HÔPITAL STE JOSEPHINE

BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Code : PDCR-HSJB-01
Mission Tové PROCEDURE DE DOSAGE DE LA Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 Numéro de pages :
CREATININE Date d’application :

Création du document : 02 Mars 2022

Nom Fonction Date et Signature

Auteur(s) Surveillant du
FOLLY Yao Anani
laboratoire
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Personne
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Table des matières

1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3
2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3
3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3
4- Principe......................................................................................................................................3
5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3
6- Échantillon :...............................................................................................................................3
7- Équipements et fournitures.........................................................................................................3
8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4
9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4
10- Mode opératoire......................................................................................................................4
11- Valeurs de référence...............................................................................................................5
12- Interférences...........................................................................................................................5
13- Valeurs critiques.....................................................................................................................5
14- Formulaires connexes.............................................................................................................5
15- Références..............................................................................................................................6
16- Pièces jointes..........................................................................................................................6
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1- Objectifs et portée
Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage de la créatinine dans le plasma,
le sérum et dans l’urine. Elle permet de mesurer l’activité des reins et de diagnostiquer une
éventuelle altération de la fonction rénale.

2- Abréviations et définitions
CIQ : Contrôle Interne de Qualité
SL : Surveillant du laboratoire
RQ : Responsable Qualité

3- Tâches, autorisations et responsabilités

Tâche Autorisé Responsable

Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, SL SL
Mesure à blanc RQ, SL SL
Préparation des réactifs RQ, SL SL
Préparation des sérums de contrôle RQ, SL SL
Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, SL SL
Passage des échantillons RQ, SL SL
Validation analytique RQ, SL SL

4- Principe
Réaction colorimétrique (réaction de Jaffé, sans étape de pré-traitement su spécimen) de la
créatinine avec l’acide picrique en milieu alcalin dont la cinétique de développement est
mesurée à 490 nm (490-510). Cette méthode a été optimisée (spécificité,rapidité,adaptabilité)
par le développement d’une méthode cinétique à 2 points.
5- Sécurité et environnement
- Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes)
- Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux.
- Respect la procédure de tri et de gestion des déchets
Par mesure de sécurité, tous échantillon doit être traité comme potentiellement infectieux
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6- Échantillon :

Matériel Quantité Stabilité

minimale
Sérum, Plasma (hépariné) 100 µl 24 heures 2 et 8° C ; – 20 °C plusieurs mois
Urine diluée (1/20) 100 µl 24 heures 2 et 8° C ; – 20 °C plusieurs mois

7- Équipements et fournitures
Consommable
Embouts de pipette, 10-100 µl
Embouts de pipette, 100-1000 µl
Tube à hémolyse
Matériel et équipement :
Spectrophotomètre
Micropipette 10-100 µl
Micropipette 100-1000 µl
8- Réactifs et produits chimiques
Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage
Flacon R1 Réactif alcalin 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R2 Acide picrique 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R3 (Etalon primaire) 20 mg/l 2à8°C Réfrigérateur
Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur
Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur

- Préparation de la solution de travail : Mélanger les réactifs des flacons R1 et R2

volume à volume. La solution de travail est stable 30 jours à 2-8 °C.
9- Contrôle de la qualité
Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control
pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle
qualité
10- Mode opératoire
o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié
leur conformité.
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o Centrifugation et décantation : Centrifuger à 4000 tours pendant 10 minutes puis

décanter le sérum.
o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail
o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si
nécessaire
o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve
avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc.
Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée.
o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le tableau
ci-dessous

Blanc Etalon Dosage

Solution de travail 1ml 1ml 1ml
Eau déminéralisée 100 µl
Etalon 100 µl
Spécimen 100 µl
Bien mélanger. Après 30 secondes, enregistrer l’absorbance A1à 490 nm (490-510 nm) contre le blanc réactif et l’eau
distillée. Exactement 2 minutes après la première lecture, lire l’absorbance A2

Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique
avant d’analyser chaque série d’échantillon.
o Calcul
|dosage|( A 2−A 1 ) ×Concentration étalon
Résultat :
|Etalon|( A 2−A 1)
o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes
phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ.
o Intervalle de mesure : 2,18-150 mg/l (127 mmol/l), diluer au 1/5 avec du sérum
physiologique si la valeur est supérieur à 150 mg/l.
o Facteur de conversion 
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mg/lx 8, 85 = µmol/l
11- Valeurs de référence 
Femme : 06 -12 mg/l
Homme : 07-14 mg/l

12- Interférences
Interférents Créatinine Résultats
Glucose 249 µmol/l (12 g/l) Pas d’interférence jusqu’à 12 g/l

Protéines 115 µmol/l (40 g/l) Interférence au-delà de 40 g/l

Acide Ascorbique Pas d’interférence jusqu’à 250 mg/l
Bilirubine Interférence négative à partir de 278 mg/l
Hémoglobine Pas d’interférence jusqu’à 250 µmol/l
Lipémie Pas d »interférence de la turbidité jusqu’à 0.320 abs (600 nm)

13- Valeurs critiques 

Créatinine > 340 mg/l
14- Formulaires connexes
- Fiche de paillasse :
- Fiches de gestion des CIQ :
15- Références
- Normes ISO 15189
- Fiche technique du réactif du dosage de la créatinine (Méthode cinétique) BIOLABO Ref :
80107.
16- Pièces jointes
Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation