Compétence 5 

CYTOLOGIE

C5.1 : Réalisation de l’hémogramme

O5.1.2 : interprétation d’un hémogramme
Hémogramme sans anomalie
Paramètre Valeur Valeur Usuelle Interprétation

GR (10^6/uL) 4.37 [4.2-5.7] Normal

HB (g/dL) 13.6 Normal

[13-18]

Hte 39.9 Normal

[40-52]

VGM 91.3 [80-100] Normal

TCMH 31 [27-31] Normal

CCMH 34.1 [32-36] Normal

IDR% 12.3 [11-15] Normal

Plaquettes( 10^3 207 [150-400] Normal

/uL)
GB (10^3/uL) 8.85 Normal
[4000-10000]

PNN ( 10^3/uL) 5.48 Normal

[2000-7500]

PNE ( 10^3/uL) 0.15 [100-500] Normal

PNB ( 10^3/uL) 0.04 [0-150] Normal

Lymphocyte 2.55 [1500-4000] Normal

( 10^3/uL)
Monocyte 0.63  [200-1000] Normal
( 10^3/uL)
Retic - -

Hémogramme avec anomalies

Paramètre Valeur Valeur Usuelle Interprétation

GR (10^6/uL) 3.42 [4.2-5.7]

HB (g/dL) 10
[13-18] anémie

Hte 31.1
[40-52]

VGM 90 [80-100] Normochrome

TCMH 29 [27-31]
Normocytaire
CCMH 32.5 [32-36]

IDR% 18.8 [11-15] Anisocytose

Plaquettes( 10^3 78.0 [150-400] thrombopenie

/uL)
GB (10^3/uL) 1.1 leucopenie
[4000-10000]

PNN ( 10^3/uL) 0.72 neutropenie

[2000-7500]

PNE ( 10^3/uL) 0.09 [100-500] Normal

PNB ( 10^3/uL) 0.01 [0-150] Normal

Lymphocyte 0.28 [1500-4000] lymphopenie

( 10^3/uL)
Monocyte 0.01  [200-1000] monocytopenie
( 10^3/uL)
Retic - -

C5.2 : maitrise d’un frottis sanguin coloré au MGG

O5.2.2 : Un champ au grossissement 100
Érythroblaste

lymphoblaste
Corps d’auer
Anomalies des rouges :

Schyzocites

Drepanocytose
 Dacryocytes

  

C5.3 : Démarche diagnostique devant une anémie

5.3.1.1 Définition des constantes erythrocytaires :

1- CCMH : concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine. C’est

la quantité d’hémoglobine contenue dans 100ml d’hématies. 

                   = (hémoglobine / hématocrite)*100

Hématocrite = le volume occupé par les hématies dans une quantité

connue de sang total. Il s’exprime en % et permet un contrôle direct de la
numération des GR.

 Valeurs de référence     32 – 36 %

 Diminution (hypochromie) : Oriente d’une manière générale vers un

défaut de synthèse de l’hémoglobine, la production des globules étant,
elle, normale.

Augmentation : 36% représente la saturation de l’hématie en

hémoglobine. Une valeur >36 doit être immédiatement interceptée au
laboratoire comme indice très sûr d’un problème analytique. 

2- TCMH : teneur corpusculaire moyenne en hémoglobine. C’est la

quantité d’hémoglobine contenue dans une hématie. 

                  = (hémoglobine / nombre d’hématies)*10 

Valeurs de référence   selon âge 

                                                         Adulte : 27-32 pg

                                                         Enfant <3 mois : 24-34pg

                                                         Enfant de 1 an : 23-31pg

                                                         Enfant de 3 ans à 12 ans : 24-30pg

3- VGM : volume globulaire moyen  

                = hématocrite / nombre d’hématies 

 Valeurs de référence     adultes   82 – 98 fl

Diminution (microcytose) : Toutes situations de déficit de synthèse de

l’hémoglobine.
 1. défaut de synthèse de l’hème : 
 par carence en fer – d’apport (ferriprive) 
 séquestration (inflammation chronique) 
 par blocage enzymatique (plomb, …)
 
2. défaut de synthèse de la globine (hémoglobinopathies)

Augmentation (macrocytose) : la synthèse d’hémoglobine est

normale ;   souvent consécutives à une carence en acide folique et/ou en
vitamine B12 :

 carence d’apport (auto-immune, malabsorptions diverses,

diététique, …).
 utilisation accrue (grossesse, néoplasies, …).
 avec ou sans anémie, par atteinte membranaire directe : alcool
chronique   (= indice non spécifique) 

Normocytose et anémie 

 Avec réticulocytes hauts : (anémie par hyper destruction) :

hémorragies, hémolyses non chroniques    
 Avec réticulocytes bas : (anémies par hypo prolifération) :
ferriprives, inflammatoires stade précoce, sidéroblastiques,
insuffisances divers (rein, thyroïde, …), aplasies

5-3-2Détermination manuelle de la numération des réticulocytes

 Ils sont invisibles à la coloration MGG → ils sont différenciés des
hématies par une coloration spécifique : coloration au bleu de crésyl.

Dans un tube à hémolyse, introduire :

 5 gouttes de sang
 5 gouttes de bleu de crésyl

Homogénéiser et incuber 15 minutes à 37°C puis réaliser le frottis.

→ À grossissement 100, compter 100 hématies sur différents champs et

noter le nombre de réticulocytes.

Le % normal entre 0.5-2

O5.3.3 : Récit de 4 anémies classées

 1) Anémie Microcytaire Hypochrome

Madame M.A agée de 50 ans hospitalisée dans le service de gastro

Le bilan d’NFS montre une anémie microcytaire hypochrome  :

 Hb à 8.7 g/dl [13-18]

 VGM à 67 fl [80-100]
 CCMH à 28 g/dl [32-36] et TCMH à 18 pg [27-31]
 IDR à 20% [11-15] Anisocytose

En consultant son bilan biochimique, elle presentait une valeur de CRP

normale donc l’origine n’est pas inflammatoire, la ferritinemie est à
4ng/ml [10-204] Frottis sanguin presentant une anisocytose bien
identifiée

 Il s’agit d’une anemie par carence en fer . 

 Une supplementation en fer est souhaitable
3) Anémie Normocytaire Normochrome régénérative
La patiente N.A âgée de 18ans (né le 23/11/2004) Hospitalisé dans le
service de chirurgie A

Le bilan d’NFS montre une anémie normocytaire normochrome :

 Hb à 10 g/dl
 VGM à 100 fl
 CCMH à 38 g/dl et TCMH à 40 pg

La numération des réticulocytes montre un taux = 213000 donc il s’agit

d’une anémie macrocytaire régénérative.

Le bilan montre un monocytose à 1800

FS : monocytose vérifiée

Présence de nombreux drépanocytes

La patiente présente une anémie normocytaire normochrome régénérative

en rapport avec la drépanocytose

A completer par EP HB

4) Anémie Macrocytaire Normochrome Arégénérative

 Madame J.L patienet agé de 60 ans, service d’urgence

Le bilan d’NFS montre une anémie macrocytaire normochrome :

 Hb à 2.5 g/dl
 VGM à 116.4 fl
 CCMH à 31.1 g/dl et TCMH à 36.2 pg

La numération des réticulocytes montre un taux < 100 G/L ( 35 G/L) 

donc il s’agit d’une anémie macrocytaire arégénerative.

 Aspec cytologique en faveur d’une anémie mégaloblastique.

FS :anisopoikylocytose manifeste avec presence de macrocytes,de

macroovalocytes et de qq dacryocytes .Presence d’erythroblastes
circulants avec des signes de dysérythropoése :binuclearuté,fragments
nucléaires ,contours cytoplasmique et nucléaires irréguliers hematies
ponctuées.

C5.4 : Conduite à tenir devant une thrombopénie

O5.4.1 : Photos d’une fausse thrombopénie détectée au
microscope au grossissement 100

Amas plaquettaires
O5.4.2 : Référence bibliographique sur les étiologies d’une vraie
thrombopénie

1) Article de l’Encyclopédie médico-chirurgicale rédigé par B. Godeau et P.

Bierling 2012 : Les thrombopénies
2) Article du Journal de Pédiatrie et de Puériculture rédigé par H.Boutroux,
R. Favier, S. Héritier, Lapillonne, P. Ballerini et G. Leverger :Mise au
point : les thrombopénies constitutionnelles
 Algorithme des différentes étiologies d’une vraie thrombopénie

Plaquettes<100 G/L

Réaliser un frottis sanguin

Eliminer une fausse thrombopénie par agglutination en

présence d’EDTA : refaire le prélèvement sur un tube citraté

*Anomalie des autres *Schizocytes *Anomalie des autres *Autres lignées normales
lignées lignées
ET/OU *Hémostase normale
*Myélogramme normal *Splénomégalie
*Hémostase perturbée *Absence
d’organomégalie

*Myélogramme normal

Thrombopénies Thrombopénie de Anomalie de répartition Destruction

centrales consommation (hypersplénisme) immunologique (PTI)
(microangiopathiesthro
mbotiques MAT et CIVD)
C6.1 : La phase pré-analytique en hémostase :

6.1.1 : Référence bibliographique sur la phase pré analytique en hémostase :

https://www.optmq.org/DATA/TEXTEDOC/503-HEMOSTASE-2017.pdf
6.1.2: Récit de la gestion de 5 non-conformités de la phase Pré-analytique
Non-conformités Conduite à tenir

Prélèvement coagulé Informer le prescripteur.

Quantité insuffisante Préciser l`anomalie sur le système
Non-exécution de l`examen.
Tube non conforme Non-exécution de l`examen.
Hématocrite basse ou haute Ajustement du taux de citrate contenu
(hémodilution ou hémoconcentration) dans le tube selon la valeur
d’hématocrite.

Matricule non conforme à celle du patient *S`il s’agit de 2 personnes différentes :

non réalisation de l’examen
 C6.2 : Exploration de la coagulation par les tests globaux :

6.2.1 Tableau synthétique des constituants des réactifs du TP,TCA,

Fibrinogène et TT
TP TCA Fibrinogène TT
2 flacons synthasill Fibrinogen-C XL 2 flacons de
Recombiplastin 2 flacons : Bovine thrombin thrombine : La
2G(RTF) :facteur APTT reagent :thrombine poudre est
tissulaire humain :PL+activateur bovine+albumine dissoute dans
recombinant Calcium chlorure bovine+chlorure de 1cc de liquide et
lyophilisé,des calcium 4cc d’eau distillé
phospholipides des +tampon+stabilisants
stabilisants ,un
conservateur et du
tampon
Recombiplastin 2G
Diluant (RTF
diluent) :chlorure de
calcium
polybrene,concervateur
6.2.3 : Exprimer correctement les tests globaux de la coagulation

6.2.3.4 : TCA correctement exprimé par rapport à un temoin pour

un patient sous héparine
Valeurs
TCA témoin 30se
TCA malade 73.3s
TCA ratio M/T 2.44
 T6.2.3.7 : Récit d’un cas où l’IR a été calculé et interprété

1 er cas :

Le patient K.F âgé de 55 ans est admis au service médecine interne

lupique

Son bilan d’hémostase montre les résultats suivants :

TP=85%

TCA=1.78

Fg=3g/L

Le patient présente un TCA isolé allongé TCA ratio M/T= 1.78>1.2.

Dans cette situation, il faut réaliser l’épreuve de correction puis calculer

l’indice de Rosner IR.

IR=[(TCA(T+M) – TCA témoin ) / TCA patient]*100

TCA (T) =33s

TCA (M) =59s

TCA (T+M) = 38s

IR = [(38-33)/59]*100= 8.47 <12 donc le TCA est corrigé => Le patient

présente un déficit en facteurs.

On continue par le dosage des facteurs 8,9 et 11

 C6.3 : Les tests de 2 ème intention en cas d’anomalies des tests
globaux de la coagulation
O6.3.1 : Récit d’un cas de TQ isolé allongé

Patiente de service de cardiologie, sous AVK.

TQ témoin
TQ malade 116.6
TP 7 12-14 se
INR 9.54 2-3 (patiente sous AVK)

 TQ allongé.

 Facteurs vit K dép : X, IX, VII, II inhibés par les AVK

 La valeur de l’INR est nettement élevée.

Surdosage en AVK

Il faut une adaptation posologique de l’AVK

Il faut effectuer quotidiennement le dosage de l’INR afin de

stabiliser l’AVK dans la zone

thérapeutique 2-3.

O6.3.2 : Récit d’un cas de TCA isolé allongé

Patiente de service de chirurgie, sous HNF.
Son bilan d’hémostase effectué le 14/07/2022 présente les résultats
suivants :
TCA

TCA témoin
TCA malade 238
TCA ratio M/T 8
TQ/TP

TQ témoin
TQ malade 15.2s

TP 81%

INR 1.15

TCA isolé allongé évoquant un traitement sur dosé en HNF. Le service

clinique a été informé et la dose a été adaptée.

T6.3.2.2 : Schéma d’un arbre décisionnel devant un TCA isolé

allongé
TCA allongé isolé
 non

Ecarter une erreur pré-analytique

Sous oui On valide le resultat

héparine

non

TT oui On valide+commentaire (impregnation heparinique a controler sur un

2ème prlv

non
oui
TCA(M+T) On valide+commentaire (TCA allongé corrigé à l’epreuve de melange
corrigé en faveur d’un déficit en facteur a controler sur un 2ème prlv

O6.3.3 : Récit d’un cas de TCA et de TQ allongés simultanément

Le patient T.J âgé de 60 ans est admis au service de gastro

une exploration de la fonction hépatique a été faite.

Bilan de biochimie :
Valeurs Valeurs usuelles
Bilirubine total(mmol/L) 397.55 <20
Bilirubine conjuguée(mmol/L) 320.1 <4
Phosphatase alcaline(UI/L) 737.000 70-450
ASAT (UI/L) 1.596.000 <40
ALAT (UI/L) 560.000 <45
GGT (UI/L) 1.000.000 <45

Cholestase + cytolyse aigue

Bilan d’hémostase :

Valeurs Valeurs usuelles

TCA
TCA témoin
TCA malade 44
TCA ratio M/T 1.6 <1.3
TQ/TP
TQ témoin
TQ malade 27.9 12-14secondes
TP 33 70-100%
INR 2.4 1.3

Les résultats de la biochimie le TQ et le TCA simultanément allongés sont

en faveur du diagnostic d’une insuffisance hépatique aigue

O6.4.1 : Test d’occlusion plaquettaire/PFA100

Il s’agit d’un test in vitro qui stimule le passage de sang sur une brèche
vasculaire.

Le sang citraté traverse le micro-orifice d’une membrane recouverte de

collagène +EPI ou ADP.

Le système mesure le temps nécessaire à l’occlusion plaquettaire : c’est le

temps d’occlusion plaquettaire.

Ce temps explore les fonctions d’adhésion et d’agrégation des plaquettes .

 Compétence 7 :

Immuno-

Hématologie

C7.1 : Le circuit des produits sanguins labiles PSL de la

préparation jusqu’à la dispensation
O7.1.3 : réaliser un cross-match

C7.2 : le groupage sanguin ABO, RH D

O7.2.3 : Récit d’un cas de difficulté de groupage

En effectuant un groupage, on constate une discordance entre epreuve

serique et epreuve globulaire avec un temoin auto pos
Anti Anti Anti RH Temoin GR GR GR Temoin Temoin
A B AB Alb A B AB Allo Auto
+ + + + - + + + - +

 Présence d’auto-anticorps de type agglutinines froides qui perturbent les deux

epreuves : sérique et globulaire.
On effectue un TCD
Solution : 
On effectue en premiére intention un groupage sanguin à chaud sur rhésuscope , si
persistance des resultats précedentes :
Epreuve serique : adsorption du sérum du malade sur des hématies O à +4°C  plusieurs fois. 
Epreuve globulaire : 3 à 5 lavages par l’eau physiologique pour eluer les autoAc à 37°C .
 Temoin Auto  negatif
 Groupe sanguin AB
C7.3 : Le phénotypage RH CcEe et Kell
C POS

E NEG

c POS

e POS

Kell NEG
C7.4 : le test de Coombs direct TCD

O7.4.2 : Récit des informations recueillies concernant l’étiologie

d’un TCD positif

La patiente J.A âgée de 32 ans est admise au service médecine

interne

un TCD est effectué

Son TCD est positif à IgG ++

Autres informations recueillis :

Son hémogramme :
Valeurs Valeurs usuelles Interprétation
HBG (g/dL) 4.8 11.1-14.7 Anémie
VGM (FL) 85 75-95 normocytaire
TCMH (pg) 27 25-33 normochrome
CCMH (g/dL) 32 31-37
GR (*10^6 µL) 1.76 3.9-5.2 Abaissée
HCT(%) 15 32-45 Abaissée
Numération des retic : 19000<120000=> Arégénérative
plaquette 92 150-400 thrombopenie

Devant toutes ces informations, le diagnostic d’une anémie hémolytique

auto-immune est posé.
 7.5.1.1 Récit d’une RAI positive

Une patiente âgée de…………………...

On effectue la RAI de dépistage en premier lieu :

RAI POSITIVE

On passe alors à l’identification de l’anticorps a l’origine de la positivité de la technique

enzymatique :
Rai positive présence d’anti Lea à confirmer par phenotypage
érythrocytaire

Si nécessaire à transfuser par du sang phenotypé et compatibilisé

Compétences

Transversales
 Compétence 1 : conditions de sécurité et hygiène

C1.1 : Biosécurité

O1.1.1 : Non conformités selon le guide de bonnes pratiques de

Laboratoire

Phase pré-analytique Erreur d’identification du patient sur le tube

Gestion de déchet
Tube non conforme
Manipulation des spécimens
biologiques
Absence d’étiquetage
Les déchets tranchants sont parfois jetés
dans une poubelle inadéquate
Le prélèvement est mis dans un tube avec
un anticoagulant non adapté à l’examen
demandé
Manipulation des tubes sans le port des
gants

O1.1.3 : Les procédures d’intervention d’urgence

Conduite à tenir en cas d’un accident d’exposition au sang :

On définit comme accident d’exposition au sang (AES) tout contact

percutané (piqure, coupure) ou muqueux (œil, bouche) ou sur une
peau lésée (eczéma, plaie) avec du sang ou un produit biologique
contenant du sang.

Devant un AES il faut :

1) Nettoyer immédiatement la peau avec l’eau courante et au

savon.
2) Désinfecter par trempage en assurant un temps de contact au
moins 5minutes avec un dérivé chloré (sauf pour les
muqueuses).
3) En cas de projection sur les muqueuses (en particulier les
yeux), rincer immédiatement et abondamment au sérum
physiologique ou à l’eau pendant 10minutes.
4) Evaluer en urgence les risques infectieux. (Sérologie VIH, VHC,
VHB).
5) Mettre en route un traitement (si nécessaire) au mieux dans les
4 heures suivant l’AES.
6) Déclarer l’accident auprès du cadre du service dans les 48
heures suivant l’accident.
1.2.2 Affiche expliquant les modalités de tri et les circuits de traitement des
déchets élaborés :
Compétence 2 : Organisation du travail
C2.1 : Conscience professionnelle, autonomie,
initiative et responsabilité
O2.1.2 : Faire preuve de conscience professionnelle
Conséquences de non-respect des procédures sur la qualité du travail :

Lors de la validation des résultats quotidiens, un résultat obtenu est

avéré incohérent avec la situation clinique du patient.

La phase pré-analytique a été exécutée convenablement :

-Le volume est de 4ml suffisant pour effectuer les paramètres de

l’hémostase

-il n’y a pas de caillot sanguin dans le tube

-le prélèvement n’a pas dépassé les 2h

Pour ne pas rendre des résultats probablement fausses, un 2 ème

prélèvement a été effectué qui a révélé des résultats nettement différents
des premiers et clairement adéquats avec la situation clinique du patient.

Le problème avec le premier tube était au niveau de l’étape de

prélèvement : le prélèvement a été fait soit pas une seringue ou sur un
tube sec puis transvaser dans un autre tube. Le problème peut même
être du à l’élimination d’un caillot détecté dans le prélèvement sans avoir
mentionné.

Le non-respect des procédures de a eu un impact péjoratif sur la qualité

du travail : une fausse thrombopénie a été révélé et des allongements
des temps de coagulation nettement incohérents sont obtenus.

Devant une telle situation, il faut toujours refaire le prélèvement et

s’assurer que toutes les étapes du prélèvement aux résultats ont été
exécutés convenablement et selon les procédures prédéfinies.
O2.1.3 : Contribuer à la rationalisation de la gestion des réactifs et
du matériel utilisés couramment

Fiche produit
Réactifs de l’épreuve globulaire du groupage ABO

Réactifs Anti A Anti B Anti AB

Désignation Anti-A monoclonal Anti-B monoclonal Anti-AB monoclonal
d’origine murine d’origine murine
Code couleur Bleu Jaune transparent

Contenance 10mL 10mL 10mL

Composition Azide de sodium Azide de sodium
Mélange IgG+ IgM Mélange IgG+ IgM Mélange IgG+ IgM
Conservation 2-8°C 2-8°C 2-8°C
Utilisation Epreuve globulaire / groupage sanguin ABO
Fabricants BIOMAGHREB / SIREBIO
 Fiche produit 2

Réactifs
Diluant
Désignation

Contenance Flacon de 100ml

Conservation *2-8°C
*6 mois maximum après ouverture du flacon ou jusqu'à la date de péremption
Utilisation *Phénotypage érythrocytaire
*TCD
*CROSS-MATCH

Fabricant
 Compétence 4 : Management de la qualité

C4.1 : validation des résultats de CQ :

O4.1.1 : Echantillons de contrôle qualité

Hémostase :
O4.1.2 : Instruction de réalisation d’un CQ

Quand réaliser un CQ ?

-Chaque jour

-A chaque ouverture d`un nouveau flacon

-Après chaque maintenance

-Avant la réalisation d’un dosage inhabituel

Comment faire un CQ ?

Exemple CQ hémostase :

 Mettre l’automate en marche

 Mettre les réactifs dans leur position habituelle
 Dans un tube à hémolyse, mettre les échantillons de contrôle de
chaque paramètre
 Au niveau de l’écran relié à l’automate, identifier les réactifs et
passer en mode contrôle qualité
 Lancer le test
 Les résultats obtenus sont directement projetés sur le diagramme
 Interprétation et refaire le contrôle si les résultats n’appartiennent
pas à la fourchette des valeurs
 O4.1.3 : interpréter les résultats des échantillons de CQ

 Les valeurs doivent être comprise entre 2SD et -2SD

 Si les valeurs se situent en dehors de cet intervalle il faut refaire le
contrôle
 si persistance de problème le réactif de contrôle n’est pas optimal
utiliser un nouveau produit de contrôle