TD1

L’inverse d’une résistance = conductance

Les cellules vivantes sont entourées d’une bicouche lipidique
= isolant électrique
→ différence de potentiel
Q
C=
E

attraction mutuelle des charges à travers l’isolant

propriété de condensateur : particularité qui est la capacité (en
Farad)
la capacité de 1 Farad (F) sera chargée à 1 volt quand 1
coulomb de charge sur un conducteur et -1 coulomb sur
l’autre

La capacité membranaire

- bicouche lipidique pure = 0,8 µF/cm²

- membrane biologique = 1 µF/cm²
les cellules ont beaucoup de repliements par ex on peut pas connaître la
surface des tubules transverses mais on peut mesurer la capacité électrique
et donc la traduire en µm² de surface de membrane

La membrane
sont insérés des canaux ioniques en elle
un canal ionique est assimilable à une résistance
une membrane cellulaire est comparable à un circuit RC en parallèle, il
possède des propriétés de filtre → si on injecte un créneau de courant dans le
circuit, la différence de potentiel aux bornes du circuit va donner une phase de
montée exponentielle → phase stationnaire → phase de
décroissance
au fur et à mesure que le condensateur charge on a la montée de
la charge
ce signal a bcp d’intérêt car on peut le reproduire
expérimentalement
la variation de potentiel V = I.R
la phase de décroissance d
une constante de temps est caractéristique d’un signal
exponentiel
une constante de temps = 1 type de phénomène qui se
produit

Les ions sont distribués de façon asymétrique de part et d’autre

de la mb
à l’ext : beaucoup de Na+, Ca2+, Cl-
à l’int : beaucoup de K+
sachant qu’une cellule est toujours chargée électriquement, comme on a affaire à des ions ils vont
avoir tendance à entrer ou sortir
ces particules seront aussi sensibles aux champ électrique
le potentiel d’équilibre de l’ion : valeur de potentiel pour laquelle le flux d’ions est nul
quand canaux ouverts, les ions se déplacent en fonction :
→ du gradient de [ ]
→ du gradient électrique

Pour calculer le potentiel d’équilibre on utilise l’équation de Nernst :

R .T [ion] e
Eion = . ln
zF [ion]i
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Exercice :
-[Ca2+]i = 10 -7 M
[Ca2+]e = 2 mM
E Ca = 8,31 x (37+273) / +2 x 96 500 x ln (2x10-3/ 10 -7)
= + 132 mV

- [Cl-]i = 20 mM
[Cl-]e= 130 mM
E Cl- = 8,31 x (37+273) / -1 x 96 500 x ln (130 x10-3/ 20x10-3)
= - 50 mV

- [Na+]i = 10 mM
[Na+]e = 140 mM
E Na+ = 8,31 x (37+273) / +1 x 96 500 x ln (140 x10-3/ 10x10-3)
= + 140 mV

- [K+]i = 130 mM
[K+]e = 5 mM
EK+ = 8,31 x (37+273) / +1 x 96 500 x ln (5 x10-3/ 130 x 10-3)
= - 87 mV
________________________________________________________________________________

La force électromotrice (Em – Eion)

Le déplacement des ions est conditionné par la force électromotrice (driving force) : Em – Eion
Em = Vm = Vi – Ve
mesure une différence de potentiel entre extérieur et intérieur de
la cellule
quand Em = Eion le flux net d’ions est nul

si Em > Eion alors le Na+ aura tendance à sortir

donc quand on a une sortie de cations = courant sortant, le courant
est > 0

si Em < Eion alors le Na+ aura tendance à entrer

donc quand on a une entrée de cations = courant entrant, le courant est < 0
 Comment mesurer les flux d’ions ?

Le patch clamp, différentes configurations :

- cell-attached : amène la pipette de patch près de la cellule et on a un petit bout de membrane

bloqué dans la pipette
à partir de cette configuration on peut
→ soit aspirer par la pipette = accès électrique aux canaux de la cellule = whole cell
→ soit remonter la pipette = rupture du morceau de membrane
si reste ouvert on a l’intérieur de la cellule au contact du bain = inside-out excised patch
si ça se referme on a l’extérieur de la cellule au contact du bain = outside-out excised patch

La microélectrode ou la pipette de patch

tube de verre étiré à la flamme

remplit la pipette d’un milieu physiologique
électriquement conducteur
pour relier la pipette au système de mesure on insère un fil
d’argent enrobé de chlorure d’argent
le verre = isolant électrique donc comportement comme un
condensateur

Les étireuses
2 types d’étireuses
la pipette de patch clamp vue au ME →

Le patch clamp (vidéo)

technique de mesure enzymatique
on a le résultat en direct de la mesure de l’activité d’1 enzyme
le signal de courant traduit comment fonctionne la protéine
 Transposition de la loi d’Ohm à un courant ionique
E = R.I
donc I = G.E car G = 1/R

Pour un courant ionique ça devient

Iion = Gion x ( Em – Eion )

Circuit électrique équivalent d’1 canal ionique

ici utilise gamma γ pour indiquer que 1 seul canal ionique

(sinon G)

Circuit électrique équivalent d’une membrane avec plusieurs canaux ioniques

Potentiel de membrane (PM)

Em potentiel de membrane stable

donc à l’état stationnaire INa + IK = 0
avec INa = GNa . (Em – Eion )
et IK = GK .
 Cas d’une cellule perméable à 2 ions

Em = GNa . ENa + GK . EK / GNa + GK

facile de mesurer les rapports de conductance donc on prend α = GNa/ GK
on obtient Em = (α. ENa + EK ) / α+ 1

au repos la maj des canaux ouverts sont les canaux K+

donc GK >>> GNa → α tend vers 0
donc Em = (0. ENa + EK ) / 0+ 1
→ Em tend vers EK

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Exercice : Quel est le potentiel de membrane ?

Données :
- [K+]i = 120 mM
- [K+]e = 4 mM
- [Na+]i = 10 mM
- [Na+]e= 140 mM
- T = 310 K
- GK = 10 x GNA

d’abord :
E Na+ = 8,31 x (310) / 1 x 96 500 x ln (10x10-3 / 140x10-3 )
= 0,02669534 x ln (10x10-3 / 140x10-3 )
= - 0,07 donc -70 mV !! 70 mV

E K+ = 8,31 x (310) / 1 x 96 500 x ln (120 x 10-3 / 4x10-3 )

= 0,09 donc 90 mV !! -90 mV

et : α = GNa/ GK = 1/10
Em = (1/10 x -70 + 90) / (1/10 – 1)
= - 83 / 0,1-1
= 92,2 ??
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On peut aller plus loin dans le raisonnement :
il y a 2 potentiels d’équilibre extrêmes
pendant un PA on a ouverture de canaux Na+ donc la conductance relative du Na+ ↑ augmente
relativement à celle du K+
il y a un curseur qu’on déplace entre les potentiels d’équilibre

Equation de Goldman-Hodgkin-Katz (GHK)

Les canaux sodiques VD

Pour avoir un canal fonctionnel il faut 7 su alpha

porteuses du pore
 même structure protéique que pour les canaux
calciques VD
4 domaines, 6 segments transmb
segment S4 riche en AA chargés + = ‘voltage sensor’
il est repoussé électromagnétiquement quand la mb est dépolarisée ce qui ouvre le canal
l’inter-segment S5-S6 = pore du canal
l’inter-domaine 3-4 = porte d’inactivation du canal Na+
boules bleues= AA constituant le filtre de sélectivité

Les différents états d’un canal

déclenche un courant sodique vers le bas donc entrant = négatif -

il augmente vite (activation du courant) et diminue plus lentement
(inactivation du courant)
→ quand le PM <<0 : pas de courant car canal fermé
la porte d’inactivation est ouverte, elle pendouille
→ quand on dépolarise, la porte d’activation s’ouvre et les ions
peuvent passer à travers le canal
le courant augmente↑ à mesure que la porte s’ouvre↑
donc la cinétique d’activation traduit la cinétique d’ouverture
quand la porte d’inactivation se ferme le courant diminue ↓
3 états : 2 non-perméants (fermé & inactivé) et 1 perméant (ouvert)
la différence entre état fermé & inactivé :
- inactivé : la porte d’inactivation ferme le canal
- fermé : la porte d’activation ferme le canal

Équation de Hodgkin-Huxley
INa = GNa . (Em-ENa)

ACTIVATION

= traduit la proportion de canaux ouverts (Po) e/f du voltage membranaire (G= gamma.N.Po)

allure de sigmoïde croissante

traduit la position de la porte
d’activation à l’état stationnaire (impose
un voltage à la membrane et regarde la
position de la porte jusqu’à ce qu’elle ne
bouge plus)
la courbe ne montre pas la cinétique (à quelle vitesse elle le fait)
la cste de temps d’activation est de l’ordre de la ms
notion importante :
→ seuil d’activation = valeur de voltage à partir de laquelle le canal va s’ouvrir

INACTIVATION (ou DISPONIBILITÉ)

= montre la position finale de la porte d’inactivation à l’état stationnaire (infini∞)

elle traduit aussi la proportion de

canaux activables e/f du voltage
(disponibilité)
cinétique 10 à 20x + lente que celle
d’ouverture

Implication de la disponibilité

- si le PM est tel que la disponibilité est de 1, quand on va dépolariser tous les canaux sont à l’état
fermé et donc tous pourront s’ouvrir => courant sodique MAX
- si le PM est à une valeur telle qu’on a que 50 % de canaux disponibles
=> courant de 50 % du MAX
- si le PM est à une valeur telle que la disponibilité est de 0 alors
=> courant sodique (tous les canaux sont inactivés)

ex : Quand on euthanasie qqun en injectant du K+ que se passe-t-il ?

quand on change une [ionique] le + important est la modification du potentiel d’équilibre de l’ion
ici on change la [K+]extracellulaire qui de base est de 5mM
le potentiel d’équilibre de K+ = - 80mV
ainsi quand on augmente le [K+]extracellulaire ↑ le potentiel d’équilibre va devenir + positif
donc le PM va se dépolariser ↑ ↑ ↑ fortement → ne pourra pas avoir de PA car pas de canal sodique
→ les muscles, le ♥ etc sont alors inexcitables → c’est mortel
+ utilisé pour les pontages cardiaques en soumettant le ♥ à une solution cardioplegique qui le rend inexcitable, il
suffit de réintroduire une solution avec une [K+]normale pour qu’il se remette à battre
 RÉACTIVATION

= capacité du canal inactivé à revenir à un état fermé

transition de l’état inactivé à l’état fermé
Ddddddd,,,,,,,,,,,,,,,,d
La réactivation est à l‘origine des périodes
réfractaires :

→ la PR absolue : intervalle de temps séparant

2 créneaux de potentiel identiques avec la 2ème
stimulation qui ne peut pas déclencher de PA

→ la PR relative : intervalle de temps séparant

2 créneaux de courant identiques avec la 2ème
stimulation qui déclenche un PA de + petite
amplitude ↓
progressivement augmentation de l’amplitude
du 2ème PA
reflète la période

On caractérise un courant ionique à partir de :

➢ sa pharmacologie
ex : TTX (Tétranotoxine) pour NaV
l’isoforme NaV 1.9 a une IC50 > 500µM → elle n’est pas bloquée par la TTX
l’isoforme NaV 1.8 a plutôt un IC50 d’environ 200mM
l’isoforme NaV 1.5 a plutôt un IC50 d’environ 2µM
=> appelés TTX-R (Résistants) c’est-à-dire dont la TTX ≥ 1µM
(canal dont l’IC50 est au moins du µM)
 les autres isoformes (NaV 1.1 → 1.4, 6 et 7)
=> appelés TTX-S (Sensibles) c’est-à-dire dont la TTX < 1µM

ex :on trouve de la TTX dans le fugu (tétraodon), poisson mangé par les japonais
lors de la préparation du poisson il doit rester de la TTX

➢ ses caractéristiques électrophysiologiques

- relation courant-voltage
- activation
- inactivation
- réactivation
- cinétique
etc..

Comment construire une relation courant-voltage (I-V) ?

Incrémente le créneau de dépolarisation

→ ex : rajoute +10mV à chaque fois qu’on dépolarise
provoque l’apparition d’un courant sodique à partir
d’une certaine valeur de voltage
mesure l’amplitude MAX du courant, qu’on reporte
sur la courbe I-V
certaines caractéristiques :
*seuil d’activation (valeur de potentiel à partir
de laquelle le canal va s’ouvrir)
*courant MAX : voltage où l’activation atteint
son MAX
*potentiel d’inversion (proche du potentiel
d’équilibre) caractéristique de l’ion transporté
quand le courant s’inverse, le courant est
forcément entrant avant le potentiel
d’inversion et forcément sortant au-delà du
potentiel d’inversion

Rôle du courant sodique dans le PA :

dépolarisation rapide = cycle d’Hodgkin
quand on stimule le neurone on le dépolarise et si la
dépolarisation est suffisante on déclenche l’apparition d’un
courant sodique (entrant donc dépolarisant) → accentue la
dépolarisation↑ → encore + de courant sodique↑ donc + de
dépolarisation↑ etc..
 ➢ voltage à partir duquel GNa > GK → courant
entrant

➢ voltage à partir duquel GK > GNa → courant sortant

électrotonus = réponse de la mb quand elle n’atteint pas

le seuil de déclenchement du PA

Les canaux potassiques (K+)

beaucoup + variés que les sodiques

Tandem pore domain : canaux à 2 domaines pore

Kv
besoin d’une tetramérisation

2 piliers = 2 segments transmembranaires

besoin d’une tetramérisation
la déplétion de l’ATP l’active
Le 1er mécanisme de régulation de la glycémie fait
intervenir IKATP
dépolarisation → entrée de Ca → migration des vasicules
contenant de l’insuline → recaptage du glucose par le
foie, le TA et les muscles → diminution de la glycémie↓
→ diminution ATP↓ → activation du canal
ex : KATP = cible majeure dans les traitements du diabète

SKCa → S= small → petite conductance ↓

BKCa → B= Big → grande conductance↑

11 segments transmembranaires dont 4 intracellulaires
1er segment appelé S0
seul canal dont le Nter est extracellulaire
tetramérisation du canal

TASK responsable du potentiel de repos de certaines cellules

neuronales
Pour avoir un canal fonctionnel, on doit avoir un dimère (particularité)

Même structure que les sodiques

Il y a des canaux qui s’activent pour des

valeurs HYPERpolarisées, d’autres pour des
valeurs dépolarisées

il y a des canaux
* haut seuil ↑
- sensibles aux DHP : CaV1
courant ICaL = Long lasting
- insensibles aux DHP : CaV2
(caractéristiques des neurones)

* bas seuil↓ : CaV3

courant ICaT