticide dans le WDG augmentent également le risque écologique.

Figure 6: Structure chimique de l’émamectine benzoate

1.3.3 Propriété physique et chimique

La formule brute de l’émamectine benzoate se présente comme suit: C56H81NO15 (emamectine
B1a benzoate) + C55H79NO15 (emamectine B1b benzoate).

● Poids moléculaire: 1008,3/ 994,2

● Aspect (état physique, couleur, odeur):Poudre cristalline blanche ou jaune clair.

● Température de fusion/décomposition/ébullition: 141 – 146°C.

● Tension de vapeur (t° 20-25°): 4 x 10-3 mPa à 25°C

● Solubilité dans l'eau (t° 20-25°): Emamectine benzoate est faiblement soluble dans l’eau

(0,024 g/Là pH 7 25°C).

● Solubilité dans solvants organiques (t° 20-25°): Emamectine est soluble dans le methanol,

l’acetone et assimilés ; est insoluble dans l’hexane.

● Aspect (état physique, couleur, odeur): Poudre cristalline blanche ou jaune clair

12
 ● Teneur min. et max. en m.a. (en g/kg): min 950g/kg

Nature des et teneur (%) en isomères: Emamectine benzoate est composée de 2 isomères :B1a
≥90% et B1b ≤10%.

PARTIE II- MATERIEL ET METHODES

2.1- Présentation du site d’expérimentation

L’Unité de Recherche en Aquaculture et Gestion des Pêches (URAGeP) du Laboratoire des
Sciences Animales et Halieutique (LaSAH) de l’Université Nationale d’Agriculture a servi de
cadre pour cette étude.
2.2- Matériel biologique et leur origine
Les femelles ovigères de la crevette d’eau douce macrobrachium macrobrachion constituent le
matériel biologique de notre expérimentation. Ces geniteurs sont capturés dans le delta de
l’ouéme plus precisément à Agonli lowé, un village situé dans la commune d’Adjohoun et dans
l’arrondissement d’azowlissè. Agonli lowé est un village innondable mais favorable a
l’agriculture. . Le climat est du type subéquatorial caractérisé par quatre saisons : deux saisons
des pluies d'inégale importance dont la plus grande s'étale de mars-avril à juillet et la plus petite
de septembre à novembre, et deux saisons sèches dont la plus grande va de décembre à mars et la
plus petite de juillet et août à début septembre (Adam et Boko, 1993). Les activités de pêche sont
intenses en période de crue dans les plaines inondées mais se poursuivent toute l’année dans le lit
du fleuve (Welcomme, 2002 ; Chikou et al., 2007 ; Imorou., 2007 ; Lalèyè et al., 2007).
La capture des géniteurs sont faite grace à des nasses que poses les pechers dans les bordures du
fleuve (figure…). Les individus capturés sont ensuite conserver dans des viviers conçus à cet
effet dans le milieu naturel (Figure…). Enfin ces derniers sont transférés sur le site
d’expérimentation dans les conditions favorisant leurs survies. Cet transfère est donc effectué la
nuit dans les environs de 20h. Les individus sont dans une nasse que contient un récipient avec un

13
peut d’eau. Une fois au laboratoire ils sont conservés a nouveau dans des bacs en présences de
l’oxygène fournis par des souffleurs.

Figure 7: Carte montrant la vallée de l’Ouémé et le site de collecte des post-larves de

Macrobrachium macrobrachion

14
Figure 8: Pose de nasse pour la capture des post-larves de crevette

Figure 9:vu d’une femelle ovigère de Macrobrachium macrobrachion

2.3-Matériel de mesures et de contrôle

15
Un microscope électronique utilize pour
les observations

Un pHmètre de marque VOLTCRAFT

permettant de pour contrôler l’acidité du
milieu

Un multiple testeur permettant de

mesuré la température et les matières
solubles dissoutes

16
Une balance de précision 0,0001g
utilisée pour peser les différentes
quantités du produit a utiliser

Des plastics transparents de capacité 3L

utilisé comme aquarium pour
l’expérimentation

Des plastics transparents de capacité

25L qui permet de conserver les
géniteurs

17
Un bécher de capacité 1000ml servant
pour les mesures d’eau pour les dosages

Une épuisette utilisé pour la prise des

crevettes afin de les manipulés
facilement

2.4-Methode
2-4-1- Dispositif expérimental et conduite expérimentrale
L’expérimentation a été effectuée en deux phases :
2-4-2- Identification des doses de l’expérimentation
Cette première partie de l’expérimentation est un pré-test consistant à déterminer les doses à
utiliser dans la suite. Cet essai a duré 8 jours et a été fait dans des bacs transparent de capacité
3litres chacun et en présence des bulleurs. En effet, dans un précédemment effectué dans le
laboratoire sur les juvéniles, la dose létale 50 (DL50) de ces dernières a été fixer à 57,913µg/L en
72h.
En considérant que les œufs seront plus sensibles que les juvéniles, nous avons décidé de partir
du dixième de cette dose létale 50 (DL50) et de tester 6 doses tout en évoluant par une suite

18
géométrique de raison 2 avec cinq pas en dessous. Les doses testées sont donc : 5,7913 µg/L
(D1) ; 2,89 µg/L (D2) ; 1,45 µg/L (D3) ; 0,72 µg/L (D4) ; 0,36 µg/L (D5) ; 0,18µg/L (D6). Les
doses ont été testées à deux répétitions et deux témoins (0,00µg/L) ont été associés. Une femelle
ovigère est placée par doses et les œufs sont échantillonnés et observer au microscope chaque
12h. Les paramètres physico-himiques sont mesurés quotidiennement, les traitements sont
renouveler chaque 72h conformément à la duré de viabilité de la matière active, et les individus
sont nourris avec de l’aliment granulé titrant 35% de protéine. Le dispositif se presente comme
l’indique la figure suivante (figure 10)

D1-2 D5-2 T0 D1-1 D2-2 D4-1 D6-2

D5-1 D3-1 D6-1 T0 D4-2 D2-1 D3-2

Figur10: Bloc experimental du pré-test

2-4-3- Test de toxicité aigüe

Dans cette deuxième phases du teste s’est deroulé en deux séquances et trois diferentes doses
d’emmametine benzoate ont été testées 57,913 µg/L (D1) ; 115,826 µg/L(D2); 231,652µg/L(D3).
L’expérimentation a durée 8 jours en général.
La première séquance consiste à testé la sensibilité des femelle ovigères de Macrobrachium
macrobrachion a ces differantes doses. Chacun des traitements ont été répété cinq fois plus un
temoin pour chaque doses. Les solutions de chacun des traitements ont été obtenues par dilution.
Une solution mère a été preprer à cet effet et la quantité correspondante à chaque doses est en
suite prélevé à l’aide d’un seringue puis introduire dans les dans les 1L d’eau précédemment
mesures dans des bacs transparent de meme capacité. Dans ces bacs est ensuite placé des
femelles ovigère (une femelle par bacs) bac et leur mortalité a été suivie pendant 72heures. Les
paramètres physico-himiques sont mesurés quotidiennement, et les individus sont nourris avec de
l’aliment en granulé titrant 35% de protéine.
Le dispositif est composer de 21 bacs et se présente comme l’indique la figure suivante

19
Figure11:Bloc experimental du test aigu (première séquance)
La seconde séquance est pour observer l’effet de ces trois doses d’emamectine benzoate sur le
dévélopément embryonaire de Macrobrachium macrobrachion . les dosages ont été effectués
conformement à la prremière sequence. Les femelles ovigères sont introduite dans les solution.
Les œufs sont echantillonés et observés au microscop chaque 12h et des images sont prises à
chaque observation. Les paramètres physico-himiques sont mesurés quotidiennement, et les
individus sont nourris avec de l’aliment en granulé titrant 35% de protéine.

Figure 12: bloc experimental du test aigu (deuxieme séquance)

20
2.4.1.4- Traitement des données
Les données de la mesures des paramètres physico-chimie ont été enregistre dans le Excel et les
différentes moyennes sont calculées. Les photos prises au cours de l’observation sont rangé dans
un fichier world conçu à cette fin.

III-RESULTATS ET DISCUSSIONS
3.1-effet des differantes doses d’emamectine benzoate sur les œufs de Macrobrachium
macrobrachion
3.1.1-données des parmetres physico-chimiques durant l’experimtation
Le tableau (Tableau….) ci-dessous présente la moyenne journalière des paramètres physico-
chimiques de l’eau (température, pH et les matières solubles dessoudent) enregistrés au cours de
l’expérimentation. Durant ces jours d’essais, la temperature varie faiblement et envoisine en
moyenne 27,74 °C± 0,60. Le pH reste presque neutre soit une Valeur moyenne de 7,90±0,35.
Pour les matières solubles dissoutes, elles restent en moyenne 98,81±32,78, ce qui justifie la
variation plus ou moins importante de ces matières dissoutes dans l’eau causée la plus part de
temps par l’alimentation.

Table 1:Moyenne des paramètres physico chimiques journaliers au cours de l’essai

paramètre Jours 1 Jours 2 Jours 3 Jours 4 Jours 5 Jours 6 Jours 7 Jours 8

pH 7,81 7,93 7,72 7,88 7,66 8,25 7,97 8,00

Temperatur 27,87 27,93 28,21 27,64 27,31 27,57 28,32 27,10

en °C
Matiere 77,67 97,82 131,59 83,23 91,21 152,74 77,70 99,70
solubles
dissoudent

21
3-2-Sensibilité des femelles ovigères à l’émamectine benzoate
La figure 13 intitulée mortalité des femelles ovigères selon différentes doses d’émamectine
benzoate et selon l’âge de la ponte, révèle que les femelles ovigères d’un jour sont toutes mortes
à l’exposition à la plus petite dose de l’émamectine benzoate; alors que les femelles ovigères de
deux jours sont à 80% mortes à l’exposition à la plus petite dose et totalement mortes aux
deuxième et troisième doses. Tandis que 20% des femelles ovigères de trois jours sont mortes à
l’exposition aux deuxième et troisième doses. Aucun effet mortel n’est constaté sur les femelles
ovigères de quatre jours même à l’exposition à la plus forte dose considérée. Comparativement à
la dose témoin où aucun effet mortel n’est signalé sur les femelles ovigères.
On en déduit que, les femelles ovigères qui ont nouvellement pondu sont très fragiles et sensibles
à l’effet mortel de l’émamectine benzoate et que cet insecticide pourrait briser un lien
physiologique ou placentaire entre les femelles ovigères et les œufs.

120
PJ1 PJ2 PJ3 PJ4
100
Mortalité en 72h (%)

80

60

40

20

0
0,0 57,913 115,826 231,652
Doses expérimentales (µg/L)

Figure 13:Mortalité des femelles ovigères selon différentes doses d’émamectine benzoate et
selon l’âge de la ponte.

22
3-3-Effet de l’émamectine benzoate sur la durée du développement embryonnaire et
l’éclosion des œufs
Figure 14 illustre la variation du temps d’incubation et de la fréquence d’éclosion selon les doses
d’émamectine benzoate et l’âge de la ponte, montre que parmi les œufs de trois jours exposées à
la plus forte dose, 20% ont atteint un développement embryonnaire de deux jours et ont éclos ;
contrairement aux autres œufs de trois jours qui ont atteint un développement embryonnaire de
sept et dix jours pour des taux d’éclosion respectifs 60 et 80% à l’exposition aux deuxième et
première doses respectivement. Quant aux œufs de quatre jours, ceux exposées aux deuxième et
troisième doses ont atteint un développement embryonnaire de sept jours et ont un taux
d’éclosion de 60%. Tandis que les œufs exposés à la première dose ont un développement
embryonnaire de dix jours pour un taux d’éclosion de 80% comme les œufs de trois jours à la
même dose. Bien que les œufs d’un jour observés dans la dose référence ont atteint un
développement embryonnaire complet de 12 jours pour un taux total d’éclosion de 100%.
On retient que, l’âge de la ponte des œufs à l’exposition des doses de l’émamectine benzoate
affecte le développement embryonnaire et par conséquent le taux d’éclosion

23
 120 PJ1 14

12

Durée du d'éveloppement
Fréquence d'éclosion (%)
100

embryonnaire (jour)
PJ3 PJ4 10
80
8
60
6
40
4
20 2

0 0

Doses expérimentales (µg/L)

Figure14:Varia
tion du temps d’incubation et de la fréquence d’éclosion selon les doses d’émamectine benzoate
et l’âge de la ponte

3-3-1-Effet de l’émamectine benzoate sur la durée des stades de développement

Figure 15 décrivant la variation de la durée des stades de développement embryonnaire selon les
doses de l’émamectine benzoate et selon l’âge des œufs en début d’exposition, indique que la
durée de développement des œufs varie d’un stade à un autre stade embryonnaire et
considérablement sous l’effet de l’émamectine benzoate. Aucun des œufs d’un jour exposés aux
différentes doses d’émamectine benzoate n’a passé de stade I au stade embryonnaire II. Aucun
des œufs de deux jours exposés aux différentes doses n’a excédé le stade IV pour le stade
embryonnaire V. Tandis que, les œufs de trois et quatre jours ont subi l’embryogenèse jusqu’au
dernier stade embryonnaire comme les œufs témoins.
Les œufs de deux jours exposés aux différentes doses au stade de développement embryonnaire
IV ont montré une nette différence de durée comparés aux témoins, les œufs exposés aux
deuxième et troisième doses ont passé 75h environ de temps contrairement aux œufs exposés à la
première dose qui ont passé 100h comme le témoin.
En ce qui concerne les œufs de trois jours, le développement embryonnaire au stade IV a duré 75
et 50h environ pour les deux premières et la troisième doses respectivement. Et à partir du stade
V au dernier stade le temps de la croissance embryonnaire est devenu constant (25h environ) pour
24
les œufs exposés aux deux premières doses, alors que les œufs exposés à la troisième dose ont
passé un temps de 10h environ du stade V au VII avant de monter à 25h environ pour les deux
derniers stades.
Par rapport aux œufs de quatre jours, ces œufs exposés aux trois différentes doses d’émamectine
benzoate ont passé le même temps (75h environ) de croissance embryonnaire au stade IV et 10h
de croissance embryonnaire pour les autres stades (V à IX) sauf les stades V et VIII où les œufs
exposés à la première dose ont passé environ 25h de croissance.
On résume de ces informations de la figure… que les différentes doses de l’émamectine benzoate
ont majoritairement réduit le temps de croissance embryonnaire des œufs pondus et
principalement au niveau des stades IV à IX de l’embryogenèse des œufs des crevettes d’eau
douce M. macrobrachion

25
 120
0,0 µg/L 57,913 µg/L 115,826 µg/L 231,652 µg/L
Durée du stade de développement (Heure)

100

80

60

40

20

0
II
III

II
III

II
III

II
III
VII
VIII

VII
VIII

VII
VIII

VII
VIII
I

IV

IX
I

IV

IX
I

IV

IX
I

IV

IX
V
VI

V
VI

V
VI

V
VI
PJ1 PJ2 PJ3 PJ4
Age des œufs au début de l'exposition et Stades de développement embryonnaire

I II III IV V VI VII VIII IX Larve

Figure 15: Variation de la durée des stades de développement embryonnaire selon les doses de l’émamectine benzoate et selon l’âge
des œhgbb ufs en début d’exposition
3-3-2-Viabilité des œufs dès la mort de la femelle
La figure16, variation du taux d’œufs viables à l’heure de la mort de la femelle selon les doses
d’émamectine benzoate et selon l’âge des œufs en début d’exposition, évoque que 60 et 70% des
œufs respectifs de trois et quatre jours exposés à la première dose sont viables à la mort des
femelles qui les portaient contre 20% d’œufs viables de quatre jours exposés à la deuxième dose.
Au contrario, aucun œuf n’est viable à l’exposition à la plus forte dose de l’émamectine benzoate.
On conclut que, les œufs des crevettes ovigères de M. macrobrachion perdent de viabilité à
l’exposition à l’émamectine benzoate.

80
PJ3 PJ4
Pourcentage d'œufs viables à l'heure de

70
60
la mort de la femelle (%)

50
40
30
20
10
0
57,913 115,826 231,652
Doses expérimentales (µg/L)

Figure 16:Variation du taux d’œufs viables à l’heure de la mort de la femelle selon les doses
d’émamectine benzoate et selon l’âge des œufs en début d’exposition

3-3-3-Survie des larves à l’éclosion

La figure… de variation de la survie des larves 24 heures après éclosion, exprime qu’il y a une
survie très faible des larves obtenues après éclosion dans la première dose, comparativement aux
larves de la dose témoin.
On en tire que, la plus faible dose testée dans cette expérimentation a affaibli la survie des larves
obtenues après éclosion en 24h.

27
 0,0 µg/L
100%
80%
60%
40%
20%
231,652 µg/L 0% 57,913 µg/L

115,826 µg/L

Figure 17: Variation de la survie des larves 24 heures après éclosion

A la somme de toutes ces interprétations, les œufs des crevettes de M. macrobrachium sont très
fragiles, irrésistibles et sensibles à l’exposition à l’émamectine benzoate. L’émamectine benzoate
provoque une mort massive et précoce des œufs en réduit l’activité du développement
embryonnaire des œufs.

28
3-4-DISCUSSION
Vu l’importance de l’agriculture et les differantes méthodes qu’emploies les pratiquants,
notemment l’utilisation des pesticides, il est raisonable que les recherches scientifique
s’interessent aux effets de ses produits sur les animeaux ciblés. Dans la presante etude il s’agit
d’observer l’effet de l’insecticide emacot (emamectine benzoate) sur le developpement
embriyonnaire de laa crevette d’eau douce Macrobrachium macrobrachion. Au cours de cette
experimentation, les parametres physico-chimique enregistrés ne presentent pas de diference
pouvant nuire et se trouvent donc dans la fouchette recommandée. (T°C = 26-31 ; pH = 6-8,5 ;
O2 > 6 mg/l et les ions ≤ 0,03 mg/l) pour l’élevage des crevettes du genre Macrobrachium
(Valenti et al., 2010 ; Zimmermann, 1998 ; New et al., 2003). Alors, les mortalités observé
pendant l’essais sont dues exclusivement à l’action de l’emamectine benzoate et selon les doses.
Toute les doses testées pour le teste aigu on causé de mort pour les femelles ovigère. Neanmoins,
les femelles qui on nouvellement pondu sont plus fragille que celles qui on pondu il y a de cela
quelques jours. Du coups, elles sont plus tolerante à l’effet mortel de l’ememectine benzoate.
Toujours pour l’etude de la toxicité de ce produit, d’autres auteurs ont prouvé qu’il existe des
etres plus sensible a ce produit que la crevette d’eau douce. Le benzoate d'émamectine a causé
une paralysie irréversible sur les nématodes à galles et la dose efficace la plus faible pour
tuer M . incognita était de 0,1 à 0,5 mg kg -1, inférieur à celui rapporté pour l'abamectine (Cheng
Y et al, 2011). Il faut souligner que de notre etude il resort également que ce produit affecte le
temps de developpement des oeufs. Ce resultats a été appuiyé par plusieurs auteurs. Cependant,
les résidus d'EMB pourraient entraîner des effets sublétaux dans l'espace et dans le temps,
notamment en influençant le temps de développement, le poids, la fécondité, la longévité et les
paramètres physiologiques sans causer directement la mort (Khan et al, 2018 ; Wang et al, 2021 ;
Mokbel et al, 2020 ; Ziaee et al, 2022 ; Xu et al, 2021 ; kandil et al, 2020 ; khan et al, 2021).
L'essai de l’emamectine benzoate en formulation EMACOT, sur les femelles ovigère de
Macrovrachium macrobrachium montre qu’il a une toxicité tres importante sur ces dernière et
affect le temps du developpement embryonnaire.

29
3-5-CONCLUSION
Au regard de tout ce qui precede, l’intoxication reste un danger qui menace vraiment la survie de
la crevette d’eau douce Marobrachion macrobrachion. En effet, notre etude montre que meme
les doses inferieurs à celles reconmandée d’emamectine benzoate peuvent etre mortelles pour ces
dernières. A part sa capacité de tué, ce produit peut engendré des effets sublétaux dans l'espace et
dans le temps en influençant le temps de développement par exemple Il serait donc dangereux
que ce produit se retrouve dans le milieu naturel en forte concentration. Il est souhaitable de
sensibiliser la population des zones concernées sur les consequences que peuvent engendré
l’utilisation de ce produit afin de protegé la vie aquatique.

30
Référence bibliographique

31