Électrophysiologie des membranes

Le transport facile
C'est une diffusion accélérée de certains substrats de l'extérieur vers l'intérieur de la cellule par
intervention d'un transporteur.
Le phénomène est saturable car le nombre de substrat transporté dépend du nombre de
transporteurs.
Pas d’égalité stricte
À faible concentration le transport facile est plus rapide que la diffusion passive il peut être modifié
par des inhibiteurs par compétition ou bien par blocage

Hypothèse simple de l'analogie avec les réactions enzymatiques :

- Le transporteur ne reste pas fixé au substrat
- le substrat ne ressort pas du milieu intérieur
- la quantité totale de transporteur est constante

si Jv/Jvmax = 0,5 alors dc = Km = 1/affinité

Dc = C intracellulaire – C extracellulaire

Potentiel de membrane

Observation sur une cellule au repos

Différence de potentiel nulle entre 2 électrodes du même côté, non nul entre 2 électrodes de part et
d'autre de la membrane.
Le potentiel de repos est négatif (-70 millivolts)
le potentiel de la face intracellulaire est inférieur au potentiel de la face extracellulaire
car extracellulaire -> +
intracellulaire -> -

répartition ionique
ions majoritaires en Extracellulaire :
 Na+
 Cl-
Ions majoritaires en Intracellulaire :
 K+

Ions Cl- Na+ K+

Flux diffusif Entrant Entrant Sortant
Vers intracellulaire Vers intracellulaire Vers extracellulaire
Flux électrique Sortant Entrant Entrant
Vers extracellulaire Vers intracellulaire Vers intracellulaire
Flux électro diffusif nul Entrant Sortant
Vers intracellulaire Flux diffusif > flux électrique
Flux actif Aucun Pompe Na/K Pompe Na/K
Faisant entrer le Na+ Faisant sortir le K+
L’équilibre entre le Na+ et le K+ ne se fait pas par diffusion simple mais par la pompe Na/K
Elle peut être bloquée par le cyanure ou inhibée par l’ouabaïne
Pour chaque ATP de dégradé, 3 sorties de Na+ et 2 entrées de K+
Le flux diffusif est induit par le gradient de concentration
Le flux électrique est induit par la différence de potentiel
Flux diffusif -> les ions vont vers le milieu où ils sont minoritaires
Electrique -> les ions vont à l’opposé de leurs charge

Perméabilité au repos

Cl > K > Na > Ca

Totale forte faible faible
K = 50xNa+
I = I cl + I na + I k = 0
Le potentiel de repos est = au potentiel du Cl car il est quasiment total

Modèle électrique de la membrane cellulaire au repos

Le générateur a une force électromotrice qui correspond au potentiel de membrane en valeur
absolue. Au repos le potentiel de membrane est négatif l'orientation du générateur est faite de façon
à rendre négatif la face interne et positive la face externe
Les piles et condensateur sont montés en parallèles

La dépolarisation
C'est une modification de la polarité membranaire induite par l'action d'une stimulation initiale de
nature variable électrique chimique mécanique thermique ou lumineuse.
Elle peut être suffisante pour permettre le blocage temporaire de la pompe Na/K.
Le blocage de cette pompe est à l'origine de la modification de polarité membranaire.

Le stimulus infraliminaire est un stimulus d'intensité inférieure au seuil de déclenchement d'un

potentiel d'action la membrane reste au repos.

Un stimulus supraliminaire est un stimulus d'intensité supérieure au seuil de déclenchement d'un

potentiel de l'action, il peut correspondre à une somme de stimuli infraliminaires
Cela induit donc le déclenchement d'un potentiel de l'action

Lors d’une dépolarisation le potentiel de membrane devient moins négatif, plus positif
Lors d’une hyperpolarisation, le potentiel de membrane est plus négatif

L’effet d’une stimulation électrique

Stimulus hyperpolarisation Dépolarisation sous liminaire

Extracellulaire Effet anode Effet cathode
Charge membrane plus + Charge membrane moins +
intracellulaire Effet cathode Effet anode
Charge membrane plus - Charge membrane moins -
Potentiel de membrane Plus négatif Moins négatif
Flux électrique K+ et Na+ Augmente Diminue
entrant
Flux électrique Cl sortant Augmente Diminue
Courant I transmembranaire Entre Sortant
Électroneutralité intracellulaire - +
Électroneutralité
extracellulaire + -
Dépolarisation sous liminaire : intensité du stimulus inférieure au seuil de déclanchement d’un
potentiel d’action

Stimulus sous liminaire : potentiel local

 Non propagé
 Non transitoire = permanant
 Non immédiat

Potentiel d’action :
 Propagé
 Transitoire
 Non immédiat
 Brutal
 Irréversible
 Amplitude importante
 Ouverture des canaux

Stimulus supraliminaire :
 Ouverture des canaux voltages dépendant
o Sodium puis potassium
Plus l'intensité du stimulus est forte plus le nombre de canaux ouverts sera important

Potentiel d’action

Période réfractaire absolue : cellule totalement inexploitable dure environ une milliseconde
fréquence inférieure à 1000 hertz

Période réfractaire relative : cellule excitable pour une intensité supérieure du stimulus amplitude
plus faible propagation plus lente

Période supra normale : cellule hyper excitable amplitude plus importante du potentiel d'action
propagation plus rapide

Rhéobase : intensité minimale d'un stimulus permettant le déclenchement d'un potentiel d'action
chronaxie : durée minimale d'un échelon de courant d'intensité égale à 2 fois la rhéobase pour
déclencher un potentiel d'action
En cas d'augmentation de l'intensité du stimulus le temps entre l'application du stimulus et le
déclenchement du potentiel de l'action diminue la fréquence des potentiels de l'action augmente.
La loi intensité durée dépend du type de cellules

Lors d'un potentiel d'action la perméabilité du K+ et assez forte

Celle du Na+ est forte uniquement lors de la dépolarisation sinon elle est très faible

Les canaux Na+ voltages dépendants déterminent le seuil d’excitabilité et la vitesse de génération
du potentiel d’action.
Pour les fibres myélinisées, la vitesse de propagation sera plus élevée

Un potentiel d’action n’ouvre pas les canaux voltages dépendants Na/K

Arrivée du potentiel d’action -> ouverture des canaux calciques -> entrée massive de na+ ->
exocytose des vésicules -> libération des NT dans la fente synaptique -> fixation à leurs récepteurs ->
activation des récepteurs -> création du potentiel post-synaptique
En environ 1ms
Récepteur canaux Na+ et Ca+ -> excitateurs dépolarisation, cholinergique
Récepteurs K+ ou Cl- -> inhibiteur hyperpolarisation, GABA

Enregistrement intracellulaire :
Microélectrode de verre en intracellulaire de 0,1 micron qui permet de perforer la membrane sans la
rompre pour mesurer la différence de potentiel en courant imposé :
 le potentiel de repos est négatif
 le potentiel d'action et positif
 le potentiel postsynaptique excitateur où inhibiteur

Cela mesure l'influence du potentiel sur les courants ioniques traversant la membrane et permet
l'étude des canaux voltage dépendant.
Cela nécessité un circuit de stabilisation pour maintenir le potentiel de membrane à une valeur stable
imposée même lors du changement de perméabilité
Puis mesure du courant réinjectée qui traversent la membrane

Méthode de patch clamp :

Enregistrement en potentiel imposé
Pression négative au sein de l’électrode qui « patch » le morceau de membrane