Chapitre 13

Stabilité du génome
humain
- Les différentes causes des mutations
- Être capable d’expliquer les conséquences d’une mutation

Pr. Rajaa CHAHBOUNE

Mécanismes de stabilité de l’ADN
 Mutations

• N’importe quel changement dans l’ADN s’appelle une

mutation.

• Une mutation est transmise aux générations suivantes.

• Il y’a plusieurs sortes de mutation, par exemple:

• Substitution: remplacement d’un nucléotide par un autre.
• Délétion: suppression d’un ou de plusieurs nucléotides.
• Insertion: addition d’un ou de plusieurs nucléotides.

• Certaines mutations sont pathologiques et causent ainsi des

maladies génétiques

• Exemple: l’anémie falciforme (drépanocytose)

 Exemple de maladie génétique
Ø Anémie falciforme = maladie génétique caractérisée par une
hémoglobine anormale.
Ø L’anémie falciforme est provoquée par le changement d’une seule
base de la chaîne ß de l'hémoglobine:

Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Lys-Ser-Ala-Val-Thr-Ala-Leu-Try-Gly-Lys-Val-
Asp-Val-Asp-Glu-Val-Gly-Gly-Glu-Ala-Leu-Gly-Arg-Leu-Leu-Val-Val-Tyr-
Pro-Try-Thr-Glu-Arg-Phé-Phé-Glu-Ser-Phé-Gly-Asp-Leu-Ser-Thr-Pro-Asp-
Ala-Val-Met-Gly-Asp-Pro-Lys-Val-Lys-Ala-His-Gly-Lys-Lys-Val-Leu-Gly-
Ala-Phé-Ser-Asp-Gly-Leu-Ala-His-Leu-Asp-Asp-Leu-Lys-Gly-Thr-Phé-Ala-
Thr-Leu-Ser-Glu-Leu-His-Cys-Asp-Lys-Leu-His-Val-Asp-Pro-Glu-Asp-Phé-
Arg-Leu-Leu-Gly-Asp-Val-Leu-Val-Cys-Val-Leu-Ala-His-His-Phé-Gly-Lys-
Glu-Phé-Thr-Pro-Pro-Val-Glu-Ala-Ala-Tyr-Glu-Lys-Val-Val-Ala-Gly-Val-
Ala-Asp-Ala-Leu-Ala-His-Lys-Tyr-His

Ø 6e acide aminé = VAL alors qu'il devrait être GLU

Ø L’hémoglobine mutée a une charge différente de celle de
l’hémoglobine normale, ce qui cause un dysfonctionnement de la
protéine.
 Exemple de maladie génétique

• Les globules rouges, qui contiennent l'hémoglobine mutée, ne sont

plus ronds mais aplatis et en forme de faucille. Ces globules rouges
empêchent la circulation sanguine de se faire normalement en
obstruant les petits vaisseaux.
 Mutations
Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Désamination
• Dépurination
• Oxydation de base

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV), Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
 Mutations
Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Désamination
• Dépurination
• Oxydation de base

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV), Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
Fonction d’édition

d
 Erreurs au cours de la réplication de l’ADN
• Les enzymes impliquées dans la réplication de l’ADN
insèrent occasionnellement une base incorrecte dans le
nouveau filament (mésappariement, erreur d’appariement).

• Ce type d’erreur est rare, environ d’une base sur 10 000.

• Les ADN polymérases ont à la fois une activité polymérase

5’→3’ pour ajouter des nucléotides au nouveau brin de l’ADN,
et une activité exonucléase 3’→5’ pour hydrolyser le dernier
nucléotide incorporé de façon erronée c’est la fonction
d’édition.

• Cette fonction d’édition contrôlent et corrigent les liaisons

entre les paires pendant leur formation, ramenant le taux
d’erreur à environ une base pour 10 millions.
 Mésappariement
(bases mal appariées ou erreur d’appariement)
 Mésappariement non réparé

Un mésappariement qui n’est pas réparé, il aboutit à une

substitution
 Mutations
Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Dépurination
• Désamination
• Oxydation de base

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV), Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
 Altération spontanée de l’ADN:
Hydrolyse de la liaison N-osidique
(Dépurination, apurination)

• Le dommage le plus commun subi par une molécule d'ADN est

la dépurina*on.
• Dans chaque cellule humaine, environ 5000 à 10 000
dépurinaAons se produisent tous les jours.
 Dépurination non réparée

Un nucléotide apurinique qui n’est pas réparé aboutit à une

délétion
 Mutations
• Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Dépurination
• Désamination
• Oxydation de base

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV), Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
 Altération spontanée de l’ADN:
Hydrolyse et perte de la fonction amine
(désamination)

• La désamination est un événement moins fréquent; environ 100

fois par jour dans chaque cellule humaine.
• La collision de molécules d'eau avec la liaison reliant le
groupement amine à la base déclenche une désamination
spontanée.
Désamination de la Cytosine en
Uracile

Uracil peut
s’apparier avec
l’adenine
 Mutation ponctuelle

Si la désamination de la cytosine en Uracile n’est pas

réparée, elle aboutit à une substitution

TTAT
AATA

TCAT
AGTA

TCAT
AGTA
Désamination de la cytosine-5 méthyle en thymine

La désamination de la Cytosine crée un déséquilibre G-U

Facile de dire que U est erronée

La désamination de la Cytosine crée un déséquilibre G-T

Pas facile de dire quelle base est erronée

Environ 50% du temps, le G est «corrigé» en A résultant une mutation

 Désamination de l’adénine en hypoxanthine

Hypoxanthine peut s’apparier

avec la Cytosine
GCTC
CGAG
GCTC GCTC
CGAG CGHG GCCC GCCC
CGHG CGGG

Hypoxanthine Cytosine
Désamination de la guanine en xanthine

Xanthine peut s’apparier avec la Thymine au lieu de la

Cytosine
 Mutations
Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Désamination
• Apurination
• L’oxydation de bases

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV), Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
 Les dommages oxydatives des bases
• L’ADN peut être aGeint de lésions dues à des sous-produits de
processus cellulaires normaux.

• Parmi les oxydants électrophiles générés par la respiraAon:

– Radicaux superoxydes (O2-)
– Radicaux hydroxyles (OH•)
– Peroxyde d’hydrogène (H2O2)

• Ces radicaux peuvent directement affecter le matériel généAque

en altérant les bases, ce qui génère des mutaAons ponctuelles.

• Il est admis que des lésions générées par oxydaAon de l’ADN sont
impliquées dans le vieillissement, la mutagenèse, la
carcinogenèse, et les maladies neuro-dégénéraAves.
 L’oxydation de la guanine

• Les bases guanines sont les sites privilégiés d’oxydation

de l’ADN.

• Elles sont également modifiées par les radicaux

hydroxyles

Reactive oxygen species

O2-, H2O2, OH•
 Mutations
Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Désamination
• Apurination
• L’oxydation de bases

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV),
Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
Altération de l’ADN par des agents mutagènes
Lumière UV

UV light

Les dimères de thymine bloquent la réplication et

provoquent des mutations
 Altération de l’ADN par des agents mutagènes
Radiations ionisantes
• Les rayon X, les rayons gamma et les rayons cosmiques ont des
longueurs d’ondes plus faibles mais plus énergétiques que les UV.

• Ils peuvent pénétrer profondément dans les tissus et causer dans leur
passage une ionisation des molécules qui sont alors transformés en
radicaux libres et en ions réactifs.

Spectre visible (longueurs d’ondes)

Longueurs d’ondes décroissantes

Energie croissantes

Spectre électromagnétique
 Altération de l’ADN par des agents mutagènes
Radiations ionisantes

• Les radiations ionisantes ont pour principal effet l’oxydation de l’ADN.

• Les radicaux libres et les ions réactifs sont hautement énergétique et

peuvent déclencher des réactions chimiques variées avec l’ADN.

– Rompre les liaisons phosphodiester produisant des coupures

simple ou double brin et ainsi des anomalies chromosomiques.
– Altérant des bases, ce qui génère des mutations ponctuelles.

Reactive oxygen species

O2-, H2O2, OH•
 Mutations
Les mutations peuvent être causées par:

– Erreurs au cours de la réplication de l’ADN

– Altération spontanée de l’ADN à cause des collisions avec

des molécules de la cellule:
• Désamination
• Apurination

– Altération de l’ADN par des agents mutagènes:

• Radiations nocives (Lumière ultraviolette (UV), Rayon X)
• Substances chimiques toxiques
 Agents chimiques de l’environnement
Les analogues de bases

• Ce sont des analogues structuraux des bases qui peuvent se

substituer aux bases puriques ou pyrimidiques pendant la biosynthèse
de l’ADN, ils altèrent les affinités d’appariements.

• Ex: le 5-bromo-uracile (5-BU), un dérivé de l’Uracile, se comporte

comme un analogue de la Thymine.

Thymine 5-bromo-uracile 5-bromo-uracile

(forme cétone) (forme énol)
 Agents chimiques de l’environnement
Les analogues de bases
• La forme cétone du 5-BU est la plus commune, se comporte comme
un analogue de la Thymine et s’apparie avec l’Adenine.

• La conversion du 5-BU vers la forme énol (très rare) entraine

l’appariement avec la Guanine.

• Si cet appariement n’est pas réparé, il entraine une transition de A=T

vers G=C.

5-bromo-uracile Adenine 5-bromo-uracile Guanine

(forme cétone) (forme énol)
 Agents chimiques de l’environnement
Les analogues de bases

• La 2-aminopurine (2-AP) , se comporte comme un analogue de

l’Adenine et s’apparie avec la Thymine.

• La 2-AP peut aussi s’apparier avec la Cytosine.

• Si cet appariement n’est pas réparé, il entraine la transition de A=T

vers G=C.
 Agents chimiques de l’environnement
Les agents alkylants

• Ils réagissent avec les bases en ajoutant des groupements alkyl

(alkylations), comme le CH3 ou CH3CH2.

• Comme pour les analogues de bases, ces alkylations altèrent les

affinités d’appariements et peuvent entrainer des mutations:

– Gaz motarde (Di(2-chloroethyl) sulfide)

– DMN (Diméthylnitrosamine)
– EES (Ethyléthane sulfonate)
– EMS (Ethylméthane sulfonate)
– MMS (Méthylméthane sulfonate)

Gaz motarde
EES
 Agents chimiques de l’environnement
Les agents alkylants

• L’EMS (Ethylméthane sulfonate) alkyle les groupes cétone en position

6 de la Guanine et en position 4 de la Thymine.

• La 6-éthyle guanine, se comporte comme un analogue de l’Adenine et

s’apparie avec la Thymine.

• Si cet appariement n’est pas réparé, il entraine une transition de G=C

vers A=T.
 Agents chimiques de l’environnement
Les agents alkylants

• Le MMS (Méthylméthane sulfonate) méthyle l'ADN essentiellement en

position N3 de l’adenine et en position N7 de la guanine.

• La N3-méthyladénine est une lésion létale qui inhibe la synthèse de

l'ADN.
 Agents chimiques de l’environnement
Les agents intercalants
• Ils ont des tailles similaires aux paires de bases et s’insèrent
entre les purines et les pyrimidine de l’ADN, modifiant la
configuration spatiale de l'ADN.

• Ils peuvent gêner l'action de la polymérase et provoquer la

délétion ou l’addition d'une paire de bases ou de quelques
paires de bases.
 Altération de l’ADN par des agents mutagènes
Agents chimiques de l’environnement
• Le Benzopyrène est une molécule cancérigène présente dans le tabac.
• Il est capable de se lier avec une Guanine en l’empêchant à former une
liaison hydrogène avec la Cytosine formant ainsi une distorsion ou
déformation au niveau de l’hélice.

In the Liver
Principaux types de lésions de l’ADN