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OH OH OH H
N N
HN N N N
N
N H N N
H2 N N H N H
N CH3
N N N
N
O N O N O N
C º G ou G º C A = T(U) ou T(U) = A
1.5. Nucléotide
Nucléotide = ester (alcool + acide) phosphorique de nucléoside
On distingue les désoxyribonucléotides constitutifs de l’A.D.N. et les ribonucléotides
constitutifs de l’A.R.N.
A.D.N. : Acide DésoxyriboNucléique
A.R.N. : Acide RiboNucléique
Nucléosome :
Octamère d’histones
octamère d’histones entouré de 2 tours d’ADN
Figure 4 : histones et nucléosome
Cours biochimie BTS_ABM1 2017-2018 1.5.1- Acides nucléiques – Page 6 / 12 –
b. Deuxième niveau
Empilement des nucléosomes en un solénoïde dont le diamètre est de l’ordre de 30 nm.
Cette structure est stabilisée par le cinquième type d’histone, l’histone H1.
La compaction atteint un facteur 40.
PROCARYOTES EUCARYOTES
RIBOSOMES 70 S RIBOSOMES 80 S
Grande sous-unité Petite sous-unité Grande sous-unité Petite sous-unité
50 S 30 S 60 S 40 S
ARNr 28 S
ARNr 23 S
ARNr 16 S ARNr 5,8 S ARNr 18 S
ARNr 5 S
ARNr 5 S
+ 31 protéines + 21 protéines + 45 protéines + 32 protéines
Figure 8 : structure des ribosomes procaryotes et eucaryotes ; diversité des ARN ribosomiques
Alcaline
Obtention de nucléosides
NaOH
monophosphate 2’ et 3’
Acide
4.2. Viscosité
La viscosité est due à la longueur importante et la rigidité relative de la double hélice.
Plus la température augmente, plus la viscosité diminue (dénaturation thermique).
L’ARN est moins visqueux que l’ADN car il est monocaténaire.
Conséquence : le nucléoplasme est plus visqueux que le cytosol.
4.3. Absorption à 260 nm
Les acides nucléiques (ADN et ARN) présentent un
maximum d’absorption à 260 nm.
Les nucléotides libres absorbent plus qu’un
polynucléotide d’ADN.
Les polynucléotides monocaténaires (ARN et ADN sb)
absorbent plus que les polynucléotides bicaténaires (ADN
double brin).
4.4. Dénaturation d’un ADN bicaténaire
Plus la température augmente, plus l’absorbance à
260 nm augmente : effet hyperchrome ou hyperchromicité
quand les brins sont séparés par dénaturation thermique.
La courbe 𝐴'() +, = 𝑓(𝑇°𝐶) est qualifiée de courbe de
fusion. L’ADN natif (db) passe à l’état dénaturé (sb) sous
l’effet de la dénaturation thermique.
La température de fusion ou Tm (temperature of melting)
correspond à la température pour laquelle la moitié de l’ADN
est sous forme dénaturée.
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Spectre d’absorption de l’ADN Courbe de fusion de l’ADN
http://sites.univ-provence.fr/wabim/d_agora/d_biochimie/nucleiques.pdf http://monde.ccdmd.qc.ca/ressource/?demande=desc&id=55559
La température de fusion peut être estimée par le calcul pour des oligonucléotides de moins
de 20 nucléotides :
𝑇, = 𝐴 + 𝑇 × 2 + 𝐺 + 𝐶 × 4
Ex1 : 1ATTTCCGCCAAACT14
𝑇, = 4 + 4 × 2 + 1 + 5 × 4 = 16 + 24 = 40°C
Ex2 : 1ACCTCCGCCAGACT14
𝑇, = 3 + 2 × 2 + 7 + 2 × 4 = 10 + 36 = 46°C
Ex3 : 1ATTTCCGCCAAACTATACGC20
𝑇, = 6 + 5 × 2 + 7 + 2 × 4 = 22 + 36 = 58°C
Elle dépend du %GC, du pH et de la force ionique.
Plus le %GC augmente, plus la température de fusion augmente.
Plus la force ionique augmente (concentration en NaCl supérieure à 1 M), plus la température
de fusion diminue.
4.5. Renaturation d’un ADN bicaténaire
L’ADN dénaturé sous forme de simple brin peut être renaturé par refroidissement :
• si le refroidissement est rapide : les 2 brins restent séparés sous forme de simple brin,
• si le refroidissement est lentement : les 2 brins se réapparient par complémentarité des
bases et la double hélice est reconstituée.
La renaturation thermique est à la base du principe de l’hybridation moléculaire (sondes,
PCR,…)