Faculté des Sciences NOM :

Prénom :
DEPARTEMENT DE BIOLOGIE Code :
Filière S.V.I
Semestre 5 - 2017-2018
Module de biologie moléculaire
Durée d'examen: 1H15min
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[EXAMEN TYPE 3:dernier exemple]

Partie 1 :

I .1. Définir les termes suivants :

Vecteur de clonage :
c'est un transporteur
enzyme de restriction :
enzyme synthétisé par les bactérie , permet de dégrader ou détruire une molécule d'ADN au niveau
d'une séquence spécifique appelé palindrome .

PCR :
technique d'amplification d'ADN , elle permet d'obtenir un très grand nombre de copie d'ADN choisie
, autrement dit multiplier un fragment d'ADN en millions d'exemplaires .
un sonde :
est un marqueur qu'on introduit dans un milieu biologique pour que ces propriétés vis-à-vis des
constituant de ce milieu soit révélé par l'émission d'un signale détectable par nos instrument de
mesure .

thermocycleur :
est une machine automatisée qui contrôle le changement de la température de chaque étape de la
PCR .

plasmide :
petit ADN circulaire qui existe chez les bactéries , capable de réplication autonome (vecteur de
colonage) .

Tris-EDTA :

est une solution tampon de migration utilisée en électrophorèse sur gel d'agarose .

2. citez les 3 enzymes qui ne font partie des endonucléases de restriction , en précisant le rôle de
chaque enzyme .

Dnase I : dégrade l'ADN db ou sb , les coupures sont complètement aléatoire .

Nucléase S1 : dégrade l'ADN sb , nettoie les extrémités d'ADN sb .
Exonucléase III : catalyse l'hydrolyse séquentielle d'un ADN au niveau 3'OH.

1
3.citez brièvement les propriétés fondamentales qui font d'un plasmide une vecteur de colonage.

1) capable de réplication autonome dans une cellule hôte donnée .

2) possède un polylinker ou site multiple de clonage .
3)supporte l'insertion d'un fragment d'ADN + ou - grand .

4. citez 2 marqueurs utilisés dans les sondes froides .

1) digoxygenine .
2) biotine-streptavidine .

5. complétez le tableau suivant :

PCR (polymérase chain réaction)
réactifs étapes
1) Taq polymérase Dénaturation à 95 C
2)ADN cible Hybridation à 50 C
3) les amorces d'ADN Elongation à 75 C
4)les oligonucléotides (dNTP:dATP ,dGTP ,
dCTP,dTTP).
5) le tampon (tris-HCL 10mM , MgCl2 1.5mM , pH =
8.3 et KCl 50mM)

6. la régulation de l'opéron tryptophane se fait par 2 mécanismes différents , citez ces deux
mécanismes ().
1) par le complexe répresseur-opérateur.
2) par la phénomène d'atténuation.

Partie 2 :

II .1. quel est le rôle de :

Hélicase :
déroulement de la molécule d'ADN .

Topoisomèrase I :
régule l'état d'enroulement .

les protéines SSB :

stabilisation et empêche la réappariement

ADNp I :
élimine les amorces d'ARN et resynthétise la partie manquante .

2
DnaG :
ou primase ,ensyme qui synthétise les amorces d'ARN .
mésappariement :
type d'erreur de la réplication exemple : A avec G ---- Correction-----> A avec T
2. citez les 3 étapes de la traduction .
initiation
élongation
terminaison
3. la troisième étape se fait grâce à 3 facteurs de terminaison , écrire ces 3 facteurs .
RF1
RF2 RELEASE FACTOR
RF3
4.complétez le tableau suivant :
Les antibiotiques de la traduction
Inhibiteur de l'initiation Inhibiteur de l'élongation
Streptomycine ---> empéche la fixation d'ARNt-f-met Tétracycline ------> pas de fixation d'ARNt-aa
Chloramphénicol----> pas de liaison peptidique
Puromycine-----> Analogue d'ARNt
Erythromycine ---> translocation du Ribosome sur
l'ARNm

Partie 3 :

au cours de la transcription :

INTRON1

EXON1 EXON2 EXON3

Promoteur GC AG GT AG Terminateur

1) complétez le schéma et préciser la nature de ce fragment (sans justification).

2) donner le fragment d'ARNm pré-maturé et l'ARNm mature , en précisant la nature de mécanisme utilisé.

ARNm pré EXON3

EXON1 EXON2

Cap GC Poly A (AAAUAA)n

Mécanisme:
épissage alternative
EXON1 EXON2 EXON3 ARNm
mature
Donneur GU est muté