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ELECTROPHYSIOLOGIE

CELLULAIRE
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DR EL HADJI A L BATHILY
SERVICE DE BIOPHYSIQUE ET DE
MÉDECINE NUCLÉAIRE/FMPO/UCAD
INTRODUCTION
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 La quasi-totalité des cellules vivantes présentent


une différence de potentiel (ddp) entre les 2 faces
intra et extracellulaire de leur membrane

 La membrane cellulaire est alors polarisée


INTRODUCTION
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 potentiel de membrane (Vm), valeur de la ddp


entre les deux faces de la membrane (Vr et Va).
Vm=Vint-Vext

 Electrophysiologie cellulaire: étude des propriétés


liées à cette ddp et des modifications éventuelles
en réponse à un stimulus (excitabilité des cellules)
I- POTENTIEL DE REPOS (PR)
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 Le PR est par définition la valeur du potentiel de mb


d’une cellule à l’état stationnaire (pas de passage de
courant à travers la mb) .

 Vr=Vint-Vext ˂ 0 , la face int de la mb est négative


par rapport à la face ext.
I- POTENTIEL DE REPOS (PR)
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Cel nerveuse: Vr=- 90mV Fibre nerveuse: Vr= [-75;-


60mV]
Fibre musculaire: Vr = [-100;-80mV]

 Le PR est une conséquence de l’inégalité de


répartition des ions entre les 2 faces de la mb

[Na+]int ˂ [Na+]ext [Cl-]int ˂ [Cl-]ext

[K+]int ˃ [K+]ext
I- POTENTIEL DE REPOS (PR)
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 Théories de plus en plus élaborées ont permis une


connaissance de plus en plus exacte des mécanismes
expliquant l’existence et le maintien à une valeur stable:
- du potentiel de repos et
- des [ ] ioniques intra et extracellulaires

 Ordre historique:
- Théorie de Boyle et Conway (1941)
- Théorie de Hodgkin et Huxley (1952)
THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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Si on compare le sens du gradient transmembranaire de [ ] et


celui du potentiel électrique (figure), on constate:

 K+ tend à sortir par diffusion (puisqu’il est plus concentré à


l’int qu’à l’ext) et à rentrer par migration électrique
(puisque l’int est négatif)

 Na+ tend à entrer dans la cellule par diffusion et par


migration électrique

 Cl- entre dans la cellule par diffusion et en sort par


migration électrique
Flux diffusifs et électriques
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THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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Apport de la théorie:

 La stationnarité des [ ] ioniques prouve que pour


chaque ion, le flux net à travers la mb est nul

 Boyle et Conway ont posé les hypothèses les plus


simples pour expliquer ce bilan nul pour chaque
espèce d’ion:
THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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 Le flux net de Na+ est nul parce que la mb lui est supposée
strictement imperméable:
-Equilibre de Donnan pour le quel Na+ joue le rôle de l’ion
protéique
-Potentiel de mb (potentiel de Donnan) de signe positif du
coté ou le Na+ est en plus forte concentration, cad au milieu
extracellulaire (Vint-Vext ˂ 0)

 Les flux nets de Cl- et K+ sont nuls parce que le flux électrique
annule le flux diffusif les potentiels d’équilibre du Cl-
et K+ sont normalement égaux au potentiel de mb
THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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 La relation de Nerst –Donnan devrait être vérifiée


pour les ions diffusibles Cl- et K+

Vr = Vint – Vext = - RT ln (Ci)


ZF Ce

 A l’évidence elle n’est pas vérifiée pour le Na+, en effet


la relation de Nerst appliquée au Na+ donnerai un
résultat de signe opposé au résultat observé: pour le
sodium le flux électrique n’est pas opposé au flux
diffusif, mais au contraire ils se renforcent
Potentiels d’équilibre ionique pour la cellule
nerveuse
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THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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Limites de la théorie de Boyle et Conway
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 L’avènement des microélectrodes pouvant pénétrer la


cellule sans lésion appréciable a permis d’améliorer la
précision des mesures de la valeur du PR.

On a alors vérifié que :


 Pour Cl-, la valeur de son potentiel d’équilibre calculée par
la formule de Nerst était bien égale à la valeur mesurée
(électrodes)

 Pour K+, on a constaté que son potentiel d’équilibre n’est


pas exactement égal à la valeur du PR mesuré: il lui est en
réalité supérieur en valeur absolue flux diffusif
sortant ˃ flux électrique entrant : relation non parfaitement
vérifiée
THEORIE DE BOYLE ET CONWAY
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THEORIE DE HODGKIN ET HUXLEY
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 Hypothèse la plus simple pour expliquer l’existence du potentiel de


membrane est alors de supposer que celui-ci est le potentiel de
diffusion ionique

 Perméabilité membranaire aux différents ions n’est pas identique

 Perméabilité de la membrane cellulaire au sodium est plus faible qu’au


potassium et au chlore

 Potentiel de repos :potentiel de membrane qui permet d’annuler le


courant à travers la membrane cellulaire (respect de l’électroneutralité)
THEORIE DE HODGKIN ET HUXLEY
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 Potassium sort plus rapidement de la cellule que ne rentre


le sodium

 Apparition d’une différence de potentiel transmembranaire

 Cette différence de potentielle est responsable d’un flux


électrique entrant de sodium et de potassium ,

 Les flux actifs de sodium et de potassium engendré


par la pompe Na-K annulent les flux passifs
électro-diffusifs correspondants
THEORIE DE HODGKIN ET HUXLEY
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 La stabilité du PR nécessite une stabilité des gradients de


concentrations

 Pour expliquer cela Hodgkin et Huxley ont posé l’hypothèse


d’un flux sortant actif de Na+ (JaNa) et d’un flux entrant actif
de K+ (JaK) annulant les flux électro-diffusifs correspondant
flux net total de Na+ et flux net total de K+ sont ainsi
nuls.

 Ce transport actif (pompe Na-K) a été suggérée par


Hodgkin et Huxley bien avant que les découvertes de la
biologie moléculaire n’aient confirmé son existence
THEORIE DE HODGKIN ET HUXLEY
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Représentation schématique de la pompe Na-K
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Transports passifs et actifs à travers la mb
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POTENTIEL D’ACTION (PA)
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B-Description

 Si l’on applique entre 2 électrodes externes un courant suffisamment


intense pour que la dépolarisation produite sous la cathode soit
supérieure au seuil

 On observe au cours du temps les modifications suivantes du


potentiel de membrane Vm
PA d’une fibre nerveuse non myélinisée
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POTENTIEL D’ACTION (PA)
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 un pré-potentiel (AB): réponse locale de la membrane à un stimulus


dépolarisant

 une pointe (Spike) (BCD): comprend une phase de dépolarisation très


brève(BC) inversion du potentiel de membrane( l’intérieur de la
cellule devenant positif) par rapport à l’extérieur et une phase de
repolarisation rapide (CD)

 une phase de repolarisation (DE) lente (post potentiel -) comprenant


généralement une période d’hyperpolarisation

 une phase de récupération (EF) (post potentiel +): potentiel de


membrane proche de la valeur de repos
POTENTIEL D’ACTION (PA)
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 Caractéristiques du potentiel d’action

 Brutal : brusque dépolarisation de la membrane annoncée par


réponse locale (pré-potentiel)

 Rapide :durée de l’ordre du milliseconde

 Irréversible : loi du tout ou rien

 Grande amplitude (constante pour une fibre nerveuse)

 Réponse propagée (type de fibre, diamètre …)

 Transitoire : potentiel de membrane Vm revenant progressivement


à sa valeur de repos
POTENTIEL D’ACTION (PA)
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 Différentes phases coïncident avec des périodes d’excitabilité


différentes de la cellule

 Seuil d’excitabilité : courant dépolarisant permet de définir:

 Période réfractaire absolue: période pendant laquelle la cellule est


inexcitable

 Période réfractaire relative : période pendant laquelle la cellule est


excitable mais avec une intensité supérieure à celle du seuil normal
d’excitabilité (Is ˃ Io )

 Période supranormale d’interprétation délicate , controversée où la


cellule est hyperexcitable (Is ˂ Io )
Phénomènes ioniques du PA
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Phénomènes ioniques du PA
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Phénomènes ioniques du PA
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Phénomènes ioniques du PA
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LOIS INTENSITE-DUREE
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 Lorsqu’on applique à la mb un échelon rectangulaire


de courant sortant, la dépolarisation n’est pas
instantanée; le seuil de dépolarisation est atteint au
bout d’un certain temps qui est d’autant plus court que
l’intensité de stimulation est importante

 Pendant cette durée préliminaire, on observe le pré-


potentiel qui est donc une réponse locale .
LOIS INTENSITE-DUREE
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 Pour déclencher une excitation ou stimulus, il faudra que


l’intensité du courant soit supérieur à un seuil liminaire
Is
 Si on augmente progressivement le temps d’établissement
du courant, Is augmente régulièrement: on dit que la fibre
nerveuse s’accommode du courant électrique.

 L’intensité minimum Io déclenchant un stimulus s’appelle


Rhéobase
 La rhéobase est atteinte pour une durée finie que Lapicque
nomma «temps utile »: durée au-delà de la quelle il n’est
point besoin de prolonger la durée d’un stimulus de courant
dont l’intensité est égale à la rhéobase
LOIS INTENSITE-DUREE
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 La chronaxie correspond au temps de passage


nécessaire pour avoir Is = 2 Io
Fibre striée, chronaxie = 0,3 ms
Fibre lisse , chronaxie = 10 ms

NB: la durée au terme de la quelle on atteint


le seuil de dépolarisation diminue quand
l’intensité du stimulus augmente
LOIS INTENSITE-DUREE
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