Thème: Induction de La Tubérisation in Vitro Chez Le Taro (Colocasia Esculenta (L.) Schott (Aracees) ) Pour La Production de Semences

RÉPUBLIQUE DE CÔTE D'IVOIRE MINISTERE DE L'ENSEIGNEMENT SUPERIEUR
UNION-DISCIPLINE-TRAVAIL ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
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Laboratoire de Génétique
Année académique 2008-2009
MEMOIRE
Présenté à l’UFR Biosciences pour obtenir le
DIPLÔME D’ETUDES APPROFONDIES DE GENETIQUE
OPTION AMELIORATION DES ESPECES VEGETALES
Thème : Induction de la tubérisation in vitro chez le

taro (Colocasia esculenta (L.) Schott (Aracees)) pour
la production de semences.
Par DROH Germain
Directeur scientifique : Directeur de stage :
Professeur N’GUETTA Assanvo S. P. Docteur LOLO Obou Marcel
Laboratoire de Génétique Laboratoire de Génétique

Dédicaces
« Au Dieu Tout Puissant qui fait et permet tout, Eternel

et Miséricordieux Seigneur, honneur et gloire à toi aux
siècles des siècles pour tes innombrables grâces à mon égard.
Amen.»
« A la mémoire de mon défunt père et de mon défunt frère

ainé, que le Seigneur les accepte dans sa félicité céleste et leur
accorde le repos éternel.»
I
Remerciements
Le présent mémoire est le fruit des travaux réalisés dans le cadre du stage pratique du Diplôme
d‟Etudes Approfondies (DEA) de génétique de l‟UFR Biosciences (Université de Cocody-Abidjan).
Les travaux ont été réalisés au Laboratoire de Génétique de l‟UFR Biosciences.
Ce stage a été rendu possible grâce à la sollicitude, la disponibilité et la contribution de plusieurs

personnes à qui il m‟est particulièrement agréable d‟exprimer mes vifs et sincères remerciements :
Le Professeur N‟GUETTA Assanvo Simon Pierre, responsable du 3ème cycle au Laboratoire de

Génétique qui m‟a permis de poursuivre ma formation et qui a accepté d‟être également mon directeur
scientifique.
J‟exprime ma profonde gratitude au Docteur LOLO Obou Marcel, mon encadreur, qui malgré ses
nombreuses occupations a accepté de m‟encadrer. Ses sages recommandations, sa vision éclairée en
matière de recherches et sa sollicitude ont suscité en moi une véritable détermination pour la
recherche.
J‟adresse mes remerciements aux Docteurs GNANGBE Félix, SOKOURI Didier, KOUASSI Abou
Bakari, TIAN-BI Yves N., GONEDELE Séry-bi, COULIBALY Yahya et N‟NAN Oulo qui ont bien
voulu m‟accorder de leur temps dans la réalisation de ce travail en apportant des critiques pertinentes,
des conseils et encouragements qui sont venus au moment opportun. Que le DIEU Tout Puissant dans
son infinie miséricorde se souvienne de ces âmes généreuses.
A Monsieur KOFFI Thomas, technicien au Laboratoire de Génétique, pour son apport considérable.
Je remercie également tous mes amis et connaissances dont : AMIAH Ahou Mireille, SORO Brahima,
KASSI Fernand, KABLAN Aka Yves, KOUASSI Koffi Daouda, LOLO Josiane, M‟BO Kacou
Antoine, KOUADJO Zaka Claude G., COULIBALY Baba, ADJI Gbessi Eric, KONE S.Yonawa,
GOUE Z. Blaise, KOFFI Richard SAHI N. Noëlle, N‟GUESSAN Kouassi Gérard, Mme TOBOE
Hermance, OULAÏ Anderson, FAMA Patricia, BAYALA Rodrigue et l‟ensemble des étudiants
membres du Club des Sciences Biologiques (CS Bio) de l‟UFR Biosciences.
Je tiens à remercier aussi, tous ceux qui de près ou de loin, ont par leurs conseils, leurs disponibilités et
leur amitié ont contribué à rendre ce travail possible.
Je remercie particulièrement ma maman, mes frères et leurs épouses pour leurs prières et soutiens à
divers niveaux. Seigneur Dieu, manifeste ta bonté envers eux et garde les encore longtemps.
II
TABLE DES MATIERES
Dédicaces .................................................................................................................................... I
Remerciements .......................................................................................................................... II
TABLE DES MATIERES ....................................................................................................... III
LISTE DES FIGURES ............................................................................................................. VI
LISTE DES TABLEAUX ........................................................................................................ VI
LISTE DES ANNEXES ..........................................................................................................VII
LISTE DES ABBREVIATIONS .......................................................................................... VIII
INTRODUCTION ...................................................................................................................... 1
I. GENRALITES SUR Colocasia esculenta (L) SHOTT .......................................................... 3
I.1. Classification botanique ....................................................................................................... 3
I.2. Origine et distribution .......................................................................................................... 3
I.3. Niveau de ploïdie et diversité génétique .............................................................................. 5
I.4. Biologie de la plante ............................................................................................................ 5
I.4.1. Appareil végétatif ...................................................................................................... 5
I.4.2. Les fleurs ................................................................................................................... 7
I.4.3. Système de reproduction ........................................................................................... 7
I.4.3.1. la reproduction végétative ................................................................................... 7
I.4.3.2. Possibilité de reproduction sexuée ...................................................................... 7
I.5. Pratiques culturales .............................................................................................................. 8
I.5.1 Préparation des sols et plantation ............................................................................... 8
I.5.2. Densité de la culture .................................................................................................. 8
I.6. Importance de la plante ........................................................................................................ 9
I.6.1. Utilisations ................................................................................................................. 9
I.6.2. Production ................................................................................................................ 11
I.7. Contraintes de production .................................................................................................. 11
III
I.7.1. Exigences écologiques ............................................................................................. 11
I.7.2. Maladies du taro ...................................................................................................... 11
I.7.3. Quelques insectes et ravageurs ................................................................................ 13

II. MATERIEL ET METHODES ............................................................................................ 15
II.1. Matériel ............................................................................................................................. 15
II.2. Méthodes .......................................................................................................................... 15
II.2.1. La Culture in vitro .................................................................................................. 15
II.2.2. Préparation et mise en culture des explants............................................................ 17
II.2.3. Induction à la tubérisation ...................................................................................... 17
II.2.4. Variables mesurés .................................................................................................. 19
II.2.5. Analyse statistique des données. ............................................................................ 19

III. RESULTATS ..................................................................................................................... 20
III.1. Taux d‟infection et de reprise en fonction de la nature de l‟explant. .............................. 20
III.2. Effet des concentrations de sucre. ................................................................................... 20
III.2.1. Effet du Milieu MS 30 .......................................................................................... 20
III.2.2. Effet du milieu MS 50........................................................................................... 22
III.2.3. Effet du milieu MS 80........................................................................................... 22
III.2.4. Analyse comparée des milieux MS30, MS50 et MS80 ........................................ 22
III.3. Effet du génotype. ........................................................................................................... 25
III.4. Corrélations entre les variables étudiées. ........................................................................ 28
III.5. Effet des phytohormones sur la tubérisation in vitro ...................................................... 29
III.5.1. Action de la cytokinine (BAP) .............................................................................. 29
III.5.2. Action des auxines (AIA et AIB) .......................................................................... 29
III.5.3. Action combinée des cytokinines et des auxines .................................................. 32

IV. DISCUSSION .................................................................................................................... 34
CONCLUSION ........................................................................................................................ 37
IV
PERSPECTIVES ...................................................................................................................... 38
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ................................................................................. 39
ANNEXES ............................................................................................................................... 43
Résumé ..................................................................................................................................... 49
Abstract .................................................................................................................................... 49
V
LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Evolution géographique des Aracées cultivées Xanthosoma, Colocasia, Alocasia et

Cyrtosperma; et répartition géographique de Colocasia en Afrique. ........................................ 4
Figure 2 : Distribution géographique des Colocasia et Xanthosoma en Côte d‟Ivoire.............. 4
Figure 3 : Dessin de la structure de Colocasia esculenta. ...................................................... 6
Figure 4 : Quelques maladies et ravageurs de taro................................................................... 14
Figure 5: Microboutures de Colocasia esculenta ..................................................................... 18
Figure 6: Initiation des explants sur milieu MS ....................................................................... 21
Figure 7: Vitroplants âgés 8 semaines...................................................................................... 21
Figure 8: Partie hypogée (a) et partie épigée (b). ..................................................................... 23
Figure 9 : Microtubercules obtenus après 8 semaines de culture. ............................................ 23
Figure 10: Production de rejets dans le milieu MS 30 + 2 mg.l-1 BAP .................................... 30
Figure 11: Longueur des racines : (a) MS 30 + 2 mg.l-1 de AIB ;( b) Témoin........................ 31
Figure 12: Production de rejets dans le milieu MS 30 + 2 mg.l-1 BAP + 0,5 mg.l-1 AIB ......... 33
Figure 13: Prolifération de tissus de sur milieu MS 30 +2 mg.l-1 BAP + 1 mg.l-1 AIB ........... 33
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I : Composition nutritionnelle du taro (Colocasia et Xanthosoma)………...…….....10
Tableau II : Composition nutritionnelle de colocasia. ……………………………………….10
Tableau III: Production en tonnes du taro (Xanthosoma et Colocasia)….…………………...12
Tableau IV : Caractérisation morphologique des Colocasia en Côte d‟Ivoire………… ……16
Tableau V : Effet du milieu de culture sur les variables intermédiaires (4 semaines)…….….24
Tableau VI : Effet du milieu de culture sur les variables intermédiaire (8 semaines)………..24
Tableau VII : Effet du milieu de culture sur les variables fixées (8semaines)……………....26
VI
Tableau VIII: Effet du génotype sur les variables intermédiaires (8 semaines)...……………26
Tableau IX: Effet du génotype sur les variables fixées (8 semaines)………………………..27
Tableau X : Corrélation entre les différentes variables étudiées………………………….28
Tableau XI : Effet des phytohormones sur les variables intermédiaires (4 semaine)………30
Tableau XII : Effet des phytohormones sur les variables intermédiaires (8 semaine)……...31
Tableau XIII : Effet des phytohormones sur les variables fixées (8 semaine)………………32
LISTE DES ANNEXES
Annexe I : Description des variétés locales de Colocasia cultivées en Côte d‟Ivoire selon
Gnangbé (1992) ........................................................................................................................ 43
Annexe II : Composition du milieu minéral de Murashige et Skoog ....................................... 47
Annexe III : Tableau récapitulatif des taux d‟infection et de reprise. ...................................... 48
VII
LISTE DES ABBREVIATIONS
°C Degré Celsius
°Chl Degré chlorimétrique
µg Microgramme
AIA Acide Indole 3-Acétique
AIB Acide Indole 3-Butylique
BAP Benzyl 6-Aminopurine
CNF Centre National de Floristique
DsMV Dasheen Mosaic Virus
DT Diamètre moyen des microtubercules
FAO Organisation des Nations Unies pour l'Alimentation et l'Agriculture
g Gramme
GA3 Acide gibbérellique
HP Hauteur moyenne du vitroplant
IF Indice de forme des microtubercules
IITA Institut International d'Agriculture Tropicale
Kcal Kilocalorie
KJ Kilojoule
LT Longueur moyenne des microtubercules
mg Milligramme
mg.l-1 Milligramme par litre
MS Murashige et Skoog
NF Nombre moyen de feuilles par vitroplant
NJ Nombre moyen de rejets par vitroplant
NR Nombre moyen de racines par vitroplant
PC Pourcentage de tubérisation
pH Potentiel d‟Hydrogène
PT Poids moyen des microtubercules
VMT Virus de la Mosaïque du Taro
VIII
Introduction
INTRODUCTION
Aliment de base des populations des îles du Pacifique et des Antilles, le « taro » se
classe parmi les tubercules les plus consommés dans de nombreux pays d‟Afrique. En Côte
d‟Ivoire, il occupe la troisième place après le manioc et l‟igname mais avant la patate douce
(Gnangbé & Kouakou, 1992).
Le vocable « taro » dérivé du mot polynésien « talo » désigne ici toutes les variétés
comestibles des genres Xanthosoma et Colocasia. Ce terme n‟est cependant pas universel. Au
Cameroun par exemple les Colocasia sont appelés « taro » et «macabo» est utilisé pour
désigner les Xanthosoma.
La reproduction des Colocasia est essentiellement végétative. Pour la création des nouvelles
plantations, les semenceaux utilisés sont des fragments de tubercules ou des rejets. Ce mode
de culture utilisant les tubercules récoltés présente deux inconvénients majeurs. Il peut
entraîner la dissémination d‟agents pathogènes dans les plantations à partir de tubercules
infestés, ce qui entraine nécessairement une baisse de rendement et une altération de la qualité
des récoltes. Des agents pathogènes comme Pythium myriotylum et le virus de la mosaïque du
taro (VMT) sont ainsi disséminés dans les plantations. Ils ont pu causer une baisse de
production d‟environ 50% au Costa Rica et 90% au Cameroun (Salzar et al, 1985 ;
Nzietchueng, 1985b). L‟utilisation de rejets oblige également le paysan à laisser dans le
champ une partie de sa récolte dans l‟objectif d‟avoir des rejets semences pendant la saison
des pluies. Dans tous les cas, cette pratique traditionnelle commune à beaucoup de plantes à
tubercules impose au paysan de réserver jusqu‟à un tiers de la récolte pour la création de
nouvelles plantations. Le déficit de semences saines apparait donc comme l‟une des
contraintes majeures à la production des Colocasia.
Pour résoudre ces problèmes, des efforts ont été réalisés à divers niveaux dans la filière de
production, notamment au niveau de l‟amélioration des techniques de culture au champ et au
laboratoire. En effet, plusieurs travaux ont été réalisés sur la régénération et la multiplication
de plants de taro. Salazar et al. (1985) ont produit des plantules saines par thermothérapie à
38°C pendant cinq à huit semaines, suivie d‟une culture in vitro de méristèmes sur un milieu
Murashige et Skoog (1962).
Les travaux sur la tubérisation in vitro pour la production de semences de Colocasia sont
moins connus. Chez Xanthosoma par contre, Tsafack et al., (2009) à la suite d‟Omokolo et
1
Introduction
al., (2003) ont réussi à induire la tubérisation in vitro après 60 jours de culture sur milieu
MS80 additionné de phytohormones.
La microtubérisation est un phénomène complexe qui dépend à la fois des facteurs

environnementaux et génétiques (Wheeter & Tibbits, 1997 ; Omoloko et al., 2003). Parmi ces
facteurs, il y a la thermopériode (Grison, 1991 ; Tsafack et al., 2009), la photopériode (John et
al., 1993; Omokolo et al., 2003 ; Tsafack et al.,2009), les régulateurs de croissance exogènes
et la concentration en sucre (Kefi et al., 2000 ; Omokolo et al., 2003 ; Fogaça et al., 2008 et
Tsafack et al., 2009). Parmi tous ces facteurs, la concentration en sucre des milieux de culture
est le plus déterminant dans le processus de tubérisation in vitro (Mes & Menge, 1954,
Omokolo et al., 2003). Les microtubercules produits peuvent servir de semences après
acclimatation, mais ils sont également très commodes pour les manipulations, la conservation
et le transport de matériel génétique (Kwiatkowski et al., 1988). Ces travaux peuvent servir
de référence pour la production rapide de microtubercules semences de Colocasia en Côte
d‟Ivoire.
La présente étude a pour objectif d‟induire la tubérisation in vitro pour la production de

semences chez Colocasia esculenta dans différents milieux de culture où l‟effet des
concentrations en sucre et l‟effet des phytohormones seront testés.
2
Revue bibliographique
I. GENRALITES SUR Colocasia esculenta (L.) SCHOTT
I.1. Classification botanique
La classification botanique de Colocasia esculenta selon Deysson (1967) se présente

comme suit :
Embranchement : Phanérogames
Sous- embranchement : Angiospermes
Classe : Monocotylédones
Ordre : Arales
Famille : Araceae
Sous-famille : Aroideae
Genre : Colocasia
Espèce : esculenta
Sous-espèces : esculenta et antiquorum
I.2. Origine et distribution
Le centre d‟origine de Colocasia serait l‟Extrême-Orient, notamment la région Indo-

Malaisienne (Plucknett, 1974). Sa culture s‟est étendue vers l‟est et le sud-est asiatique
incluant la Chine et le Japon ainsi que les îles du Pacifique. Elle s‟est déplacée ensuite vers
l‟ouest avec les peuples Mégalithiques jusqu‟à l‟Arabie et l‟est méditerranéen. Elle a été
introduite en Afrique via l‟Egypte il y a environ 2000 ans. De l‟Egypte, elle fut propagée le
long des côtes de l‟Afrique orientale et traversa le continent vers l‟ouest avec les voyageurs,
les explorateurs et les commerçants (figure 1). Colocasia est connu en Afrique comme
« vieux taro » par rapport à Xanthosoma qui est le « nouveau taro» venu d‟Amérique dès le
XIXème siècle. Les négriers ont favorisé le transfert de Colocasia aux Caraïbes et en Amérique
tropicale.
En Côte d‟Ivoire, la culture du taro se fait dans tout l‟écosystème forestier humide (figure 2).
La distribution locale des différentes variétés varie avec les habitudes alimentaires ethniques.
3
Figure 1 : Evolution géographique des Aracées cultivées Xanthosoma, Colocasia, Alocasia et

Cyrtosperma; et répartition géographique de Colocasia en Afrique.
Source : Plucknett (1974)
Figure 2 : Distribution géographique des Colocasia et Xanthosoma en Côte d‟Ivoire (la

densité de peuplement varie d‟est en ouest avec les types de taro)
Source : Gnangbé & Kouakou (1992)
4
I.3. Niveau de ploïdie et diversité génétique
Toutes les variétés de Colocasia cultivées dans le monde sont considérées comme
appartenant à la seule espèce Colocasia esculenta (L.) Schott qui comprend deux
sous-espèces (Plucknett, 1974):
 Colocasia esculenta, variété esculenta se distingue par un appendice stérile du spadice

plus court que la partie mâle de l‟inflorescence.
 Colocasia esculenta, variété antiquorum se caractérise par un appendice stérile au
moins aussi long que la partie mâle de l‟inflorescence.
Il existe une variabilité du nombre chromosomique chez les variétés de colocasia cultivées.
En effet, si la plupart des variétés sont diploïdes à 2n = 28 chromosomes, des variétés
triploïdes à 3n = 42 chromosomes sont connues. Des tétraploïdes à 4n = 56 chromosomes ont
été également répertoriés (Marchant, 1971 ; Plucknett, 1976 ; Kuruvilla & Avtar Singh,
1981).
I.4. Biologie de la plante
I.4.1. Appareil végétatif
Le taro est une plante herbacée, vivace par son rhizome tubéreux qui forme le tubercule
principal. L‟appareil végétatif est composé de deux parties (figure 3) :
 La partie hypogée est constituée d‟une tige épaisse, tubéreuse ou rhizomateuse de grosseur
variable contenant des matières de réserve. Cette tige d‟où naissent les feuilles et les rejets
est appelée tubercule principal (ou corme); elle peut porter des tubercules de deuxième
rang appelés tubercules latéraux (Varin D. & Vernier P., 1994).
 La partie épigée de la plante adulte est constituée de feuilles peltées orbiculaires dont la
hauteur peut atteindre plus de 2 m dans les conditions de culture favorables. Les jeunes
plantes sont constituées de feuilles à longs pétioles engainants. Les feuilles grandes et
belles, de couleur verte plus ou moins foncée peuvent atteindre 70 cm de longueur et 60
cm de largeur avec un long pétiole vert ou rouge violacé engainant à la base avec des
lobes basaux arrondis (Haudricourt, 1941).
5
Pied-mère (issu de la bouture initiale)
Limbe
Partie
épigée
Pétiole
Collet
Rejet
Racines
Tubercule
secondaire
Partie
Bourgeon
hypogée
Tubercule
principal
Figure 3 : Appareil végétatif de Colocasia esculenta.
Source : Varin D. & Vernier P., 1994
6
I.4.2. Les fleurs
Les fleurs sont organisées en épi appelé spadice de couleur jaune-pâle, lequel est
entouré d‟une grande bractée sessile, la spathe dont les bords sont soudés à la base en forme
de tube au moment de l‟anthèse (Haudricourt, 1941). La spathe oblong-lancéolée est divisée
en deux parties égales par une constriction transversale (Nzietchueng, 1985b). Le spadice,
plus court que la spathe, est formé de fleurs unisexuées apérianthées. Les fleurs femelles
fertiles sont situées autour de la base du spadice. Elles sont de simples ovaires à placentation
axile et à une loge dont le sommet forme le stigmate (Haudricourt, 1941 ; Nzietchueng,
1985b). Les fleurs mâles sont représentées par des étamines autour de la partie supérieure du
spadice. Ces étamines sont soudées par groupes de 2 à 6 en un petit cylindre
(Synandre). L‟extrémité du spadice est souvent dépourvue de fleurs, c‟est l‟appendice. Entre
les fleurs femelles et les fleurs mâles fertiles, se trouve la région des fleurs femelles stériles
(Plucknett et al., 1970).
I.4.3. Système de reproduction
I.4.3.1. la reproduction végétative
Comme toutes les Aracées, Colocasia se multiplie selon le mode de propagation

végétative et la diversité des clones cultivés en Afrique de l‟ouest est relativement limitée.
La propagation végétative est un mode de reproduction asexuée. A la différence du semis qui

donne de nouveaux spécimens (avec un nouveau patrimoine génétique), la multiplication
végétative génère des clones (avec le même patrimoine génétique que la plante mère). Il suffit
de diviser les tubercules de Colocasia en plusieurs morceaux lors de la remise en végétation
pour avoir de nouvelles plantes toutes identiques. Les rejets ou jeunes plantes sont aussi
utilisés dans les plantations.
I.4.3.2. Possibilité de reproduction sexuée
Les clones de Colocasia ne fleurissent qu‟occasionnellement. Cette floraison a lieu chez

certaines variétés lorsque le sol est très riche et que les plantes ne sont pas récoltées pendant
plus d‟une année.
On ne peut prévoir la floraison, qui même lorsqu‟elle apparaît, n‟est pas abondante. Colocasia
tout comme Xanthosoma ne produit pas de graines à l‟état naturel (IITA, 1979).
L‟amélioration des Aracées en général, et celle des Colocasia, en particulier est
7
presqu‟impossible par les méthodes traditionnelles utilisant la reproduction sexuée. C‟est

pourquoi depuis quelques années, la floraison est provoquée artificiellement par des
pulvérisations foliaires de solution aqueuse d‟un sel potassique d‟acide gibberillique (GA3)
aux stades 3 à 6 feuilles (Nzietchueng, 1985b ; Boko, 1986).
La séparation des fleurs femelles et mâles par la constriction transversale rend

l‟autopollinisation quasiment impossible. La pollinisation artificielle consiste à supprimer cet
obstacle. Elle est facilitée par la protogynie du taro.
Ces caractéristiques biologiques et la forte dépression de consanguinité dans la descendance

d‟autofécondation artificielle justifieraient l‟allogamie chez le taro (Nzietchueng, 1985b ;
Gnangbé, 1986).
I.5. Pratiques culturales
Les pratiques culturales sont spécifiques à chaque pays selon que l‟agriculture est de
type moderne ou de type traditionnel.
I.5.1 Préparation des sols et plantation
En général, le sol est labouré selon le système des billons ou le système des buttes
pour faciliter la croissance des tubercules. Le taro se cultive dans un sol légèrement acide (pH
de 5,5-6,5), humide, riche en éléments organiques. Il pousse à mi-ombre mais tolère le plein
soleil s'il y a suffisamment d'eau.
La semence constituée de morceau de tubercule ou de rejet est placée dans un trou de 15 à 20

cm de profondeur. Le semis est effectué au début de la saison des pluies sur des parcelles non
irriguées. Dans les parcelles irriguées, les semis peuvent se faire toute l‟année (Grubben et al.,
2004).
I.5.2. Densité de la culture
La monoculture du taro est rare en Afrique. En effet, le taro est toujours cultivé en
association avec la banane plantain, l‟igname, le manioc, le riz ou même le cacao selon les
régions. Cette association favorise l‟éloignement des plants de taro les uns des autres, ce qui
contribue à la formation de gros tubercules.
Dans les pays où la monoculture de taro est pratiquée, la distance entre les plants varie de 50 à
80 cm sur la ligne et de 70 à 120 cm entre les lignes (Grubben et al., 2004). En effet, les
plants éloignés les uns des autres produisent de gros tubercules mais peu nombreux. Dans ce
8
cas la lutte contre les mauvaises herbes devient difficile car la culture ne couvre pas toute la
surface. Cependant le rapprochement des plants diminue considérablement la taille des
tubercules (Varin D. & Vernier P., 1994).
Dans tous les cas l'entretien se réduit à un sarclage au début de la végétation. Les taros
couvrent bien le sol dans le cas où les plants sont rapprochés.
I.6. Importance de la plante
Comme Xanthosoma, l‟importance des Colocasia se situe tant au niveau de leurs

utilisations qu‟au niveau de leur production.
I.6.1. Utilisations
Les tubercules de Colocasia se consomment sous différentes formes. Ils peuvent être bouillis,
frits, grillés, transformés en « foufou » ou préparés sous forme de ragoût seul ou combinés à
d‟autres aliments. Ils sont également utilisés dans la fabrication de boisson (Nzietchueng et
al., 1985). Les jeunes feuilles de certaines variétés de Colocasia sont consommées dans de
nombreux pays comme des légumes-feuilles. Elles contiennent en moyenne 20 % de
protéines, alors que les tubercules n‟en contiennent que 4 % (Onwueme et al., 1994).
Le taro est une source appréciable d‟énergie alimentaire à l‟instar des deux tubercules majeurs
en Côte d‟Ivoire (l‟igname et le manioc). Il possède une valeur globale de 386 à 390 cal dans
100 g de poids sec (Amani, 1989). En outre, sa valeur protéique est supérieure à celle du
manioc et du plantain. Il est très riche en glucides (Tableau I et II). De tous les féculents
consommés en Côte d‟Ivoire, le taro est celui dont l‟amidon présente les grains les plus fins et
donc un haut potentiel de digestibilité. Aussi, peut-il être utilisé pour l‟alimentation des
nourrissons (Sasson, 1986 ; Bown, 2000). Des travaux effectués par Amani (1989) ont montré
que la farine de certaines variétés locales présente de bonnes qualités boulangères.
Les usages médicinaux de Colocasia sont peu nombreux. Au Gabon, les tubercules râpés sont
appliqués en cataplasme pour accélérer la maturation des furoncles, traiter les morsures de
serpents et le rhumatisme. Aux Caraïbes, l‟utilisation d‟extraits de feuilles de colocasia
additionnés à la tisane lutte contre la diarrhée (Nzietchueng, 1985b). A l‟île Maurice, on
ingère les jeunes feuilles de Colocasia cuites à l‟eau pour traiter l‟hypertension artérielle et les
affections hépatiques ; quant au jus des feuilles (décoction), il s‟emploie en externe pour
traiter l‟eczéma. Les tubercules servent à soigner coliques et autres maux de ventre au
Rwanda (Boullard, 2001).
9
Tableau I : Composition nutritionnelle du taro (Colocasia et Xanthosoma).

Source : Bencini & Walston, (1991)
Colocasia Xanthosoma
Eau 63 - 85 % 70 - 77 %
Glucides 13 - 29 % 17 - 26 %
Lipides 0,2 - 0,4 % 0,2 - 0,4 %
Protéines 1,4 - 3 % 1,3 - 3,7 %
Vitamine C 7 - 9 mg/100g 35 mg/100g
Cellulose 0,7% 0%
Tableau II : Composition nutritionnelle de colocaia.

Source : Holland et al., (1991)
100g de la partie comestible du 100g de la partie comestible
tubercule de Colocasia de feuille fraîche de
colocasia
Eau 68300 mg 85700 mg

Energie 444 KJ (106 Kcal) 147 KJ (36 Kcal)
Protéines 1400 mg 4400 mg
Lipides 200 mg 900 mg
Glucides 26200 mg 26000 mg
Fibres alimentaires 3600 mg 4000 mg
Calcium 25 mg 110 mg
Magnésium 33 mg 45 mg
Phosphore 58 mg 60 mg
Fer 0,8 mg 23 mg
Carotène 0,037 mg 6,38 mg
Thiamine 0,08 mg 0,2 mg
Riboflavine 0,03 mg 0,43 mg
Niacine 0,7 mg 1,5 mg
Acide ascorbique 13 mg 52 mg
Folate 0 mg 0,039 mg
10
I.6.2. Production
La production mondiale du taro (Colocasia et Xanthosoma) est estimée à 9,2 millions

de tonnes sur 1,6 millions d‟hectares de surfaces cultivées (FAO, 2006). Les principaux pays
producteurs sont le Nigeria, le Ghana, la Chine, le Cameroun et la Côte d'Ivoire. Le taro est
plus cultivé en Afrique que partout ailleurs, bien qu‟il soit une culture introduite. L‟Afrique
réalise 75% de la production mondiale soit 6,9 millions de tonnes avec une surface cultivée de
1,4 millions d‟hectares (FAO, 2006). La Côte d‟Ivoire occupe le 5ème rang mondial avec une
production de 370 000 tonnes en 2005 (Tableau III).
Le rendement en Afrique est de 5 tonnes par hectare, celui du monde entier avoisine les 6
tonnes par hectare. Mais une bonne culture sur un sol fertile produit au moins 12 tonnes à
l‟hectare et des rendements de plus de 40 tonnes par hectare ont été atteints à Hawaï (Grubben
et al., 2004).
Les tubercules et les feuilles de Colocasia sont produits essentiellement en agriculture de

subsistance et pour la consommation domestique. Ils sont cependant répandus sur les marchés
locaux de Côte d‟Ivoire et des autres pays africains. La production commerciale à grande
échelle est rare en Afrique.
I.7. Contraintes de production
I.7.1. Exigences écologiques
En général, la production des Aracées en Afrique est confrontée à de grandes

exigences en eau (plus de 2 000 mm de pluie par an, durant tout le développement de la
plante). Les dégâts causés par certains rongeurs comme les animaux sauvages, le coléoptère
du taro et autres entravent la production du taro. Mais il faut compter aussi les pertes de
récoltes dues à des maladies causées par des virus, champignons ou bactéries.
I.7.2. Maladies du taro
 Le virus de la mosaïque du taro (VMT ou DsMV: Dasheen Mosaic Virus)
Le VMT est le virus qui ravage le plus les cultures de taro dans le monde (Chen et al,
2001). C‟est une espèce du genre Potyvirus de la famille des Potyviridae et constitué d‟un
filament flexible (>700nm). Ce virus est transmis par les pucerons Aphis gossypii et provoque
une mosaïque le long des nervures des feuilles (figure 4a).
11
Tableau III: Production en tonnes du taro (Xanthosoma et Colocasia).
Source : FAO (2006)

Production
Rang Pays producteurs de
2004 2005
taro
En tonne En % En tonne En %
1 Nigeria 4 027 000,00 38 4 027 000,00 38
2 Ghana 1 800 000,00 17 1 800 000,00 17
3 Chine 1 638 328,00 15 1 638 500,00 16
4 Cameroun 1 127 560,00 11 1 100 000,00 10
5 Côte d'Ivoire 370 000,00 3 370 000,00 4
6 Papouasie-Nouvelle- 256 000,00 2 260 000,00 2

Guinée
7 Madagascar 200 000,00 2 200 000,00 2
8 Japon 184 800,00 2 184 800,00 2
9 Rwanda 136 359,00 1 136 895,00 1
10 Philippines 102 274,00 1 102 000,00 1
11 République centrafricaine 100 000,00 1 100 000,00 1
12 Égypte 116 673,00 1 100 000,00 1
Autres pays 556 308,00 5 501 596,00 5
Total 10 615 302,00 100 10 520 791,00 100
12
 Le mildiou (Phytophthora colocasiae)
Le mildiou est la maladie la plus grave qui affecte le taro. Le symptôme apparaît comme
des taches circulaires noires sur les feuilles et pétioles. Ces tâches se développent rapidement
et provoquent souvent la mort prématurée des feuilles (figure 4b). Le mildiou est favorisé par
une condition climatique fraîche et humide (mars à juillet).
 La pourriture molle des tubercules
La pourriture molle du taro est causée par le champignon Pythium myriotylum (figure 4c).
Selon Agueguia (1993), cette maladie a provoqué des baisses drastiques de production au
Cameroun (de 1,8 million de tonnes entre 1970 et 1975 à 0,6 million de tonnes entre 1984 et
1985).
 La pourriture dure des tubercules et bien d’autres
Les agents causals de la pourriture dure sont mal connus. Elle se caractérise par des
portions durcies dans le tubercule, une consistance molle et caoutchouteuse du tubercule avec
une teneur basse en amidon d‟où l‟exsudation de l‟eau lorsqu‟on le presse. Sclerotium
rolfsii provoque le rabougrissement de la plante, le pourrissement du tubercule et la formation
de nombreux sclérotes sphériques (Safo Kantaka, 2004).
I.7.3. Quelques insectes et ravageurs
Sur le taro, les insectes et ravageurs, en se nourrissant, peuvent provoquer des dégâts.
Les insectes Aphiis gossypii et Tarophagus proserpina transmettent des viroses. Les individus
adultes des scarabées du taro (Papuana spp.) creusent des galeries dans le tubercule jusqu‟au
bourgeon principal ; les jeunes plantes flétrissent et meurent. Les larves de Spodoptera litura,
de Hippotion celerio (figure 4d) et les escargots (figure 4e) détruisent le limbe alors que les
nématodes (figure 4f) provoquent la destruction des tubercules.
13
a) Symptômes du VMT b) Flétrissement des feuilles de Colocasia

causé par Phytophthora colocasiae.
c) Tubercules pourris causé par Pythium d) Dégâts dus aux larves de Hippotion
myriotylum celerio sur une feuille de Colocasia.
e) Escargot mangeur de feuille de f) Pourriture dure de tubercules due à la

taro maladie du miti miti causé par le
nématode Hirschmanniella miticausa
Figure 4 : Quelques maladies et ravageurs du taro.
Source: Carmichael et al., 2008.
14
Matériel et méthodes
II. MATERIEL ET METHODES
II.1. Matériel
Le matériel végétal utilisé pour la présente étude est composé de 302 vitroplants
appartenant à trois variétés locales (C1, C4 et C6) de Colocasia esculenta. Les caractéistiques
de ces trois variétés sont présentées dans le tableau IV. Les échantillons proviennent d‟une
serre du Laboratoire de Génétique situé au Centre National de Floristique (CNF), de jardins
potagers de Port-Bouët et d‟un champ de taro à M‟bromé (sous préfecture d‟Azaguié). Ces
variétés ont été retenues en fonction de leur abondance sur les sites visités.
Les vitroplants utilisés dans les expériences de tubérisation sont obtenus sur milieu MS30
sans phytohormone. Ce sont :
 202 vitroplants de la variété C1
II.2. Méthodes
II.2.1. La Culture in vitro
La culture in vitro est l‟ensemble des techniques basées sur la mise en culture
d‟explants en milieu artificiel contrôlé, à l‟abri de toute contamination (en axenie).
Le but de la culture in vitro est de permettre la régénération de la plante entière autonome et

fertile à partir de la propriété des cellules végétales : la totipotence énoncée en 1902 par
Haberlandt.
Les techniques de culture in vitro sont des outils qui permettent d‟améliorer les plantes mais
aussi d‟assainir les variétés ou bien de réduire les coûts de production. D‟autres applications
sont possibles. Cependant, la vitrification, la perte de caractères intéressants et les problèmes
inhérents à ces techniques en sont les contraintes majeures.
15
Tableau IV : Caractérisation morphologique des Colocasia en Côte d‟Ivoire.
Source : Gnangbé & Kouakou, 1992

(S Exc : sans excroissance ; A Exc : avec excroissance)
Temps de
Couleur du Tâche au Couleur Aspect de Aspect
cuisson
pétiole sinus des fibres la tige du limbe
en minute
C1 (Colocasia esculenta -
Vert olive rouge Violettes Stolonifère S Exc < 30
variété esculenta)
Gris vert Absente Jaunâtres Normale S Exc < 30
Vert jaunâtre blanche Jaunâtres Stolonifère S Exc < 30
variété antiquorum)
Vert olive blanche Jaunâtres Normale S Exc > 60
Vert rayé blanche Jaunâtres Normale S Exc > 60
Rouge violacé Absente Jaunâtres Normale S Exc > 60
Vert olive rayé blanche Jaunâtres Normale A Exc > 60
Vert rayé blanche Jaunâtres Normale A Exc > 60
Rouge violacé rouge Jaunâtres Normale A Exc > 60

Gris vert rouge Jaunâtres Normale S Exc < 30

Vert olive rouge Jaunâtres Stolonifère S Exc < 30
16
II.2.2. Préparation et mise en culture des explants
Des morceaux cubiques de tubercules de 2 à 3 cm, comprenant l‟apex ou un bourgeon

axillaire, sont nettoyés à l‟eau de robinet avec quelques gouttes de savon liquide puis trempés
dans de l‟alcool à 70° pendant 5 minutes. Les tubercules sont ensuite trempés dans une
solution d‟hypochlorite de sodium (eau de javel) à 8°chl (8%) avec quelques gouttes de tween
80 pendant 45 minutes pour les apex et pendant 30 minutes pour les bourgeons axillaires.
Après trois rinçages successifs à l‟eau distillée stérile pendant 15 minutes, 10 minutes et 5
minutes, une dissection est réalisée sous la hotte à flux laminaire pour isoler des explants de
5mm environ (Figure 5). Chaque explant ainsi obtenu est placé dans un tube à essai contenant
un milieu MS30. (Voir la composition du milieu MS30 en annexe II).
Les tubes refermés et scellés sont entreposés dans la salle de culture sous une température de
25 ± 2°C et une photopériode de 12 heures. L‟éclairage sur chaque étagère dans la salle est
assuré par deux lampes fluorescentes de 40 watts chacune.
Les microplantes de 2 à 3 feuilles obtenues ont été utilisées pour les expériences de
tubérisation.
II.2.3. Induction à la tubérisation
Dans les expériences de tubérisation, le milieu MS30 de base a servi de milieu témoin.
Les milieux MS50 et MS80 sont testés pour mettre en évidence l‟effet du sucre. Ils
contiennent respectivement 50 g et 80 g de saccharose par rapport à MS30 qui n‟en contient
que 30g. (Annexe II).
Les milieux MS30 additionnés de phytohormones sont également testés pour mettre en
évidence l‟effet de ces hormones de croissance sur la tubérisation. Différentes concentrations
de phytohormones sont ainsi testées : BAP (2 mg.l-1 et 4 mg.l-1) ; AIA (0,01 mg.l-1 et 0,1
mg.l-1) ; AIB (0,5 mg.l-1; 1 mg.l-1 et 2 mg.l-1). Certaines combinaisons de phytohormones sont
aussi testées : (0,5 mg.l-1 AIB + 2 mg.l-1 BAP) ; (1 mg.l-1 AIB + 2 mg.l-1 BAP) ; (0,1 mg.l-1
AIA + 2 mg.l-1 BAP).
Les observations ont été faites après 4 semaines et après 8 semaines de culture.
17
a) Explants disséqués
b) Explants mis sur milieu MS
Figure 5: Microboutures de Colocasia esculenta
18
II.2.4. Variables mesurés
Deux types de variables ont été mesurés. Il s‟agit des variables intermédiaires1 se
rapportant à l‟appareil végétatif :
 le nombre de racines (NR),

 le nombre de feuilles (NF),
 le nombre de rejets (NJ),
 la hauteur des microplantes (HP).
Les variables fixes2 se rapportant à l‟appareil végétatif souterrain pris en compte sont :
 le pourcentage de tubérisation (PC)

 le poids moyen des microtubercules (PT),
 le diamètre moyen des microtubercules (DT),
 la longueur moyenne des microtubercules (LT),
 l‟indice de forme (IF) des microtubercules.
L‟IF qui permet de décrire la morphologie des microtubercules formés est le rapport du
diamètre sur la longueur (IF = DT/LT). En effet, le microtubercule est allongé si IF est
inférieur à 0,75, rond si IF est compris entre 0,75 et 0,99, ou aplati si IF est supérieur à 0,99
(Anonyme, 2010).
II.2.5. Analyse statistique des données.
Les analyses ont été effectuées avec les logiciels STATISTICAT 7.1 et XLSTAT 2010.
Les données relevées ont fait l‟objet d‟un test de normalité. Les distributions ne suivant pas
une loi normale ont été transformées. Des analyses de variance ont été effectuées pour mettre
en évidence l‟effet des concentrations de sucre et l‟effet des phytohormones sur les variables
mesurées. Le test de Newman et Keuls a permis de classer les moyennes observées par milieu
au risque α = 5% et 1%. Les données ont été ensuite soumises à un test de corrélation de
Pearson au risque de 5% et 1% afin de mettre en évidence les corrélations possibles entre les
différentes variables étudiées.
1
Variables mesurées au cours de la croissance et en fin d’expérience
2
Variables mesurées seulement en fin d’expérience
19
Résultats et discussion
III. RESULTATS
III.1. Taux d’infection et de reprise en fonction de la nature de l’explant.
Dans l‟ensemble, 338 explants ont donné des plantules saines sur un total de 772 mis
en culture au départ (Annexe III). Il en résulte un taux d‟infection et de non reprise d‟environ
56,2% (Figure 6).
Les explants issus de bourgeon terminal sont plus aptes à la reprise avec un taux d‟environ
80% alors que le pourcentage de reprise des bourgeons axillaires est estimé à 20%. De même
les bourgeons principaux ont une vitesse de reprise supérieure (une semaine) et un
développement plus rapide. En effet, les plantules issus de bourgeon terminal atteignent le
stade une feuille au bout de 2 semaines alors qu‟à partir des bourgeons axillaires, le même
stade n‟est atteint qu‟après 4 semaines (Figure 6).
La vitesse de croissance varie également en fonction de la variété. En effet, les explants issus
de la variété C1 ont un développement plus rapide que ceux issus de la variété C4.
III.2. Effet des concentrations de sucre.
III.2.1. Effet du Milieu MS 30
Le milieu MS30 est le milieu de référence dans lequel les microplantes se développent
dans des conditions proches de celles des cultures in vivo. Les paramètres observés dans ce
milieu vont donc servir de référence pour évaluer l‟incidence des autres milieux sur les
variables observées.
Après 4 semaines, 7 racines en moyenne sont relevées dans ce milieu où les microplantes sont
au stade 3 feuilles avec une hauteur moyenne de 3,1 cm.
Après 8 semaines, le nombre de racines passe à 9 et le nombre de feuilles à 4. La hauteur

moyenne augmente considérablement pour atteindre 7,8 cm.
Pour les variables se rapportant à la tubérisation comme le pourcentage de tubérisation, le

poids des tubercules, la longueur des tubercules etc., le milieu MS30 en ne favorisant pas la
formation de tubercules, n‟a pas permis les observations aussi bien après 4 semaines qu‟après
8 semaines (figure 7).
20
a b
c d
Figure 6 : Initiation des explants sur milieu MS : a) Explant âgé d‟une semaine ;
b) Explant infecté ; c et d) Microplantes âgées 5 semaine de culture.
Figure 7: Vitroplants de âgés de 8 semaines.
21
III.2.2. Effet du milieu MS 50
Après 4 semaines, les valeurs observées sont de 7 racines pour la variable NR, 3
feuilles pour la variable NF et 3 cm pour la variable HP. Ce milieu n‟a pas induit la formation
de tubercules au bout de 4 semaines.
Après 8 semaines, il y a augmentation significative des valeurs observées se rapportant à

l‟appareil végétatif. Ainsi, le nombre moyen de racines passe de 7 à 11, le nombre de feuilles
passe de 3 à 4 et la hauteur moyenne des microplantes varie de 3 cm à 7,4 cm (Figure 8). De
plus, il y a formation de microtubercules, ce qui permet de faire des observations sur les
paramètres se rapportant à la tubérisation. Ainsi 68,2% des microplantes ont tubérisé. Le
poids moyen des microtubercules est de 97,5 mg. La longueur moyenne et le diamètre moyen
de ces micrototubercules sont respectivement de 7,3 mm et 5,4 mm. L‟indice moyen de
forme (IF) calculé est égal à 0,97. Cette valeur met en évidence une forme ronde des
microtubercules (Figure 9).
III.2.3. Effet du milieu MS 80
Après quatre semaines de culture, 5 racines et 2 feuilles en moyenne sont relevées sur
chacune des microplantes dont la hauteur est de 1,8 cm (Tableau V). Aucun rejet n‟est
observé et il n‟y a pas formation de tubercule.
Par contre après 8 semaines, il a été relevé 93,1 % de tubérisation. Les microtubercules
formés ont un poids moyen de 128 mg avec une longueur moyenne et un diamètre moyen
respectivement de 8,6 mm et 5,6 mm. La valeur de l‟IF qui est de 0,71 révèle la formation de
tubercules allongés. Pour les variables NR, NF et HP, les valeurs observées après 8 semaines
augmentent pour atteindre respectivement 11 racines, 3 feuilles et 3,4 cm (Tableau VI).
III.2.4. Analyse comparée des milieux MS30, MS50 et MS80
Après 4 semaines de culture, les milieux MS30 et MS50 ont été plus favorables à la
rhizogénèse avec en moyenne 7 racines par plante alors que le milieu MS80 n‟en produit que
5 racines. Il en est de même pour les variables NF et HP. En effet, en moyenne, le nombre de
feuilles et la hauteur des plantes sont de 3 feuilles et de 3 cm dans les milieux MS30 et MS50
alors que ces valeurs chutent à 2 feuilles et à 1,8 cm dans le milieu MS80 (Tableau V).
Pour les trois milieux, il n‟y a pas eu formation de microtubercules après 4 semaines.
22
a b
Figure 8: Partie hypogée (a) et partie épigée (b) de microplantes.
Figure 9 : Microtubercules obtenus après 8 semaines de culture.
23
Tableau V: Effet du milieu de culture sur les variables intermédiaires (4 semaines).
Milieux NR NF HP
MS 30 7a 3a 3,1a
MS 50 7a 3a 3,0a
MS 80 5b 2b 1,8b
Moyenne 6,2 2,9 2,6
Fcalculé 6,6* 12,2* 9,2*

Pr>F 0,003 0,0001 0,0001
Dans une colonne, les moyennes suivies d‟une même lettre sont statistiquement identiques au seuil de 5%
(Newman-Keuls). * : effet significatif (5%). ** : effet hautement significatif (1%). ns : effet non significatif
Tableau VI : Effet du milieu de culture sur les variables intermédiaires (8 semaines)
Milieux NR NF HP
MS 30 9b 4 a
7,8 a
MS 50 11 a 4a 7,4 a
MS 80 11 a 3b 3,4 b
Moyenne 10,1 3,6 6,2
Fcalculé 9,82** 11,82** 44,02**
Pr 0,0001 0,0001 0,0001
(Newman-Keuls) * : effet significatif (5%). ** : effet hautement significatif (1%). ns : effet non significatif.
NR : Nombre de racines, NF : Nombre de feuilles, HP : Hauteur des microplantes
24
A 8 semaines, les différences observées sont non significatives entre le milieu MS50 et le
milieu MS80 pour la variable NR. Le nombre de racines produites augmente dans ces 2
milieux (11 racines) par rapport au milieu MS30 (9 racines). Pour les variables NF et HP, les
milieux MS30 et MS 50 sont similaires (4 feuilles et microplantes de 7,5 cm) par rapport au
milieu MS80 qui tend significativement à produire moins de feuilles et des plantes de hauteur
réduite (3 feuilles et des microplantes de 3,4 cm). Pour la variable PC, les trois milieux sont
significativement différents. Alors qu‟il n‟y a pas formation de microtubercules dans le
milieu MS30, le milieu MS 50 en produit 68,2% et le milieu MS80, 93,1% (Tableau VII).Les
microtubercules formés d‟après leur indice IF sont ronds dans le milieu MS50 et allongés
dans le milieu MS80.
III.3. Effet du génotype.
Cette analyse a été réalisée à partir de résultats observés, tous milieux confondus.
Après 4 semaines, seule la variable NR présente une différence significative entre la variété
C1 (8 racines) et les variétés C4 (6 racines) et C6 (5 racines) qui sont identiques à ce point de
vue (Voir tableau VIII et IX).
Après 8 semaines, la ressemblance entre C4 et C6 se retrouve aussi bien au niveau de la

variable NR (8 racines) qu‟au niveau des variables NF (3 feuilles) et HP (5,2 cm) alors que
C1 se distingue avec 13 racines, 4 feuilles et 7,2 cm de hauteur (Tableau VIII). Pour la
variable PC, C4 présente 50% de tubérisation, ce qui est significativement différent de C1
(55,1%) et de C6 (56,3%). Concernant l‟indice IF des tubercules formés, C1 avec une valeur
de 0,58 donne des tubercules allongés tandis que C6 avec un indice de 0,99 produit des
tubercules arrondis.
Le poids de ces tubercules est plus faible avec C4 (75,2 mg) qu‟avec C1 (155,8mg). Les
microtubercules sont plus longs avec C1 (9,9 mm) et plus courts avec C4 (6,1mm). Le
diamètre des tubercules formés ne varie pas en fonction de la variété (Tableau IX).
25
Tableau VII : Effet du milieu de culture sur les variables fixés (8 semaines)
Milieux PC PT LT DT IF
MS 30 0,0 c - - - -
MS 50 68,2 b 97,5 7,3 b 5,4 0,97 a
MS 80 93,1 a 128,0 8,6 a 5,7 0,71 b
Moyenne 53,8 116,1 8,1 5,6 0,84
Fcalculé 361,0* 3,1ns 5,1* 0,5ns 4,317*
Pr 0,0001 0,0836 0,0283 0,4686 0,0422
(Newman-Keuls) * : effet significatif (5%). ** : effet hautement significatif (1%). ns : effet non significatif
Tableau VIII : Effet du génotype sur les variables intermédiaires (8 semaines)

Génotypes NR NF HP
C1 13 a 4a 7,2 a
C4 9b 3b 5,2 b
C6 8b 3b 6,0 b
Moyenne 10,1 3,6 6,2
Fcalculé 50,16** 14,05** 7,01**
Pr 0,0000 0,0000 0,0013
(Newman-Keuls) * : effet significatif (5%). ** : effet hautement significatif (1%). ns : effet non significatif
PC : Pourcentage de Tubérisation, PT : Poids des microtubercules, LT : Longueur des microtubercules,

DT : Diamètre des microtubércules, IF : Indice de forme des microtubercules
26
Tableau IX : Effet du génotype sur les variables fixés (8 semaines)
Génotypes PC PT LT DT IF
C1 55,1 a 155,8 a 9,9 a 5,4 0,58 b
C4 50 b 75,2 b 6,1 c 5,2 0,88 ab
C6 56,3 a 108,5 ab 7,8 b 6,1 0,99 a
Moyenne 53,8 116,1 8,1 5,6 0,82
Fcalculé 500,046* 6,0** 12,2** 3,0 ns 4,7*
Pr 0,0001 0,0041 0,0001 0,0559 0,0128
* : effet significatif (5%). ** : effet hautement significatif (1%). ns : effet non significatif.
27
III.4. Corrélations entre les variables étudiées.
Le test de corrélation entre les différentes variables étudiées a permis de mettre en

évidence des liaisons significatives entre certaines variables. Le tableau X montre que
certaines liaisons sont positives et d‟autres négatives.
Les corrélations positives sont observées entre NR et NF (r = 0,64), entre NR et PT (r = 0,74),

entre NR et LT (r = 0,73), entre NF et HP (r = 0,68). La corrélation positive signifie que les
valeurs observées des 2 variables augmentent simultanément. Ainsi, le nombre de feuilles
augmente avec la hauteur des plantes.
Les corrélations négatives sont observées entre NF et PC (r = -0,49), entre NF et

DT (r = -0,65), entre LT et IF (r = -0,67) et entre HP et PC (r = -0,82). La corrélation négative
signifie que les 2 variables évoluent en sens inverse. Ainsi, la hauteur des plantes diminue
quand le pourcentage de tubérisation augmente, ce qui signifie que moins la plante est grande,
plus elle produit des microtubercules.
Tableau X : Corrélation entre les différentes variables étudiées

Variables NR NF HP PC PT LT DT
NR 1
NF 0,64* 1
HP 0,25 0,68* 1
PC 0,07 -0,49* -0,82* 1
PT 0,74* 0,07 -0,11 0,56* 1
LT 0,73* 0,19 -0,09 0,58* 0,96* 1
DT -0,34 -0,65* -0,13 0,35 0,31 0,26 1
IF -0,59* -0,30 0,42 -0,57* -0,53* -0,67* 0,30

*Ces valeurs sont différentes de 0 à un niveau de signification α=0,05
28
III.5. Effet des phytohormones sur la tubérisation in vitro
III.5.1. Action de la cytokinine (BAP)
Après 4 semaines, le tableau XI montre que les résultats observés ne diffèrent pas en
fonction de la concentration de BAP dans le milieu MS30 pour les variables NR et NF. En
effet, il n‟y a pas formation de racines aussi bien avec 2 mg.l-1 qu‟avec 4 mg.l-1 de BAP. Les
microplantes développent cependant chacune 2 feuilles. Par contre, par rapport au milieu
témoin il y a formation de 2 rejets et la hauteur des plantes diminue de 3,6 cm à 1,2 cm.
Après 8 semaines, la hauteur des plantes augmente mais cette augmentation est plus accentuée
avec BAP 2 mg.l-1 qu‟avec BAP 4 mg.l-1. Le nombre de rejets formés est triplé (Figure 10)
mais il n‟y a pas formation de tubercules.
Ainsi le BAP additionné au milieu de base favorise la formation de rejets mais il exerce un
effet inhibiteur sur la formation des racines et des feuilles.
III.5.2. Action des auxines (AIA et AIB)
Après 4 semaines, l‟AIB à 2 mg.l-1 a favorisé la production de 13 racines en moyenne

par microplante (Tableau XI). Les racines produites sont cependant moins longues par rapport
à celles produites dans le milieu de base (figure 11). Avec l‟AIA, les résultats obtenus pour
les variables NR, NF et HP ne sont pas différents de ceux obtenus dans le milieu de base.
Pour la variable NJ, chacune des deux auxines ne favorise pas la formation de rejets.
Après 8 semaines de culture, l‟AIB à 2 mg.l-1 double le nombre de racines obtenues mais elle
reste sans effet sur la formation de rejets comme l‟AIA. Ces 2 auxines ont cependant tendance
à réduire le nombre de feuilles produites (3 ou 4 feuilles) par rapport au milieu témoin
(Tableau XII). Les deux auxines induisent également la tubérisation. Le pourcentage de
tubérisation (PC) atteint 86% avec l‟AIB à 2 mg.l-1. Ainsi, les auxines augmentent la
production de racines, induisent la tubérisation (Tableau XIII) mais restent sans effet notoire
sur la production de rejets.
29
Tableau XI : Effet des phytohormones sur les variables intermédiaires (4 semaines).
Milieux NR NF NJ HP
MS 30 (témoin) 9b 4 0b 3,6ab
2 mg.l-1 BAP 0d 2 2a 1,4 c
4 mg.l-1 BAP 0d 2 2a 1,2c
0,01 mg.l-1 AIA 6c 4 0b 3,4ab
0,1 mg.l-1 AIA 5c 4 0b 3,5ab
0,5 mg.l-1AIB 7bc 3 0b 4,3a
1 mg.l-1AIB 9b 3 0b 3,7ab
2 mg.l-1AIB 13a 3 0b 4,7 a
2 mg.l-1 BAP + 0,5 mg.l-1 AIB 1d 2 2a 1,8bc
2 mg.l-1 BAP + 1 mg.l-1AIB 0d 3 2a 1,8bc
2 mg.l-1BAP + 0,1 mg.l-1 AIA 0d 3 2a 1,7bc
Moyenne 5,6 3,1 0,9 2,8
Fcalculé 70.07* 2.90* 6.92* 8.15*
Pr 0.0001 0.0040 0.0001 0.0001
NR : Nombre de racines, NF : Nombre de feuilles,. NJ : Nombre de rejet, HP : Hauteur des microplantes
Figure 10: Production de rejets dans le milieu MS30 + 2 mg.l-1 BAP
30
Tableau XII : Effet des phytohormones sur les variables intermédiaires (8 semaines).
NR NF NJ HP
MS 30 (témoin) 13bc 5a 0c 8,4b
2 mg.l-1 BAP 0f 3 bc 7a 2,7c
4 mg.l-1 BAP 0f 2c 6 ab 1,6c
0,01 mg.l-1 AIA 10cd 4 ab 0c 8,8ab
0,1 mg.l-1 AIA 13bc 3 bc 0c 8,8ab
0,5 mg.l-1AIB 9d 3 bc 0c 10,3ab
1 mg.l-1AIB 14 b 3 bc 1c 9,5ab
2 mg.l-1AIB 24 a 2c 0c 11,0a
2 mg.l-1 BAP + 0,5 mg.l-1AIB 4e 3 bc 4b 2,4c
2 mg.l-1 BAP + 1 mg.l-1AIB 5e 4 ab 1c 3,0c
2 mg.l-1 BAP + 0,1 mg.l-1AIA 0f 3 bc 8a 2,7c
Moyenne 8,5 3,2 2,4 6,3
FCalculé 96,56* 4,27* 28,22* 48,21*

Pr 0,0001 0,0001 0,0001 0,0001
NR : Nombre de racines, NF : Nombre de feuilles, NJ : Nombre de rejet, HP : Hauteur des microplantes
a b
Figure 11: Longueur de racines : a) MS30 + 2 mg.l-1 AIB ; b) Témoin
31
III.5.3. Action combinée des cytokinines et des auxines
Après 8 semaines, les combinaisons BAP-AIB ou BAP-AIA testées se sont avérées

sans effet sur la tubérisation (Tableau XIII). Par contre, leur effet est significatif sur les
variables NR, NF, NJ et HP. Par rapport au milieu témoin, ces combinaisons réduisent le
nombre de racines, le nombre de feuilles, la hauteur des plantes mais elles induisent la
formation de rejets (Figure 12 et 13).
Tableau XIII: Effet des phytohormones sur les variables fixées (après 8 semaines).
PC PT IF LT DT
MS 30 (témoin) 0e - - - -
2 mg.l-1 BAP 0e - - - -
4 mg.l-1 BAP 0e - - - -
0,01 mg.l-1 AIA 28,57d 46,9 0,9a 4,5b 3,9
0,1 mg.l-1 AIA 71,43b 70,2 0,6b 6,7 a 4,2
0,5 mg.l-1AIB 57,14c 50,6 0,6b 6,3a 3,6
1 mg.l-1AIB 71,43b 64,9 0,7ab 6,1a 4,6
2 mg.l-1AIB 85,71a 68,6 0,7ab 6,1a 4,4
2 mg.l-1 BAP + 0,5 mg.l-1AIB 0e - - - -
2 mg.l-1 BAP + 1 mg.l-1AIB 0e - - - -
2 mg.l-1 BAP + 0,1 mg.l-1AIA 0e - - - -
Moyenne 0,3259 62,9 0,7 6,1 4,2
FCalculé 3502,22* 2.27ns 3.69* 3.57* 1.57ns

Pr 0,0001 0.1038 0.0244 0.0273 0.2266
(Newman-Keuls) * : effet significatif (5%). ** : effet hautement significatif (1%). ns : effet non significatif.

32
Figure 12: Production de rejets dans

le milieu MS 30 + 2 mg.l-1 BAP +
0,5 mg.l-1 AIB
Figure 13: Prolifération de tissus sur milieu

MS30 + 2 mg.l-1 de BAP + 1 mg.l-1 d‟AIB
33
IV. DISCUSSION
Le milieu MS30 de base n‟a pas favorisé la tubérisation chez Colocasia. Cependant, il
a donné de meilleurs résultats en ce qui concerne les caractères morphologiques de la partie
épigée, c‟est-à-dire que dans ce milieu, le nombre de feuilles observé est élevé et la
microplante atteint sa hauteur maximale. Le milieu à 8% de sucre (MS80) est celui qui a
favorisé de façon sensible la formation de microtubercules avec un taux avoisinant 93,1%. Ce
résultat corrobore les travaux de Omokolo et al., (2003) qui ont conclu que le sucre est
déterminant dans la formation des microtubercules. En effet, ils ont obtenu 83% de
tubérisation dans le milieu MS à 8% de sucre. Nos observations concordent aussi avec les
résultats de Zhou et al., (1999) qui ont montré que l‟augmentation du taux de sucre de 5 à
10% favorise la microtubérisation chez Colocasia esculenta. Des résultats similaires ont par
ailleurs été obtenus par Garner & Blatter (1989) qui ont réussi à améliorer le pourcentage de
microtubérisation chez la patate douce en augmentant le taux de sucre de 4 à 8%. L‟ensemble
de ces travaux est conforté par ceux de Gopal et al., (1998) et Tsafack et al., (2004) qui ont
montré que la microtubérisation peut être induite in vitro sans utiliser de régulateurs de
croissance mais en augmentant la quantité de sucre dans le milieu de culture. L‟induction de
la microtubérisation dans ces conditions est importante car elle permet de tester l‟aptitude des
génotypes à la tubérisation en évitant ainsi les influences possibles que peut exercer l‟apport
des régulateurs de croissance.
Il a été constaté par contre que le sucre seul ne favorise pas la formation des rejets. Il
aurait tendance à inhiber les bourgeons qui pourraient donner des rejets.
La physiologie de la tubérisation consiste en l‟accumulation de substances de réserve

particulièrement l‟amidon. Le phénomène consiste en la juxtaposition de différenciations
biochimiques et anatomiques ou morphologiques (Patrick du Jardin, 1994). C‟est un
processus complexe qui fait intervenir l‟énergie lumineuse, les minéraux et la matière
organique qui vient en complément. Dans le cadre de la présente étude, seule la
différenciation morphologique a été prise en compte par la présence ou l‟absence de
microtubercules. Il aurait été judicieux de faire une analyse biochimique pour déterminer
pourquoi le milieu MS30 n‟a pas permis la tubérisation.
34
La variété C1 cumulant plusieurs qualités (taux de reprise élevé, moins de

contaminations, meilleure croissance et bon taux de microtubérisation) apparaît comme la
variété la plus performante des trois variétés étudiées. En outre, elle a une croissance rapide
par rapport à C4 et à C6. Elle serait une excellente source d‟exploitation pour la production
massive de microtubercules semences et l‟amélioration variétale chez Colocasia esculenta.
La formation de microtubercules n‟est pas corrélée positivement avec la croissance en

hauteur de la partie épigée ; cela a été montré dans le milieu MS30 où la croissance en hauteur
du vitroplant a été importante sans avoir d‟effet sur la microtubérisation. Fogaça et al., (2008)
ont obtenu des résultats similaires sur le manioc après 45 jours de culture.
Les résultats de cette étude tendent à montrer le rôle prépondérant des concentrations
élevées de sucre dans le milieu de culture sur l‟induction de la tubérisation. Mais les
régulateurs de croissance dans le milieu de base ont également une influence sur la formation
des microtubercules. En effet, l‟AIA et l‟AIB dans les milieux à 3% de sucre ont favorisé la
microtubérisation. L‟AIB à 2 mg.l-1 avec 85,71% de tubérisation s‟est avéré plus inducteur
que l‟AIA à 0,1 mg.l-1. Les auxines sont connues pour avoir une action rhizogène. Toutefois,
leur influence a été notée à d‟autres niveaux : sur le nombre de feuilles qui diminue, sur le
nombre de racines qui augmente, sur la taille de la plante qui augmente.
Le BAP, au contraire des auxines a induit la formation de rejets, mais n‟a eu aucune
influence sur la tubérisation de Colocasia. Par contre, chez Xanthosoma, les travaux
d‟Omokolo et al., (2003) et de Tsafack et al., (2004 et 2009) ont montré qu‟il était possible
d‟induire la tubérisation en présence de BAP dans un milieu à 8% de sucre. Zhou et al.,
(1999) ont montré que le pourcentage de microtubérisation est augmenté lorsqu‟on ajoute au
taux de sucre élevé une concentration de 22-44 µM de BAP. Chez les vitroplants de manioc,
Fogaça et al., (2008) ont montré également que le milieu MS50 + 0,4µM de BAP produit des
microtubercules à 45 jours. Cela s‟expliquerait par la présence d‟un taux de sucre élevé (5%
ou 8%) qui lèverait l‟action inhibitrice du BAP sur la rhizogénèse et favoriserait la
microtubérisation. Janet et al., (1993) ont montré que les cytokinines en général rendent
disponibles les hydrates de carbone (sucre) pour une absorption par les racines et favorisent
ainsi la microtubérisation.
35
Cette étude a été réalisée dans un milieu à 3% de sucre additionné de BAP à 2 et

4 mg.l-1. La faible concentration de sucre associée à une concentration de BAP qui semble
élevée pour Colocasia esculenta serait sans doute à l‟origine du résultat inverse obtenu.
Le BAP est réputé excellent pour la multiplication in vitro (Parthasarathy et al., 2002 ;
Omokolo et al., 2003) et donc la formation des rejets. Même dans les associations BAP-
Auxines, cette propriété est conservée. Ces associations ont tendance à stimuler la formation
de structures semblables à des cals.
L‟ensemble de tous ces résultats corrobore ceux de Jean et Coppadocia (1992) qui ont
affirmé que le phénomène de la tubérisation est favorisé par les auxines et inhibé par les
cytokinines.
36
Conclusion et perspectives
CONCLUSION
L‟induction de la tubérisation in vitro de trois variétés locales de Colocasia esculenta

a été d‟abord réalisée sur des milieux MS à différentes concentrations de sucre, puis sur des
milieux MS30 supplémentés de phytohormones. Sur chacun de ces milieux, l‟effet du sucre
et des phytohormones ont été mis en évidence à travers l‟évaluation de quelques caractères
intermédiaires (nombre de racines, nombres de feuilles, nombre de rejets et hauteur de la
plante), et de caractères relatifs aux microtubercules formés (le pourcentage de tubérisation, le
poids, la longueur, le diamètre et l‟indice de forme des microtubercules).
Cette évaluation a permis de montrer que les milieux à hautes teneurs en sucre (MS80
et MS50) induisent la microtubérisation à des pourcentages élevés 68% et 93%. Le milieu à
faible teneur en sucre comme MS30 est également inducteur s‟il est supplémenté d‟auxine.
L‟AIB à 2 mg par litre de milieu MS30 avec 85% de tubérisation s‟est avéré plus inducteur
que l‟AIA. Un milieu de culture à faible teneur en sucre et sans auxine, ne favorise pas la
formation précoce de microtubercules. Dans un tel milieu, la microtubérisation survient
tardivement au delà de 8 semaines. Les cytokinines au contraire des auxines influencent
positivement la formation de rejets. En effet, le BAP à 2 mg par litre dans le milieu MS30
produit en moyenne 7 rejets par microplante, ce qui n‟est pas observé dans les autres milieux.
La morphologie des microtubercules dans tous ces milieux est influencée

positivement par le nombre de racines et la croissance en hauteur des vitroplants.
Un effet génotype a également été mis en évidence dans cette étude. Après 8 semaines
de culture, toutes les variétés ont produit des microtubercules tout milieu confondu.
Cependant, les variétés C1 et C6 avec respectivement 55% et 56% de tubérisation paraissent
plus inductibles que la variété C4 (50%).
Les résultats de cette étude peuvent être utilisés pour la production massive in vitro de
microtubercules à partir desquels des plants qui serviront de semences saines après leur
sevrage vont être produits en serre. Les rejets formés peuvent également jouer le même rôle.
37
Conclusion et perspectives
PERSPECTIVES
La qualité nutritionnelle de ses tubercules et de ses feuilles, la récolte permanente sur

toute l‟année et la capacité de pousser sur toute l‟étendue du territoire national, font du taro
une plante nourricière d‟avenir qui mérite toute l‟attention des décideurs et des chercheurs.
Les travaux de recherche commencés en Côte d‟Ivoire doivent se poursuivre et s‟intensifier à
plusieurs niveaux : sur la production de semences in vitro et in vivo, sur la caractérisation des
variétés existantes, sur la recherche de variétés précoces et résistantes.
Concernant les processus de multiplication et de tubérisation in vitro, les paramètres

comme l‟association sucre – phytohormone, la thermopériode et la photopériode doivent être
pris en compte dans la recherche de tubercules et rejets semences.
Une étude comparative des semences produites in vitro et in vivo doit se faire pour
évaluer la vitesse de croissance, la précocité de tubérisation au champ, le rendement, la
résistance aux maladies et aux perturbations pluviométriques ainsi que les coups de
production des deux types de semences. Cette étude devra également prendre en compte la
recherche de variétés à faibles teneurs d‟oxalate qui constituent encore une contrainte à la
consommation des taros.
La mise en évidence de l‟effet génotype doit se poursuivre également par la prise en compte
d‟autres variétés de Colocasia et des variétés de Xanthosoma.
38
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42
Annexes
ANNEXES
Annexe I : Description des variétés locales de Colocasia cultivées en Côte d‟Ivoire selon
Gnangbé (1992)
La Variété C1 (Colocasia esculenta - variété esculenta)
Le Nom vernaculaire familier est dabôwôra (en Agni)
Pétiole vert olive dans la plus grande partie de sa longueur, violacé dans la région du limbe.
Le sinus du limbe présente une tache violacée persistante,
Tige stolonifère, tubercules latéraux filiformes, chair du tubercule principal (qui est la partie
consommée) blanche, avec un dense réseau de fibres violettes qui lui confèrent un aspect
violacé ; au cours de la cuisson à l‟eau le tubercule dégage une odeur caractéristique.
Floraison spontanée jamais observée en Côte d‟Ivoire.
Le Nom vernaculaire familier est abôla ou adjouroussô (en Agni)
Pétiole gris vert à gris marron dans la plus grande partie de sa longueur, rouge violacé dans la
région du limbe. Le sinus du limbe présente une tache rouge violacée persistante,
Tige non stolonifère, tubercules latéraux de forme ovoïde et assez nombreux. ; Chair des
tubercules blanche avec un dense réseau de fibres jaunes.
Floraison spontanée jamais observée en Côte d‟Ivoire.
Le tubercule principal et les tubercules latéraux sont consommés
La Variété C3 (Colocasia esculenta - variété antiquorum)
Le Nom vernaculaire familier est bôba pôpa (en Dida)
Pétiole vert jaunâtre dans la plus grande partie de sa longueur, rose dans la région du limbe.
Le sinus du limbe présente une tache blanche persistante,
Tige stolonifère,
43
Annexes
Tubercules latéraux peu nombreux et de formes variées (filiformes, ovoïdes ou en poire).
Chair des tubercules rose blanchâtre avec un dense réseau de fibres jaunes.
Floraison spontanée abondante en Côte d‟Ivoire.
Le tubercule principal et les tubercules latéraux sont consommés.
Le Nom vernaculaire familier est kpokô pôpa ou zoukoudjerè pôpa (en Bété)
Pétiole vert olive sur toute sa longueur à limbe vert ;
Le sinus présente une tache blanche persistante.
Tige non stolonifère
Tubercules latéraux très nombreux et de formes variées (ovoïdes ou en forme de poire)
Chair des tubercules blanche, avec un dense réseau de fibres jaunes.
Floraison spontanée très abondante en Côte d‟Ivoire
Le tubercule principal et les tubercules latéraux sont consommés en ragoût, ou en purée
Le temps de cuisson à l‟eau du tubercule dure plusieurs heures
Le Nom vernaculaire familier est kpokô ou zoukoudjerè pôpa (en Bété)
Cette variété ne diffère apparemment de la variété C4 que par le pétiole qui est rayé
longitudinalement de vert et de rouge violacé (à vert prédominant) ou de marron rouge et de
vert (à marron rouge prédominant).
Le Nom vernaculaire familier est kpôkô kpô ou zoukoudjerè kpô (en Bété)
Pétiole rouge violacé sombre sur toute sa longueur,
44
Annexes
Floraison spontanée observée en Côte d‟Ivoire mais elle plus tardive que celle des variétés C4
et C5 auxquelles cette variété s‟apparente pour tous les autres caractères.
Le Nom vernaculaire familier est djèrè pôpa (en Bété)
Pétiole vert sur toute sa longueur avec des rainures longitudinales dans la partie engainante,
cassant ; limbe vert sombre avec des excroissances foliaires vert sombre le long des nervures
secondaires côté abaxial.
Tubercules latéraux présentant la même variété de forme que les variétés C4, C5 et C6.
Chair des tubercules blanche avec un dense réseau de fibres jaunes.
Le tubercule principal et les tubercules latéraux sont consommés. Leur cuisson à l‟eau dure
plusieurs heures.
Floraison spontanée en Côte d‟Ivoire mais moins abondante que les variétés décrites
précédemment.
Le Nom vernaculaire familier est djèrè pôpa (en Bété)
Pétiole rayé longitudinalement de vert et rouge violacé (à vert prédominant) ou de marron

rouge et de vert (à marron rouge prédominant). La couleur du pétiole est le trait principal qui
permet de distinguer cette variété de la variété C7.
Le Nom vernaculaire familier est djèrè kpô (en Bété)
Pétiole rouge violacé sombre sur toute sa longueur.
Floraison spontanée observée en Côte d‟Ivoire mais plus tardivement que celle des variétés
C7 et C8 auxquelles cette variété s‟apparente pour tous les autres caractères.
Le Nom vernaculaire familier est kpôssi (en Yacouba)
45
Annexes
Pétiole vert sombre dans la plus grande partie de sa longueur, rouge violacé dans la région du
limbe. Le sinus du limbe présente une tâche rouge violacée qui s‟irradie le long des nervures
primaires et secondaires côté adaxial.
Tige stolonifère. Tubercules latéraux de forme ovoïde et peu nombreux
Temps de cuisson à l‟eau inférieur à 30 minutes
Floraison spontanée observée en Côte d‟Ivoire
Le Nom vernaculaire familier est kôhoukô (en Yacouba)
Pétiole vert olive sur sa longueur. Le sinus du limbe présente une tâche marron jaune
persistante. Tige non stolonifère. Tubercules latéraux peu nombreux et de formes variées.
Temps de cuisson à l‟eau inférieur à 30 minutes
46
Annexes
Annexe II : Composition du milieu minéral de Murashige et Skoog
Minéraux Quantité en mg.l-1
Nitrate de potassium KNO3 1900
Sulfate de magnésium MgSO4, 7H2O 370
Macroéléments Nitrate d‟ammonium NH4NO3 1650
Chlorure de calcium CaCl2, 2H2O 440
Phosphate de potassium KH2PO4 170
Acide borique H3BO3 6,2
Sulfate de manganèse MnSO4, 4H 2O 22,3
Sulfate de zinc ZnSO4, 7H 2O 8,6
Microéléments Iodure de potassium KI 0,83
NaMoO4, 2H2O 0,25
Sulfate de cuivre CuSO4, 5H2O 0,025
CoCl2, 6H2O 0,025
Na2-EDTA 37,3
Fer-EDTA
FeSO4, 7H 2O 27,8
Pyridoxine (= B6) 1
Aneurine (= thiamine-HCl = B1) 1
Vitamines de Morel et Acide nicotinique 0,5

Wetmore (1951)
Panthoténate de calcium 1
Myo Inositol 100

Biotine 1
Source de Carbone Sucre (Saccharose) 30g; 50g et 80g
47
Annexes
Annexe III : Tableau récapitulatif des taux d’infection et de reprise.
Explants ayant Explants Explants non Total

donnés des infectés infectés mais
vitroplants sains n‟ayant pas repris
C1 207 (54,3%) 90 (23,6%) 84 (22,1%) 381
C4 59 (37,6%) 55 (35%) 33 (27,4%) 157
C6 72 (30,8%) 115 (49,1%) 57 (20,1%) 234
Effectif 338 (43,8%) 260 (33,7%) 174 (22,5%) 772 (100%)
48
Résumé
Des vitroplants de Colocasia esculenta, obtenus par microbouturage sur milieu MS de

base, ont été repiqués sur différents milieux sélectifs contenant soit des concentrations élevées
de sucre, soit des phytohormones. Les effets du sucre, des auxines et des cytokinines ont été
mis en évidence à travers l‟étude de quelques caractères de l‟appareil végétatif (nombre de
racines, nombre de feuilles, nombre de rejets, hauteur des plantes) et quelques paramètres
relatifs aux microtubercules formés (pourcentage de tubérisation, poids, longueur, diamètre et
indice de forme des microtubercules). Il ressort de cette étude qu‟après 8 semaines de culture,
les milieux MS contenant 5% et 8% de sucre induisent la tubérisation de respectivement 68%
et 93% des vitroplants, mais réduisent le nombre de racines, le nombre de feuilles et ne
favorisent pas la formation de rejets. Les milieux additionnés d‟auxines (AIA et AIB)
favorisent également la formation de microtubercules. L‟AIB à 2 mg.l-1 produit 85% de
tubérisation. Par contre, le milieu MS de base et additionné de BAP à 2 mg.l-1 induit la
multiplication végétative en favorisant la formation de rejets. Les résultats de cette étude
peuvent être exploités pour la production massive in vitro de microtubercules semences et de
microrejets semences
Mots clés : Culture in vitro, Colocasia esculenta, microtubérisation, sucre, phytohormones
Abstract
In vitro plantlets of Colocasia esculenta, obtained by micropropagation on basic

medium, were planted on various selective media with high sucrose level and on basic MS
media supplemented with auxins and / or cytokinin. The effects of sucrose, auxins and
cytokinins were assessed through the study of some vegetative traits (root number, leaf
number, number of shoots, plant height) and some parameters related to microtubers
(percentage of tuberization, weight, length, diameter and shape index of microtubers). It
appears from this study, after 8 weeks of culture, that the MS media containing 5% and 8%
sucrose induce tuberization of respectively 68% and 93% of the plantlets, but reduce the
number of roots, the number of leaves and does not favor the formation of shoots. The media
supplemented with auxins (IAA and IBA) also promote the formation of microtubers. IBA
with 2 mg.l-1 gave the best result of tuberization (85%). For cons, the MS medium containing
3% sucrose and supplemented with BAP 2 mg.l-1 induces the vegetative propagation by
promoting the formation of shoots. The results of this study can be exploited for mass
production of in vitro microtuber-seeds and microshoot-seeds.
Keys words: in vitro culture, Colocasia esculenta, microtuberization, sucrose, phytohormons
49

Thème: Induction de La Tubérisation in Vitro Chez Le Taro (Colocasia Esculenta (L.) Schott (Aracees) ) Pour La Production de Semences

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RÉPUBLIQUE DE CÔTE D'IVOIRE MINISTERE DE L'ENSEIGNEMENT SUPERIEUR

UNION-DISCIPLINE-TRAVAIL ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

01 BP V 34 Abidjan 01 22 BP : 582 Abidjan 22

Année académique 2008-2009

DIPLÔME D’ETUDES APPROFONDIES DE GENETIQUE

OPTION AMELIORATION DES ESPECES VEGETALES

Thème : Induction de la tubérisation in vitro chez le

Par DROH Germain

Directeur scientifique : Directeur de stage :

Professeur N’GUETTA Assanvo S. P. Docteur LOLO Obou Marcel

Laboratoire de Génétique Laboratoire de Génétique

« Au Dieu Tout Puissant qui fait et permet tout, Eternel

« A la mémoire de mon défunt père et de mon défunt frère

Ce stage a été rendu possible grâce à la sollicitude, la disponibilité et la contribution de plusieurs

Le Professeur N‟GUETTA Assanvo Simon Pierre, responsable du 3ème cycle au Laboratoire de

I.1. Classification botanique ....................................................................................................... 3

I.2. Origine et distribution .......................................................................................................... 3

I.3. Niveau de ploïdie et diversité génétique .............................................................................. 5

I.4. Biologie de la plante ............................................................................................................ 5

I.4.1. Appareil végétatif ...................................................................................................... 5

I.4.2. Les fleurs ................................................................................................................... 7

I.4.3. Système de reproduction ........................................................................................... 7

I.4.3.1. la reproduction végétative ................................................................................... 7

I.4.3.2. Possibilité de reproduction sexuée ...................................................................... 7

I.5. Pratiques culturales .............................................................................................................. 8

I.5.1 Préparation des sols et plantation ............................................................................... 8

I.5.2. Densité de la culture .................................................................................................. 8

I.6. Importance de la plante ........................................................................................................ 9

I.6.1. Utilisations ................................................................................................................. 9

I.6.2. Production ................................................................................................................ 11

I.7. Contraintes de production .................................................................................................. 11

I.7.2. Maladies du taro ...................................................................................................... 11

I.7.3. Quelques insectes et ravageurs ................................................................................ 13

II.1. Matériel ............................................................................................................................. 15

II.2. Méthodes .......................................................................................................................... 15

II.2.1. La Culture in vitro .................................................................................................. 15

II.2.2. Préparation et mise en culture des explants............................................................ 17

II.2.3. Induction à la tubérisation ...................................................................................... 17

II.2.4. Variables mesurés .................................................................................................. 19

II.2.5. Analyse statistique des données. ............................................................................ 19

III.1. Taux d‟infection et de reprise en fonction de la nature de l‟explant. .............................. 20

III.2. Effet des concentrations de sucre. ................................................................................... 20

III.2.1. Effet du Milieu MS 30 .......................................................................................... 20

III.2.2. Effet du milieu MS 50........................................................................................... 22

III.2.3. Effet du milieu MS 80........................................................................................... 22

III.2.4. Analyse comparée des milieux MS30, MS50 et MS80 ........................................ 22

III.3. Effet du génotype. ........................................................................................................... 25

III.4. Corrélations entre les variables étudiées. ........................................................................ 28

III.5. Effet des phytohormones sur la tubérisation in vitro ...................................................... 29

III.5.1. Action de la cytokinine (BAP) .............................................................................. 29

III.5.2. Action des auxines (AIA et AIB) .......................................................................... 29

III.5.3. Action combinée des cytokinines et des auxines .................................................. 32

Figure 1 : Evolution géographique des Aracées cultivées Xanthosoma, Colocasia, Alocasia et

Figure 2 : Distribution géographique des Colocasia et Xanthosoma en Côte d‟Ivoire.............. 4

Figure 3 : Dessin de la structure de Colocasia esculenta. ...................................................... 6

Figure 4 : Quelques maladies et ravageurs de taro................................................................... 14

Figure 5: Microboutures de Colocasia esculenta ..................................................................... 18

Figure 6: Initiation des explants sur milieu MS ....................................................................... 21

Figure 7: Vitroplants âgés 8 semaines...................................................................................... 21

Figure 8: Partie hypogée (a) et partie épigée (b). ..................................................................... 23

Figure 9 : Microtubercules obtenus après 8 semaines de culture. ............................................ 23

Figure 10: Production de rejets dans le milieu MS 30 + 2 mg.l-1 BAP .................................... 30

Figure 11: Longueur des racines : (a) MS 30 + 2 mg.l-1 de AIB ;( b) Témoin........................ 31