L'antibio résistance des souches de staphylocoques isolées à partir

des cathéters veineux au niveau des patients hospitalisés au

niveau de service de réanimation
BAHI MANEL.

1.1 Résumé
Les staphylocoques sont des bactéries impliquées dans des pathologies variées et de degrés de gravité divers.
Elles sont un des premiers agents responsables d'infections nosocomiales (infections contractées en milieu
hospitalier) .Cependant, ces bactéries sont fréquemment retrouvées dans l'environnement (eaux non-traitées,
sols, objets souillés). Les traitements visant à éradiquer les infections sont difficiles car de nombreuses
souches sont multi résistantes aux antibiotiques. Selon les services hospitaliers.

la prévalence élevée et la multi résistance des S. aureus est devenu remarquablement répandue dans les
hôpitaux . Cela nécessitent la mise en œuvre d’une stratégie active, efficace où la sécurité microbiologique
dans le milieu hospitalier doit être garantie afin d'éviter la propagation de résistance aux antimicrobiens par
ces micro-organisme.

1.2 INTRODUCTION premier disposé en groupe ou en grappe appelé «

1.2.1 Définition de staphylocoques:
Les staphylocoques sont des bactéries
symbiotiques omniprésentes1. Ils représentent
environ de 50 % des micro-organisme aérobies
isolées sur la tête, les aisselles, les bras, les jambes
et dans les narines. Ils ont un rôle très important
dans l'équilibre physico-chimique de la peau et
forment une barrière contre les bactéries de la
flore de transition. Leurs répartitions sur la peau
n'est pas uniforme . Il existe des niches
préférentielles qui indique2. La première
description de cette bactérie (un microbe
conchoïdal) isolée du pus d'abcès datent de 1871,
mais ce n'est que quelques années plus tard que
ces travaux ont permis de nommer les bactéries
rencontrées. Ainsi, en 1878, Robert Koch en
Allemagne et Louis Pasteur en France en 1880 ont
décrit des grappes de coques dans du pus humain3.
En 1883, Ogston a été le premier auteur à
distinguer deux types de coques pyogènes : le
1
Davido, B., 2010.
2
Morot-Bizot, S.C., 2006.
3 6
(Fasquelle, 1974; Sambanthamoorthy, 2007)
1
staphylocoques » et l'autre disposé en chaîne
appelée «Streptococcus »4. Les staphylocoques
ont été décrit pour la première fois par Anton
Julius Friedrich Rosenbach en Allemagne en 1884
en cultivant des bactéries sur un milieu solide. Il
différencie ainsi S.aureus de S.albus par la
coloration des pigments produits par les colonies 5.
En 1885, Zopf a classé Staphylococcus et
Micrococcus comme Micrococcus. Puits séparés
par la suite par Flugge, Evans, Bradford et
Niven(1955) ont classé les cocci anaérobies
facultatifs et aérobies dans le genre
Staphylococcus et Micrococcus, respectivement.
Cette classification est basée sur leur action vis-à-
vis de la gélatine et le test d’oxydation –
fermentation du glucose6 .Une distinction claire
basée sur la composition de l'ADN entre les deux
genres a été suggérée par Silvestri et Hillen
(1965). La proportion de bases G + C dans l'ADN
de Micrococcus est de 6373%, contre 3039% pour
4
(Berche et al., 1988; Spicer,2003; Gillespie and Hawkey,
2006)
5
(Hennekinne, 2009)
(Baird‐Parker, 1965)6
les Staphylocoques. Indique qu'il n'y a pas de
relation entre les deux genres7
1.2.2 Les infections cathéters:
Les cathéters veineux périphériques courts sont
des dispositifs médicaux stériles introduits dans
une veine superficielle par voie percutanée. Ils
sont utilisés dans un but diagnostique ou
thérapeutique. Ils permettent l'administration
parentérale de solutés, de produits sanguins, de
solutions nutritives et de médicaments. Leur
utilisation est très fréquente et concerne tous les
secteurs de soins. En France, le nombre annuel de
cathéters veineux périphériques mis en place est
estimé à 25 millions. Les cathéters peuvent être à
l'origine d'infections locales ou systémiques,
potentiellement sévères. La comparaison des
risques infectieux liés aux différents types de
cathéters (centraux ou périphériques, veineux ou
artériels) montre que celui lié aux cathéters
veineux périphériques est le plus faible.Ainsi,
concernant les infections systémiques, les
cathéters veineux périphériques courts sont à
l’origine de 4 à 8 % des bactériémies
nosocomiales8-9 et de 5 % des bactériémies
iatrogènes en ambulatoire8. Une étude anglaise
montre que, dans les hôpitaux non universitaires,
ces cathéters sont à l’origine de près de 20 % des
bactériémies liées à un dispositif médical 9 Les
infections locales sont plus fréquentes. La
prévention du risque infectieux lié aux cathéters
intra-vasculaires a déjà fait l’objet de
recommandations, mais elles ne traitent pas
toujours des cathéters veineux périphériques
courts de façon spécifique et les mesures
proposées se basent fréquemment sur des études
qui concernent les cathéters veineux centraux 10-11
L'infection est une complication majeure des
cathéters veineux centraux à long terme. Jusqu'en
7
(Hawkey, 2006)
8
Réseau d'alerte, d'investigation et de surveillance des
infections nosocomiales
9
Coello R, Charlett A, Ward V, Wilson J, Pearson A,
Sedgwick J, et al.
10
. O'Grady NP, Alexander M, Dellinger EP, Gerberding
JL, Heard SO, Maki DG, et al
11
C-CLIN Paris-Nord
2
1990, l'infection était confirmée par culture de
l'extrémité du cathéter et, plus récemment, par
culture d'un caillot sanguin dans le réservoir, mais
ces techniques nécessitaient le retrait du cathéter.
De nouvelles technologies, telles que les
hémocultures quantitatives appariées et les délais
entre les hémocultures appariées positives, ont
permis de confirmer l'infection sans retirer le
cathéter. Le retrait du cathéter associé à une
antibiothérapie systémique restera un traitement
de référence, notamment si l'état du patient est
sévère ou si l'infection est due à Staphylococcus
aureus ou à Candida. Plus récemment, des
traitements ont été développés utilisant des
techniques de blocage antibiotique ou reposant sur
le maintien de dispositifs non liés à une
antibiothérapie systémique. Étude à évaluer
L'efficacité de cette méthode alternative peut
atteindre 82 % pour les cathéters tunnel et 30 % à
80 % pour les infections de port entièrement
transplantables. Les caillots de fibrine dans le
réservoir de l'appareil n'ont pas accès aux
antibiotiques. Cela peut expliquer la persistance
des micro-organismes et des taux d'échec plus
élevés.
1.2.3 l'objectif de l'expérience :
Etudier le taux de résistance de staphylocoques
aureus dans plusieurs antibiotiques
1.3 MATERIEL ET METHODE:
1.3.1 Prélèvement :
Les cathéters veineux ont été
soigneusement prélevés dans des conditions
d’asepsie, placées individuellement dans
des tubes en verre stériles puis transportés
immédiatement au laboratoire pour être
analysé.
1.3.2 Ensemencement et isolement
L’extrémité distale de chaque dispositif
médical a été coupée, placé dans 1 mL
d’eau physiologique stérile puis agité au
vortex durant 1 minute ( Brun Buisson,
 2005)12. Un volume de 20 µL a été
ensemencé simultanément sur gélose
Chapman. Les boites ensemencées sont
incubées à 37°C pendant 48 heures.
1.3.3 Identification
L’identification des souches est contrôlée,
après vérification de leur pureté par :
l’étude des caractères macroscopiques ;∙
l’étude des caractères microscopiques
(forme des colonies, coloration de Gram) ;
l’étude des caractères biochimiques (API
20Staph∙ (Biomérieux®, France).
1.3.4 Étude de l’antibio résistance
L’étude de la sensibilité aux antibiotiques a
été réalisée par la méthode de diffusion sur
milieu gélosé Mueller-Hinton selon les
normes et les recommandations du comité
de l’antibiogramme de la Société Française
de Microbiologie (CA-SFM, 2017)13.
L’antibiogramme par diffusion est réalisé
avec une suspension contenant
108UFC/mL,
Les disques d’antibiotiques (Bioanalyse R)
suivant ont été testés :
l’Amoxiciline (AMC), la Cefotaxime
(CFM), l’Ampicilline (AMP), le
Ciprofloxacine (CIP), la Tétracycline (TE),
Erythromycine (E), Gentamycine (GEN) ,
Vancomycine (VA).
1.4 RESULTATS:
D'après les antibiotiques testés ;
Dans la famille d'antibiotique β-lactamine ; on a
pour l'Ampicilline AMP : les 4 souches de
S.aureus résistent à cette antibiotiques avec un
taux de résistance total (100%) et c'est le cas aussi
pour l'Amoxiciline AMC; toutes les souches sont
résistantes (résistance à haut niveau).Pour la
12
Brun-Buisson C. (2005).
13
CASFM. (2017).
3
Cefotaxime CFM : les souches 1 et 4 sont
résistantes , et les souches 2 et 3 sont sensibles ;
donc il y a un taux de résistance à 50% et un taux
de sensibilité à 50% .Dans la Cycline ; la
Tétracycline TE a été résisté par les 4 souches de
S.aureus (taux de résistance à (100%).Dans la
Macrolide ; pour l'Erythromycine E : les 4
souches sont à 100% sensibles (taux de sensibilité
total). Ainsi que dans la famille de Glycoptide ;
pour la Vancomycine VA : toutes les souches sont
sensibles avec un taux de sensibilité à 100% . la
Ciprofloxacine CIP de la famille de Quinolone a
été resisté par les souches de S.aureus (100%
résistantes).Dans la famille d'Aminoside ; pour la
Gentamycine GEN : les souches 1 et 3 résistent
conte cette antibiotique mais les souches 3 et 4
sont sensibles donc le taux de résistance est à 50%
et de sensibilité à 50% .
1.5 DISCUSSION :
D'après notre travail concernant les souches de
S.aureus isolées à partir des cathéters veineux au
niveau des patients hospitalisés au niveau de
service de réanimation , ce travail à été réalisé par
un groupe des étudiants de 3 ème année
microbiologie à l'université d'ain temouchent .
l'expérience était sur 4 souches de S.aureus qui
ont été soumis à une antibiogramme pour vérifier
leur résistance vis-à-vis de 8 ATB appartenant à
différentes familles.
Nos résultats montrent une grande résistance de
S.aureus contre l'amp avec un taux à haut niveau
(100%) , d'autres études de G.H. SOULA, E.
PICHARD, G.G. SOULA, A. KODIO sont
proches à notre résultat avec un taux de résistance
élevé à l'ampicilline(82.5%)14
D’après nos résultats on a signalé aucune
résistance a Vancomycine (0%) tandis que les
autres études de Bensmara Khadidja Chibani
Khaoula15 ont signalées un faible taux de
14 ETUDE BACTERIOLOGIQUE DES INFECTIONS
URINAIRES A BAMAKO : ORIENTATION PRATIQUE
(tableau 5)
15
Bensmara Khadidja Chibani Khaoula Diplôme de Master
En Microbiologie appliquée Etude de la résistance aux
antibiotiques des Staphylocoques dorés et blancs isolées à partir le
résistance (5%) . Ainsi que les autres études de
Chaalal. (2013) ; Benhedane. (2012) ; Ben Hania
& Kadir., (2017) ont trouvés les mêmes résultats
que nous (taux de résistance 0%)
une absence totale de résistance contre l'
érythromycine (100% sensibles) . par contre de
Bensmara Khadidja Chibani Khaoula ont noté
une faible fréquence de résistance à
l’Erythromycine (10%). nos résultats sont
concordé
avec Benhedene. (2012) qui a rapporté aucune
résistance à l’Erythromycine (0%).
on a observé un taux de résistance à 100% à
Ciprofloxacine , nos résultats sont diffèrent à celui
de Bensmara Khadidja Chibani Khaoula qui
ont trouvé une faible résistance à Ciprofloxacine
(5%).
pour la Gentamicine , on a noté un taux de
résistance moyen (50%) . par contre les résultats
de Bensmara Khadidja Chibani Khaoula qui
ont marqué une taux de résistance faible à
gentamicine (5%) . il y a d'autres études qui ont
trouvé aucune résistance à la gentamicine comme
les résultats de Boutet & al., (2005)16
Concernant la tétracycline on a un taux de
résistance à haut niveau (100)% . autres études de
Khadidja Chibani Khaoula ont observé un taux
de résistance moyen à la tétracycline (30%). les
études de Chaalal. (2013) ; Benhedane. (2012) on
trouvé des taux de résistance (16%, 17%) .Et
Belmamoun. (2017) qui a montré un taux de
résistance (71.43%).
les souches de S.aureus qu'on a étudié sont 50%
résistantes à la cefotaxime .par contre d'autres
études de Mme. Akoua Tania Laurelle AZA-
GNANDJI17 qui a noté un taux de résistance
élevé (85,7%) à la cefotaxime
lait cru commercialisé de la région Ain M’lila, Ain Fakroun et
Oum El Bouaghi (fig12)
16
boutel 2005
17
Mme. Akoua Tania Laurelle AZA-GNANDJI -Mémoire de fin de
formation-
4
dans notre étude , on a trouvé un taux de résistante
total (100%) à l'amoxiciline , ainsi que les
résultats de Mme. Akoua Tania Laurelle AZA-
GNANDJI a marqué des résultats proches de
notre résultats avec un taux de résistance élevé
(78.6%).
1.6 CONCLUSION
Les staphylocoques représentent les pathogènes
les plus importants et les plus inquiétants dans les
infections humaines
ces bactéries restent les germes prédominants dans les
infections . D'après l'expérience réalisée on a conclue
que Les staphylococcus aureus sont devenus
résistants a presque tous les antibiotiques donc on
peut dire que les S.aureus sont des bactéries multi
résistants . il ya plusieurs espèces microbiennes
qui ont développé des mécanismes de résistance à
plusieurs classes d'antibiotiques . le traitement
contre ces bactéries devient de plus en plus une
problématique dans les hôpitaux à causes des
infections causés par les bactéries multi résistants .
La résistance bactérienne aux antibiotiques est
apparue rapidement après leur introduction dans le
traitement des maladies infectieuses. Cette
résistance est un facteur majeur compliquant le
traitement des infections bactériennes et la
dissémination des souches multi résistantes. La
lutte contre l'antibiorésistance, priorité de santé
publique, vient maintenant au premier plan des
enjeux de sécurité du traitement , il s'agit de
préserver Il s'agit de préserver l'efficacité des
antibiotiques.
1.7 REFERENCES :
B
Baird‐Parker, A., 1965. Staphylococci and their
classification. Annals of the New York
Academy of Sciences128, 4-25.
Bensmara Khadidja Chibani Khaoula Diplôme
de Master En Microbiologie appliquée Etude de
la résistance aux antibiotiques des Staphylocoques
dorés et blancs isolées à partir le lait cru
commercialisé de la région Ain M’lila, Ain
 F
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5
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