Les genres Pseudomonas et apparentés

Objectifs : * Exploiter les caractères de différenciation des genres pour orienter

l’identification.
* Identifier l’espèce bactérienne grâce à la galerie biochimique.

1er jour

Manipulation : Par personne, vous disposez d’une souche pure présentée sur GNi :

Souche numérotée
présentée sur gélose nutritive
inclinée

Réaliser une
suspension

Isoler sur milieu

sélectif de
Pseudomonas
aeruginosa :

Gélose Cétrimide

Ensemencements des
milieux de la galerie
Etude Ensemencements
d’identification de
microscopique : des milieux de la
l’espèce :
Réaliser une coloration de galerie
Gram d’identification de
ainsi qu’un état frais Genre : King A

VF King B

Recherche de l’ Hugh et Leifson GNi à 4°C

enzyme respiratoire : glucosés
Réaliser le test d’orientation GNi à 42°C
rapide en fonction du Gram Eau peptonée
ordinaire Citrate de Simmons

Gélose Nutritive Milieu avec film

Proposer une orientation Ordinaire photographique
possible
Bouillon nitraté Tube ADH

Retour sommaire Incuber boîtes et tubes 24 h à température convenable

 Compte-rendu :
Coloration de Gram Test respiratoire :

Orientation
Observations Conclusion Observations Conclusion

Souche n°

2ème jour

Manipulation :

Lecture des différents milieux ensemencés : boîtes et tubes.

Réaliser le tests complémentaires nécessaires à la mise en évidence de :
la nitrate réductase
la mise en évidence de la pyocyanine
la mise en évidence de la pyoverdine

1. Ensemencements

Milieux Observations Interprétations Conclusion

VF
Bouillon nitraté
Hugh et Leifson glucosé
GNO
King A
King B
Milieu avec film photographique
GNi à 4°C
GNi à 42°C
Citrate de Simmons
Milieu ADH

2. Isolements

Observations : aspect des colonies Conclusion

Gélose Cétrimide

3. Conclusion

Proposer une identification de la bactérie numérotée à l’aide des tableaux

biochimiques fournis :

Justification de l’appartenance au genre.

Justification de l’appartenance à l’espèce bactérienne

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