Unité de Physiologie Cellulaire et Moléculaire

Voies de transduction du signal (2)

Cours de M1 PCM
2023
Plan du cours

Les récepteurs enzymes

I- Les différentes activités enzymatiques intrinsèques

II- Les RTK

II1- Définitions
1- Structure
2- Ligands
3- Activation
4- Réseau de molécules de signalisation intracellulaire
II2- Activation des voies de signalisation des RTK
II3- Les grandes voies de signalisations induites par les RTK
II4- La voie de la PI3K / AKT
1- Activation
2- PI3K et cancer
II5-La voie des MAP Kinases
A- La voie ERK1/2
B- La voie JnK
C- Exemple du récepteur de l’insuline

III- Récepteurs liés à une protéine tyr kinase (cytokines)

Exemple : Récepteur de l’IL6

IV-Récepteur ser/trh kinase

Exemple : Récepteur du TGFβ
V- Récepteur couplé à une enzyme ser / trh kinase
Exemple : Récepteur du TNFα

VI- Régulation
Récepteurs intracellulaires

1- Les hormones liposolubles

2- Les différentes classes de récepteurs intracellulaires
3- Localisation
4- Structure des récepteurs des hormones liposolubles
5- Activation
6- Dimérisation
7- Interaction avec l’ADN
8- Régulation
9- Réponse cellulaire
10- Résumé
11- Récepteurs nucléaires et pathologies
 Récepteurs enzymes

I- Les différents types de récepteurs

➢ Récepteurs à activité guanylate cyclase : production de GMPc

➢ Récepteurs à activité tyrosine phosphatase : déphosphorylent des tyrosines phosphorylées

➢ Récepteurs à activité tyrosine kinase

➢ Récepteurs à activité ser/thr kinase

➢ Récepteurs couplés à une enzyme à activité tyr kinase ou ser/thr kinase

II- Récepteurs à activité tyrosine kinase
II-1- Définitions
1-Structure
➢ Formés de polypeptides qui ont une activité tyr kinase dans leur domaine cytoplasmique
➢La plupart sont formés d’une seule chaîne polypeptidique à leur état inactif
sauf le récepteur de l’insuline (dimère)
Les familles de RTK

Chaque récepteur présente :

• Un domaine extracellulaire à domaines riches en cystéines ou domaines Ig like
• Un domaine transmembranaire
• Un domaine cytosolique présentant le domaine tyrosine kinase

3 classes de RTK
• Classe I : Récepteurs à domaines riches en cystéines
• Classe II : Récepteur de l’insuline
• Classe III : Récepteurs à domaines Ig like
2 - Ligands des RTK : Facteurs de croissance (FC) et Facteurs de différenciation (FD)
Différents types de FC et de FD sont produits par plusieurs cellules

Types de FC, FD Cellules productrices du Récepteur du FC

FC, FD

Epidermal Growth Factor ou Cellules épidermiques l’EGFR

EGF
Fibroblast Growth Factor ou Fibroblastes Le FGFR
FGF
Nerve Growth Factor ou cellules nerveuses le NGFR
NGF
Platelet-derived Growth les plaquettes sanguines le PDGFR
Factor
Isulin-like Growth Factor ou plusieurs cellules l‘IGFR1, 2
IGF1 et 2
Macrophage-colony Monocytes le MCSF-R
Stimulating Factor ou
M-CSF

L’ensemble des FC et FD stimulent

la prolifération, la croissance et
la différenciation cellulaire
3- L’activité des récepteurs TK
➢ Tous les RTK ont un domaine cytoplasmique à activité kinase
qui permet la phosphorylation des tyrosines
➢ Tous possèdent un grand nombre de tyrosines, la liaison du ligand entraîne l’activation du RTK par :
- La formation de dimères de récepteurs
- La modification de la conformation du dimère préformé
- La transphosphorylation des tyrosines
➢ Les phosphotyrosines seront des sites de liaison pour les protéines de signalisation (protéines
adaptatrices, protéines effectrices, enzymes)

3-1- La phosphorylation (1) 3-1- La phosphorylation (2)

3-2- La dimérisation des RTK

➢ La fixation du ligand induit une dimérisation du récepteur (ou oligomérisation)

➢La dimérisation et le changement de conformation induisent un rapprochement des domaines kinases
➢ Ce rapprochement permet la transphosphorylation
➢ La 1ère phosphorylation de tyr est située dans la boucle d’activation du domaine catalytique de la
kinase

Modification d’un dimère préformé

 3-3- Domaines de reconnaissance des résidus tyrosines phosphorylées
• Phosphorylation de tyrosines du domaine kinase
Contrôle de l’activité kinase du récepteur

• Phosphorylation de tyrosines dans des zones non catalytiques

Sites de liaison des domaines SH2 (Src homology 2)
ou PTB (Phosphotyrosine binding) présents au niveau des
protéines de signalisation

3-4- Domaines sensibles à la phosphorylation

➢ Les domaines SH2 (Src homology 2) : reconnaissent des sites peptidiques contenant des tyr phosphorylées
➢ Les domaines PTB (Phosphotyrosine binding domain) reconnaissent des sites peptidiques contenant des tyr
phosphorylées à l’extrémité Ct
➢ Les domaines WW : reconnaissent certains peptides à phosphosérine ou phosphothréonine
➢ Les domaines PH (Pleckstrin Homology) : reconnaissent les phosphoinositides (localisation membranaire)
➢ Les domaines SH3 : reconnaissent des sites peptidiques riches en proline
➢ Les domaines SH1 : reconnaissent des tyrosines kinases cytosoliques

SH2 PTB WW PH SH3 SH1

Y-P Y-P S-P PIP3 P-X-X-P-P Tyrosine kinase

3-5- Les protéines de signalisation
contiennent des motifs récurrents
ex : la protéine c-Src (SH2, SH3, SH1)
la protéine adaptatrice Grb2 (SH3, SH2, SH3)

3-6- Interactions multiples

d’une tyrosine kinase de type Shc qui présente
plusieurs domaines :
- PTB et SH2 se lient à une Y-P
- Y-P se lie à SH2

3-7- Liaison de protéines de signalisation

via domaine SH2 au niveau de différentes
tyr-P d’un RTK;
Les tyr-P sont localisées :
• soit dans le domaine tyr-Kinase
• soit en dehors
4- Réseau de molécules de
signalisation intracellulaire

Complexe de protéines de signalisation

➢ Protéine 1 à dom SH2, PTB, PH liée à

une tyr-P du RTK via SH2 (activation)

➢ Protéine 2 recrutée au niveau de PTB

de la protéine 1 via Y-P (activation)

➢ Protéine 3 à dom PPP est activée via

protéine adaptatrice à dom SH2 et
SH3

Protéines de signalisation intracellulaires

➢ Src : Tyrosine kinase cytoplasmique

➢ PI3K : Phosphatidyl inositol 3-Kinase
➢ Grb2 : Adaptateur protéique
➢PLC γ : Phospholipase Cγ
➢GAP : Guanine activator protein
➢ PTP : Phosphotyrosine phosphatase
➢ Protéines G monomériques
➢ MAPK : Mitogen activated protein kinase
➢ Facteurs de transcription
II-2- Activation des voies
de signalisation

Induction de la cascade
d’activation intracellulaire

Recrutement de médiateur
À la membrane via
Interaction Y-P-Domaine SH2

II-3- Les grandes voies de signalisation induites via un RTK (1)

II-4- La voie de la PI3Kinase /AKT
2- La PI3K activée phosphoryle
1- Activation de la PI3K (1) les phosphatidyls inositols membranaires
• La PI3K est formée de deux sous unités
-Une sous unité régulatrice : p85 à domaines SH2
- Une sous unité catalytique : p110

• Les lipides membranaires notamment le PIP2 sont

des substrats de l’enzyme
Le PIP2 génère le PIP3 sous l’action de la PI3K activée

• La PI3K est recrutée au niveau du récepteur

via • Le PIP3 sert de point d’ancrage à deux protéines
• Ses domaines SH2 qui se lient à des Y-P kinases : les phosphoinositides Dependant kinases,
PDK1 et AKT
• L’association de PI3K aux tyrosines
Phosphorylées du Récepteur induit
une modification conformationnelle
de la protéine et son activation
 3- Activation de la protéine Akt (PKB)

• L’activation des kinases PDK1 et AKT se fait

au contact de PIP3 via leurs domaines PH

• L’interaction PIP3-Kinases induit un changement

de conformation et l’activation par phosphorylation
de PDK1 qui active à son tour AKT par Phospho-
rylation

Akt induit la prolifération cellulaire de différentes façons :

• Par activation du cycle cellulaire
• Par activation de facteurs de transcription qui induisent l’expression de gènes impliqués
dans la prolifération
• En bloquant l’apoptose

4- Akt bloque la dégradation de la cycline D

• AKT active phosphoryle la GSK3β (glycogène synthase

kinase) et l’inactive
• La GSK3β inactive ne peut pas phosphoryler la cycline D
• La cycline D non phosphorylée est active et impliquée
dans la prolifération
• Dans le cas où la GSK3β est active par inactivation
de AKT, elle induit la phosphorylation de la cycline D qui
sera dégradée par ubiquitination via protéasome
5- Akt active le facteur de
transcription NFkB

• Dans le cytosol, le NFkB est inactif

• il est lié à son inhibiteur l’IkB
• L’activation de AKT induit la phosphorylation
de IkB qui sera inhibé et se détache de NFkB
• NFkB libéré devient actif et migre dans le noyau
• En tant que FT, il agit sur des gènes cibles et
permet l’expression de protéines impliquées
dans la prolifération

6- Rétrocontrôle de la voie PI3K / Akt

7- Autres voies d’activation de la PI3K
II-5- La voie des MAPK (mitogen activated protein kinase)

Chez les mammifères, la voie des MAPK se divisent en 4 sous familles

• La voie ERK1/2 (extracellular signal-regulated kinase)
• La voie p38
•La voie ERK5
•La voie JNK (Jun kinase)

L’activation des différentes voies dépend du type cellulaire et du signal extarcellulaire

impliqué

Schéma de la cascade d’activation par phosphorylation des MAPK de ERK1/2 et JNK

A- La voie ERK1/2
1- Activation de Grb2

• Grb2 est un adaptateur qui

est recruté au niveau de Y-P via son Grb2
domaine SH2
• Il permet le recrutement de Sos via
son domaine SH3 qui reconnait le
domaine riche en proline de Sos

2- Activation de Ras par Sos

• Sos est un facteur d’échange de

nucléotide guanine (GEF =
guanine exchange factor)

• Il active la petite protéine G

monomérique Ras qui passe de
l’état inactiflié au GDP à l’état
actif lié au GTP
3- Protéines G monomériques « Commutateurs biologiques »

➢ GEF: guanine nucleotide exchange

factors
➢ GAP: GTPase activating proteins
➢ GDI: Guanine nucleotide exchange Ras active Ras inactive
inhibitors est ancrée est
à la mbne désancrée
via A/G et l’A/G
interagit
avec GDI

4- Activation de Raf par Ras

5- Activation de ERK1/2

➢ Raf = 1ère MAPK qui est activée par Ras

➢ Elle induit la phosphorylation en cascade
d’une série de Ser/Thr kinases MEK et ERK1/2
➢ MEK a une action cytosolique
➢ ERK1/2 a une action cytosolique et nucléaire,
➢ ERK1/2 subit la migration nucléaire
 6- ERK1/2 induit l’expression de c-fos

➢ ERK1/2 induit l’activation d’un facteur

de transcription ELK1
➢ ELK1 agit sur son gène cible et permet
L’expression de c-fos

B- La voie de Jnk (1)

1- Activation de Jnk via la protéine G Rac

2- Activation de Rac via des GEF (guanine exchange factor)

Vav et Sos sont des GEF capables d’activer Rac

3- Rac inactve liée au GDP devient active après sa liaison

au GTP et son ancrage à la membrane cellulaire Vav, Sos
3- Activation de Rac via Vav
Vav peut être activée par le PIP3 via PI3K

- PI3K activée permet la formation de PIP3 à

partir du PIP2
- Vav présente son domaine PH à PIP3
- Elle sera activée après interaction de PH à PIP3

Activation de PI3K Activation de Vav Activation de la protéine G monomérique Rac

4- Activation des kinases

• Après activation de Rac par Vav/Sos
• Cascade de phosphorylations (MEKK1, MKK4 et Jnk)
dans le cytosol

5- Jnk phosphoryle le facteur de transcription c-jun

• Une fois activée, Jnk migre dans le noyau
• Elle induit la phosphorylation du FT c-Jun sur deux résidus serines
 6- Les MAPK activent le facteur de transcription AP1

- ERK1/2 induit l’expression de cfos

- JNK induit la phosphorylation de cjun
- Cjun et cfos forment un complexe qui
induit l’activation d’un nouveau FT : AP1

7- AP1 active le gène de la cycline D

- Surexpression de la cycline D
- Activation du cycle cellulaire
C- Activation de PLCγ par FGFR1

- Fixation du facteur de croissance (ex FGF)

- Dimérisation, changement de configuration, transphosphorylation des tyrosines de FGFR
- Recrutement de la phospholipase Cy (PLCy) via ses domaines SH2
- Action de PLCy sur PIP2 (Phosphatidylinositol triphosphate) : Formation de DAG (Diacylglycérol)
et d’IP3 (Inositol triphosphate)
- Activation de PKC par le DAG et activation de la voie ERK1/2 par PKC
- Libération de Ca++ après activation du RIP3 par l’IP3
 8- Voie des MAPK et cancers
• Dans de nombreux cancers, Ras présente une mutation ponctuelle qui la rend constitutivement active
• Ras mutée autoactive MAPK toujours actives Prolifération Ras est un oncogène

9- Mutation des gènes de la voie Ras dans les tumeurs

C- Exemple de RTK : le récepteur de l’insuline
 Résumé de la voie de transduction du récepteur de l’insuline

Le récepteur de l’insuline induit :

1- L’activation de la voie PI3K/AKT via IRS1 pour :

• La régulation de l’entrée de Glc dans la cellule musculaire et la cellule adipeuse
via les transporteurs Glt4
• L’activation de la glycogène synthase par phosphorylation et inactivation
de la glycogène synthase kinase (activation de la glycogénogenèse)

2- L’activation de la voie des MAPKinases via Ras

3- L’activation de la glycogène synthase (glycogénogenèse) par phosphorylation et

activation de la protéine phosphatase 1 (PP1) (activation de la glycogénogenèse)
III- Les récepteurs liés à des protéines tyrosine kinases

➢ Les R à certaines cytokines n’ont pas d’activité kinase intrinsèque, ils sont associés à des protéines
Kinases cytoplasmiques
➢ Les cytokines sont des protéines qui contrôlent la réponse immunitaire, elles induisent différentes
réponses biologiques (Inflammation, prolifération différenciation)
➢ Suite à une stimulation des récepteurs à certaines cytokines (IL6), les voies de signalisation ont
permis de caractériser le complexe Jak/STAT

III-1- La voie de l’IL6 III-2- Activation des facteurs stat3 (1)

IV- Récepteurs à activité ser / Thr kinase : Le récepteur TGFβ

1- Caractéristiques

2- Activation du récepteur TGFb

3- Activation des facteurs de
transcription Smad

V- Récepteur couplé à
une protéine ser / thr kinase (TNFR)
Akt: protein kinase B;
APS: adaptor protein with pleckstrin homology and src homology 2 domains;
CAP: Cbl/Cbl-associated protein; Cbl: Cbl family of adapters, which comprises c Cbl, Cbl-b, and Cbl-c/Cbl-3,
is implicated in receptor tyrosine kinase signaling;
ERK: extracellular signal-regulated kinases;
Fln: flotillin;
Grb2: growth factor receptor binding protein 2;
GSK-3: glycogen synthase kinase 3;
IR: insulin receptor;
IRS1: insulin receptor substrate 1; IRS2: insulin receptor substrate 2;
JNK: Jun N-terminal kinase;
MAPK: mitogen-activated protein kinase;
MEK: mitogen-activated protein kinase kinase;
mTOR: mammalian target of rapamycin;
NO: nitric oxide; NOS: nitric oxide synthase;
P70S6K: ribosomal p70 S6 kinase;
PCIs: percutaneous coronary interventions;
PDK1: phosphoinositide dependent kinase-1;
PI3K: phosphatidylinositol 3-kinase;
PKC: protein kinase C;
RAF: Rapidty growingflbrosarco,nav-raf-1 murine leukemia viral oncogene homolog 1,
raf proto-oncogene serine/ threonine protein kinase;
Ras: Rat sarcoma : a small GTP binding protein;
Shc: Src homology domain containing;
SOS: mammalian son of sevenless;
TC10: Rho family member GTPase.