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Mode opératoire : Prélèvement urétral 20/12/2023 1/3

1. Objet et domaine d’application

Ce mode opératoire décrit les principes de réalisation d’examen d’un prélèvement urétral.
Certaines recherches sont exclues de l'examen du prélèvement urétral et doivent faire l’objet
d'une prescription explicite complémentaire :
 Mycoplasme
 Chlamydiae

2. Responsabilités

Le technicien est responsable de la préparation des échantillons, de la réalisation de l’examen et de

la lecture des éléments présents dans le prélèvement urétral.

3. Déroulement de l’activité
3.1. Intérêt
L’Examen d’un prélèvement urétral a plusieurs objectifs :
- Séparer les germes pathogènes de la flore génitale normale
- Diagnostiquer les infections sexuellement transmises
- Apporter une aide au traitement

3.2. Matériel - Réactifs

 PSM
 Lames et lamelles
 Anse stérile
 Géloses : au sang, Sabouraud, Chocolat (PVX et VCN), MaConkey

3.3. Echantillons

Echantillon prélevé sur 2 écouvillons.

3.4. Exécution de l’analyse

J0 :
Ensemencer les milieux de culture avec une anse stérile (10 µL) à partir du 1 er
écouvillon :
1. Gélose chocolat PVX
2. Gélose chocolat VCN Sous CO2 à 37°C
3. Gélose au sang
4. Gélose MaConkey
5. Gélose Sabouraud

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 Faire des stries perpendiculaires très serrées sur toute la surface de la boîte selon la technique
d’isolement par épuisement (fig. a).

Figure a

 Incuber 48 heures à 37°C les géloses sous CO2 et 24h à 37°C les autres géloses
 Les géloses sont à regarder tous les jours.
Examen direct à l’état frais

Faire la recherche de Trichomonas vaginalis (parasite toujours pathogène responsable des IST
(infections sexuellement transmissibles):

 Ajouter quelques gouttes d’eau physiologique dans le tube contenant le deuxième

écouvillon, agiter le mélange par un agitateur type Vortex puis déposer 1 à 2 gouttes sur une
lame. Recouvrir d’une lamelle et observer à l’objectif X10 puis X40, la présence éventuelle
de Trichomonas vaginalis, qui sont des flagellés mobiles.
 Noter la présence d'hématies et de leucocytes (rares, quelques, assez nombreuses,
nombreuses).
 L’observation de l’état frais permet aussi de repérer les levures

 Noter les résultats dans le cahier de bactériologie

Examen direct pour Coloration de Gram et MGG (ou bleu de méthylène).

- Réaliser deux frottis pour une coloration de gram et MGG (ou bleu de méthylène).
- La coloration de gram permettra :
o De rechercher la présence de diplocoques gram négatif : des levures, des cocci gram
positif ou des bacilles gram négatif
o De noter la présence ou l’absence de polynucléaires neutrophiles
- La coloration de MGG (ou bleu de méthylène). permettra de rechercher la présence de
gonocoque : diplocoques gram négatif en grain de café intracellulaires.
 Noter les résultats dans le cahier de bactériologie.

J+1 : lecture des milieux

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 Faire les Gram et tests rapides d’identification ainsi que l’antibiogramme de la ou des
différentes colonies selon le schéma suivant :
La conduite à tenir en fonction du milieu et de l’aspect des colonies

Milieu Aspect des colonies En 1ère intention Conduite à tenir

Gram
Chocolat polyvitex (1) variable Fonction résultat des tests
Oxydase et/ou catalase
Chocolat Coloration de gram API NH
Colonies grisâtres
VCAT Catalase et oxydase ATB Neisseria

Coloration de gram
Colonies ß Catalase Pas d’ATB si strepto B
Sang ANC
hémolytiques Agglutination strepto (catalase -) ATB STAPH si S .aureus (1)
Rapidec staph (catalase +)

Sabouraud (1) Colonies blanches Test de filamentation Antifongigramme

Gram
MaConkey (1) Colonies rosâtres Fonction résultat des tests
Oxydase

(1) Poursuite de l’identification et réalisation de l’antibiogramme en fonction de l’examen direct

du produit pathologique et du nombre de colonies

 Noter dans le cahier de bactériologie : résultats, opérations effectuées (exemple : gram sur
colonie, catalase, oxydase, aspects des colonies…).

J+2:
Lecture des galeries d’identification et éventuellement de l’antibiogramme réalisés à J + 1

 L’ensemble des données est reporté quotidiennement dans le cahier de bactériologie

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